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Sf9 정제 초공정 키네신-3 제품군 모터의 단일 분자 분석
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Single-Molecule Analysis of Sf9 Purified Superprocessive Kinesin-3 Family Motors
DOI:

08:16 min

July 27, 2022

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:22P0 Virus Stock Generation
  • 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
  • 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
  • 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
  • 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
  • 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
  • 07:24Conclusion

Summary

Automatic Translation

이 연구는 Sf9-바쿨로바이러스 발현 시스템을 사용하여 키네신-3 계열의 구성원인 KIF1A(1-393LZ)의 정제에 대해 자세히 설명합니다. 이들 정제된 모터의 시험관내 단일분자 및 다중-모터 글라이딩 분석은 포유동물 세포 용해물로부터의 모터에 필적하는 강력한 운동성 특성을 나타냈다. 따라서, Sf9-바쿨로바이러스 시스템은 관심있는 운동 단백질을 발현하고 정제하는 것이 가능하다.

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