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ANS se une al dominio N recombinante Ca2+-ATPasa. Los espectros de fluorescencia muestran un patrón similar a FRET sobre la excitación a una longitud de onda de 295 nm. La modificación química del Trp mediada por NBS apaga la fluorescencia del dominio N, lo que conduce a la ausencia de transferencia de energía (FRET) entre el residuo de Trp y el ANS.