Journal
/
Medicine
/
Kerneisolering og multiplexering med lavt input med stregkodede antistoffer af musesympatiske ganglier til enkeltkerne RNA-sekventering
JoVE Journal
Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Medicine
Low-input Nucleus Isolation and Multiplexing with Barcoded Antibodies of Mouse Sympathetic Ganglia for Single-nucleus RNA Sequencing

Kerneisolering og multiplexering med lavt input med stregkodede antistoffer af musesympatiske ganglier til enkeltkerne RNA-sekventering

DOI:
10.3791/63397-v

•

10:44 min

•

March 23, 2022

•

, , , , , , ,
1Department of Anatomy & Embryology,Leiden University Medical Center, 2Department of Cardiology,Leiden University Medical Center, 3Department of Medical Statistics and Bioinformatics,Leiden University Medical Center

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:59Dissection of Adult Mouse Superior Cervical Ganglia
  • 02:12Dissection of Adult Mouse Stellate Ganglia
  • 02:57Isolation and Cryopreservation of Mouse Ganglionic Cells
  • 04:56Nucleus Isolation
  • 06:50Nucleus Barcoding with Hashtag Oligos and Multiplexing
  • 08:24Results: Quality Control Analysis of Single-Nucleus cDNA Library Preparation and snRNA-Sequencing
  • 09:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokol beskriver den detaljerede prøveforberedelse med lavt input til enkeltkernesekventering, herunder dissektion af musens overlegne cervikale og stellatganglier, celledissociation, kryokonservering, kerneisolering og hashtag-stregkodning.

Tags

Keywords: Single-nucleus RNA SequencingCardiac Sympathetic NeuronsDroplet-based SequencingHashtag OligosMultiplexingSuperior Cervical GangliaStellate GangliaTrypsin Digestion

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/63397?article_type=v

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium
check_url/63397?article_type=v

Sequencing of Bacterial Microflora in Peripheral Blood: our Experience with HIV-infected Patients
check_url/63397?article_type=v

Indsamling og brydning af spyt DNA til Next Generation Sequencing
check_url/63397?article_type=v

Isolation og formering af cirkulerende tumorceller fra en mus Cancer Model
check_url/63397?article_type=v

Uvildige Deep Sekventering af RNA vira fra kliniske prøver
check_url/63397?article_type=v

Romanen tilgang til simultan optagelse af Renal sympatiske Nerve aktivitet og blodtryk med intravenøs Infusion i bevidst, uhæmmet mus.
check_url/63397?article_type=v

Ultrahigh opløsning musen optisk kohærens tomografi til støtte intraokulært injektion i Retinal genterapi forskning
check_url/63397?article_type=v

Hele genom sekventering af Candida glabrata for påvisning af markører af svampedræbende resistens
check_url/63397?article_type=v

Isolering af atrieflimren Cardiomyocytes fra en rotte Model af metabolisk syndrom-relaterede hjertesvigt med bevarede uddrivningsfraktion
check_url/63397?article_type=v

Isolering af primære mus hepatocytter for spirende Protein syntese analyse af ikke-radioaktive L-azidohomoalanine mærkning metode

Read Article