Simultaneous Affinity Enrichment of Two Post-Translational Modifications for Quantification and Site Localization

00:04Introduction
01:19Desalting of Non-Enriched Proteolytic Peptides via Large-Scale Solid-Phase Extraction
02:46Simultaneous Enrichment of K-acetylated and K-succinylated Peptides with Immunoaffinity Beads
04:30Elution of the Peptides Bound to Antibody Beads
07:02Data Acquisition Using DDA (Data-Dependent Acquisition) and DIA (Data-Independent Acquisition)
10:02Results: One-pot Enrichment of PTMs
11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este flujo de trabajo describe el rendimiento del enriquecimiento eficiente en tiempo y costo de múltiples modificaciones post-traduccionales de proteínas (PTF) simultáneamente para el análisis proteómico global cuantitativo. El protocolo utiliza el enriquecimiento de PTM a nivel de péptido con múltiples anticuerpos conjugados, seguido de un análisis de espectrometría de masas de adquisición independiente de datos para obtener información biológica sobre la conversación cruzada PTM.

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Principios de la recombinasa específica de sitio (RSS) Tecnología

La detección de modificaciones post-traduccionales de los nativos intactos nucleosomas por ELISA

La cuantificación de proteínas mediante el enriquecimiento de inmunoafinidad péptido acoplado a espectrometría de masas

Simultaneous Multicolor Imaging of Biological Structures with Fluorescence Photoactivation Localization Microscopy

Florecimiento extracción de proteínas de levadura y purificación para el Estudio de la función, las interacciones y modificaciones post-traduccionales

Identificación de modificaciones post-traduccionales de la proteína vegetal Complejos

Alta resolución Cuantificación de celulosa cristalina acumulación en<em> Arabidopsis</em> Las raíces para monitorear la célula específica de tejido de pared Modificaciones

Flujo de trabajo completo para el análisis de las histonas modificaciones post-traduccionales El uso de espectrometría de masas de abajo hacia arriba: A partir de la histona Extracción de Análisis de Datos

Cuantificación de proteína específica lisina acetilación y Succinylation estequiometría usando Spectrometry total de la adquisición de datos-independiente

Alinee y Worm_CP, dos tuberías de código abierto para el enderezamiento y cuantificación de datos de imagen de fluorescencia obtenidos de Caenorhabditis elegans

Enriquecimiento de afinidad simultánea de dos modificaciones post-traduccionales para la cuantificación y la localización del sitio

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