Journal
/
Biology
/
Parallell høy gjennomstrømning enkelt molekyl kinetisk analyse for stedsspesifikk DNA cleavage
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Parallel High Throughput Single Molecule Kinetic Assay for Site-Specific DNA Cleavage

Parallell høy gjennomstrømning enkelt molekyl kinetisk analyse for stedsspesifikk DNA cleavage

DOI:
10.3791/61236-v

•

06:51 min

•

May 06, 2020

•

, ,
1Department of Biology,Emmanuel College, 2Department of Chemistry and Physics,Emmanuel College

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:59Making the Flow Cell
  • 02:10Tethering of DNA and Beads
  • 05:16Results: NdeI Cleavage is Dependent on Concentrations of Protein and Magnesium
  • 06:14Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

En svært parallell metode for måling av stedsspesifikk spaltning av DNA på enkeltmolekylnivå er beskrevet. Denne protokollen viser teknikken ved hjelp av restriksjonen endonuclease NdeI. Metoden kan enkelt endres for å studere enhver prosess som resulterer i stedsspesifikk DNA-spalting.

Tags

DNA CleavageSingle Molecule KineticsHigh ThroughputDNA BindingDNA ModificationDNA Target SearchFlow CellTetheringPCRBuffer AAnti-digoxigeninFab Fragments

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/61236?article_type=v

Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology
check_url/61236?article_type=v

Visualizing Single-molecule DNA Replication with Fluorescence Microscopy
check_url/61236?article_type=v

Direct Observation of Enzymes Replicating DNA Using a Single-molecule DNA Stretching Assay
check_url/61236?article_type=v

High-throughput Saccharification Assay for Lignocellulosic Materials
check_url/61236?article_type=v

En raskere, High Resolution, mtpa-GFP-baserte Mitokondrie Fusion Assay Innhente Kinetic Data om flere celler i parallell Bruke konfokalmikroskopi
check_url/61236?article_type=v

High-throughput screening for små-molekyl modulatorer av Inderlige likeretter kaliumkanaler
check_url/61236?article_type=v

Enkelt-molekyl Imaging of Gene Regulation<em> In vivo</em> Ved hjelp av Cotranslational Aktivering av Cleavage (CoTrAC)
check_url/61236?article_type=v

Kombinere Single-molekyl Manipulasjon og bildebehandling for studier av protein-DNA interaksjoner
check_url/61236?article_type=v

Studerer DNA Looping av Single-Molecule FRET
check_url/61236?article_type=v

En manuell Small Molecule Screen Nærmer Høy throughput Bruke Sebrafisk embryo

Read Article