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Un nuovo toolkit per la valutazione delle funzioni geniche utilizzando la stabilizzazione condizionale Cas9
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JoVE Journal Genetics
A New Toolkit for Evaluating Gene Functions using Conditional Cas9 Stabilization
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Un nuovo toolkit per la valutazione delle funzioni geniche utilizzando la stabilizzazione condizionale Cas9

DOI:
10.3791/60685-v

•

08:20 min

•

September 02, 2021

•

,
1Cold Spring Harbor Laboratory, 2Faculty of Pharmacy,University of Ljubljana

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:00Lentiviral Preparation
  • 02:47Determining Virus Titer and Transduction Efficacy with Flow Cytometry
  • 04:27Lentiviral Transduction of Target Cells and Conditional Induction of Cas9 Mediated Gene Editing
  • 06:06Results: Analysis of Reversibility and Rapidity of Destabilized DD-Cas9 Protein
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Qui, descriviamo uno strumento di modifica del genoma basato sulla stabilizzazione temporale e condizionale della proteina 9 (Cas9) associata a ripetizione palindromica corta (CRISPR)(Cas9) raggruppata regolarmente intervallata sotto la piccola molecola, Shield-1. Il metodo può essere utilizzato per cellule in coltura e modelli animali.

Tags

Keywords: CRISPR-Cas9Gene EditingConditional Cas9 StabilizationShield-1Essential GenesTumor Survival GenesDD-Cas9In VivoIn VitroBlood-brain BarrierHEK293T CellsTransfectionVirus SupernatantVirus Titer

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