Journal
/
Biochemistry
/
Single-Molecule Analyse van Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motoren
JoVE Journal
Biochemistry
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Single-Molecule Analysis of Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motors
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Single-Molecule Analyse van Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motoren

DOI:
10.3791/63837-v

•

08:16 min

•

July 27, 2022

•

, , ,
1Discipline of Biological Engineering,Indian Institute of Technology Gandhinagar, 2Department of Biotechnology and Bioinformatics,Sambalpur University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:22P0 Virus Stock Generation
  • 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
  • 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
  • 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
  • 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
  • 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Deze studie beschrijft de zuivering van KIF1A (1-393LZ), een lid van de kinesine-3-familie, met behulp van het Sf9-baculovirusexpressiesysteem. In vitro single-molecule en multi-motor zweefanalyse van deze gezuiverde motoren vertoonde robuuste motiliteitseigenschappen vergelijkbaar met motoren van zoogdiercellysaat. Sf9-baculovirussysteem is dus vatbaar voor expressie en zuivering van motoreiwit van belang.

Tags

Keywords: Sf9 CellsBaculovirus ExpressionSingle-molecule AnalysisKinesin-3 MotorsSuperprocessive MotorsSingle-molecule MotilityMulti-motor Gliding AssaysCytoskeletal ProteinsDionineMyosinProtein PurificationAffinity Purification

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/63837?article_type=v

High Precision FRET op single-molecuul niveau voor biomolecule structuur bepaling
check_url/63837?article_type=v

Single-molecuul manipulatie van G-quadruplexes door magnetische pincet
check_url/63837?article_type=v

Met behulp van 3 Single-molecuul FRET te bestuderen de correlatie van eiwitinteractie
check_url/63837?article_type=v

Covalente immobilisatie van eiwitten voor de enkel molecuul Force spectroscopie
check_url/63837?article_type=v

Proteoom bestrijkende kwantificering van Labeling homogeniteit op het niveau van één molecuul
check_url/63837?article_type=v

Conventionele BODIPY Conjugates voor Live-Cell Super-Resolution Microscopie en Single-Molecule Tracking
check_url/63837?article_type=v

Een in vitro single-molecule imaging assay voor de analyse van cap-afhankelijke vertaalkinetiek
check_url/63837?article_type=v

Single cell analyse van transcriptioneel actieve allelen door single molecule FISH
check_url/63837?article_type=v

Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage
check_url/63837?article_type=v

Single Molecule Fluorescence Energy Transfer Study van ribosoom eiwitsynthese

Read Article