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थर्मोटोगा मारिटिमा M42 अमीनोपेप्टिडेस TmPep1050 के ओलिगोमेरिक राज्य संक्रमण का अध्ययन करने के लिए एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
X-Ray Crystallography to Study the Oligomeric State Transition of the Thermotoga maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050
DOI:

11:27 min

May 13, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:03Activity Assay
  • 02:19Apoenzyme Preparation
  • 03:32Dimer Preparation
  • 04:03Microseeding
  • 05:01X-Ray Diffraction
  • 05:48Indexation
  • 06:50Molecular Replacement
  • 08:04Model Building
  • 09:07Results: Representative Thermotoga Maritima M42 Aminopeptidase TmPep1050 Oligomeric State Transition
  • 10:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

इस प्रोटोकॉल को संरचनात्मक स्तर पर TmPep1050, एक M42 अमीनोपेप्टिडेस के डिमर-डोडेकामर संक्रमण का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है। यह प्रोटीन शुद्धिकरण से लेकर एक्स-रे डेटा प्रोसेसिंग तक की सीधी पाइपलाइन है । क्रिस्टलोलोजेनेसिस, डेटा सेट इंडेक्सेशन, और आणविक प्रतिस्थापन अध्ययन के एक मामले के माध्यम से जोर दिया गया है, TmPep1050H60A H307A संस्करण ।

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