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5-Ethynyl-2'-Desoxyuridine/Phospho-Histone H3 Protocolo de rotulagem dupla para análise de progressão do ciclo celular em células-tronco neurais Drosophila
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5-Ethynyl-2′-Deoxyuridine/Phospho-Histone H3 Dual-Labeling Protocol for Cell Cycle Progression Analysis in Drosophila Neural Stem Cells

5-Ethynyl-2'-Desoxyuridine/Phospho-Histone H3 Protocolo de rotulagem dupla para análise de progressão do ciclo celular em células-tronco neurais Drosophila

DOI:
10.3791/62642-v

•

09:34 min

•

May 04, 2021

•

,
1Cell Biology,University of Bern, 2Department of life sciences and medicine,University of Luxembourg

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:40Dissection of Third Instar Larval Brains and 5-ethynyl-2 -deoxyuridine (EdU) Incorporation
  • 02:23EdU Detection, DNA Staining, and Mounting
  • 04:29Imaging
  • 05:52Image Analysis
  • 08:06Results: EdU and pH3 Dual-labeling for Cell Cycle Progression Analysis in Drosophila Neural Stem Cells
  • 09:01Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

A análise do ciclo celular com 5-ethynyl-2'-desoxyuridina (EdU) e rotulagem phospho-histone H3 (pH3) é um procedimento de várias etapas que pode exigir uma otimização extensiva. Aqui, apresentamos um protocolo detalhado que descreve todas as etapas para este procedimento, incluindo análise de imagens e quantificação para distinguir células em diferentes fases do ciclo celular.

Tags

Keywords: 5-Ethynyl-2′-DeoxyuridinePhospho-Histone H3Cell CycleNeural Stem CellsDrosophilaImmunostainingImage AcquisitionImage ProcessingMitosisG1S PhaseM PhaseSchneider’s Dissection MediumPBSForcepsDissection MicroscopeEDUFixationPBSTHoechst 33342

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