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インビトロ転写される RNA ベースのルシフェラーゼをレポーターアッセイで、ポックスウイルス感染細胞における翻訳調節を研究する
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In Vitro Transcribed RNA-based Luciferase Reporter Assay to Study Translation Regulation in Poxvirus-infected Cells
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インビトロ転写される RNA ベースのルシフェラーゼをレポーターアッセイで、ポックスウイルス感染細胞における翻訳調節を研究する

DOI:
10.3791/59626-v

•

08:58 min

•

May 01, 2019

•

, , ,
1Division of Biology,Kansas State University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
  • 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
  • 04:22Cells Transfection with mRNA
  • 06:04Luciferase Activity Measurement
  • 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
  • 08:21Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

In vitro 転写された RNA ベースのルシフェラーゼを使用してポックスウイルスに感染した細胞で mRNA 翻訳調節を研究するためのプロトコールを提示します。このアッセイは、5 '-非翻訳領域 (UTR) および 3 '-UTR を含む、mRNA のシス要素による翻訳調節を研究するために使用することができます。この方法を使用して、異なる翻訳開始モードを調べることもできます。

Tags

In Vitro Transcribed RNALuciferase Reporter AssayTranslation RegulationPoxvirus-infected CellsPoly(A) Tail5’UTR3’UTRCap ModificationPCR AmpliconT7 PromoterFirefly LuciferaseRenilla LuciferaseKozak SequenceAgarose Gel Electrophoresis

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