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Un protocolo basado en FACS para aislar el ARN de las células secundarias de Drosophila Male Accessory Glands
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands
DOI:

06:54 min

September 05, 2019

, ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:03Accessory Gland Dissection
  • 02:50Tissue Digestion and Mechanical Cell Dissociation
  • 04:08Results: Representative Secondary Cell (SC) RNA Isolation and Analysis
  • 05:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aquí, presentamos un protocolo para disociar y ordenar una población celular específica de las glándulas accesorias masculinas Drosophila (células secundarias) para la secuenciación de ARN y RT-qPCR. El aislamiento celular se logra a través de la purificación FACS de células secundarias que expresan GFP después de un proceso de disociación de múltiples pasos que requiere disección, digestión de proteasas y dispersión mecánica.

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