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粗生物学的サンプル中のトポイソメラーゼ1活性のシンプルで高速なローリングサークル増幅ベースの検出
JoVE Journal
Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
Simple and Fast Rolling Circle Amplification-Based Detection of Topoisomerase 1 Activity in Crude Biological Samples
DOI:

10:13 min

December 02, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Functionalized Slides
  • 01:34Generation of Closed Circular Substrates
  • 02:16Blocking of the Wellmaker and Hybridization of the Circles
  • 03:48Rolling Circle Amplification (RCA) and Visualization by Fluorescence Microscopy
  • 05:54Coupling of HRP-Conjugated Antibody to Rolling Circle Products and Visualization
  • 07:57Results: Detection of Topoisomerase 1 Activity Using the REEAD Assay
  • 09:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

ローリングサークル増強酵素活性検出アッセイを用いたトポイソメラーゼ1活性の高感度かつ定量的検出のためのプロトコルが記載されている。この方法では、精製成分または細胞/組織抽出物からトポイソメラーゼ1活性を検出できます。このプロトコルは、酵素活性の検出を含むあらゆる分野で幅広い用途があります。

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