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Metodi in vitro bottom-up per saggiare l'organizzazione ultrastrutturale, il rimodellamento della membrana e il comportamento di sensibilità alla curvatura delle settine
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Bottom-Up In Vitro Methods to Assay the Ultrastructural Organization, Membrane Reshaping, and Curvature Sensitivity Behavior of Septins
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Metodi in vitro bottom-up per saggiare l'organizzazione ultrastrutturale, il rimodellamento della membrana e il comportamento di sensibilità alla curvatura delle settine

DOI:
10.3791/63889-v

•

09:09 min

•

August 17, 2022

•

, , , , , , , , , , ,
1Laboratoire Physico Chimie Curie, Institut Curie, PSL Research University,Sorbonne Université, 2Institut Fresnel, CNRS UMR7249,Aix Marseille Univ, Centrale Marseille, 3Department of Bionanoscience, Kavli Institute of Nanoscience Delft,Delft University of Technology, 4Department of Chemical Engineering,Imperial College London, 5Sorbonne Université, CNRS, Institut de Biologie Paris-Seine (IBPS),Service de microscopie électronique (IBPS-SME), 6Laboratoire Matière et Systèmes Complexes (MSC),Université Paris Cité, 7Institute of Biotechnology,Czech Academy of Sciences, BIOCEV

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:49Designing Wavy NOA (Norland Optical Adhesive) Replica from Wavy PDMS (Polydimethylsiloxane) Patterns
  • 01:49Generation of a Supported Lipid Bilayer and Protein Incubation
  • 03:22Sample Fixation, Sample Dehydration, Critical Point Drying
  • 04:43Sample Mounting and Coating
  • 05:54Acquire the Images Using a Field-Emission SEM (FE-SEM) Microscope
  • 06:56Results: Analysis of the Self-Assembly of Septins at the Lipid Membrane
  • 08:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Le settine sono proteine citoscheletriche. Interagiscono con le membrane lipidiche e possono percepire ma anche generare curvatura della membrana su scala micron. Descriviamo in questo protocollo metodologie bottom-up in vitro per l'analisi delle deformazioni della membrana, del legame della settina sensibile alla curvatura e dell'ultrastruttura del filamento di settino.

Tags

In Vitro MethodsUltrastructural OrganizationMembrane ReshapingCurvature SensitivitySeptinsCytoskeletal FilamentsNorland Optical AdhesivePolydimethylsiloxaneSupported Lipid BilayerScanning Electron Microscopy

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