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Ensaio de repórter luciferase à base de RNA transcrito in vitro para estudar a regulação da tradução em células infectadas pelo poxvirus
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Chapters
- 00:04Title
- 00:42DNA Template Preparation by PCR for In Vitro Transcription
- 03:20mRNA Generation by In Vitro Transcription
- 04:22Cells Transfection with mRNA
- 06:04Luciferase Activity Measurement
- 07:29Results: Translation Efficiency of a Fluc mRNA Determined by Luciferase Reporter Assay
- 08:21Conclusion
Nós apresentamos um protocolo para estudar o Regulamento da tradução de mRNA em pilhas poxvirus-contaminadas usando in vitro o ensaio do repórter da luciferase do RNA-baseado transcrito. O ensaio pode ser usado para estudar a regulação da tradução por cis-elementos de um mRNA, incluindo 5 '-região não traduzida (UTR) e 3 '-UTR. Diferentes modos de iniciação de tradução também podem ser examinados usando este método.
