Abstract
Ишемическая болезнь сердца (ИБС), или острый коронарный синдром (ОКС), является одной из ведущих причин смерти в Соединенных Штатах. ИБС характеризуются снижением кровоснабжения сердца, что приводит к потере кислорода к и последующему некрозу сердечной мышцы. Модель MI приобрела популярность для использования в качестве краткосрочной модели ишемии-реперфузии и долгосрочной модели постоянного лигирования. Ниже мы опишем надежный метод постоянной перевязки ЛАДА. С мыши генной инженерии технология становится более продвинутым, и с увеличением доступности качественных мышиных хирургических инструментов, мышь стала популярной моделью для УИ операций. Наша хирургическая модель включает в себя использование легко обратимой анестетики для быстрого восстановления мыши; минимально инвазивная эндотрахеальная интубация без привлечения трахеотомии; и плевроцентоз через оригинальный сайт торакотомии без создания дополнительного разреза в груди, каксделано в некоторых других методах, чтобы эффективно удалить лишнюю кровь и воздух из полости грудной клетки. Этот метод является сравнительно менее инвазивным, чем другие методы, которые значительно снижают хирургические и послеоперационные осложнения и смертность и улучшают воспроизводимость.
Introduction
Ишемическая болезнь, или ACS, является самым распространенным сердечно - сосудистых событий и будет считаться основной причиной заболеваемости и смертности во всем мире в 2020 году 1. Причиной ACS является наличие инфаркта тромбоза из - за разрыва коронарных атеросклеротических бляшек , который блокирует или уменьшает приток крови к ткани сердца 2. Таким образом, имеются клинические признаки , согласующиеся с наличием острой ишемии миокарда, такие как инфаркт миокарда (ИМ) 3, 4. МИ приводит к потере массы кардиомиоцитов и прогрессированию патологического ремоделирования желудочков, что может привести к дисфункции желудочка и сердечной недостаточности 5, 6.
Одним из наиболее эффективных способов изучения ИБС были имитировать инфаркт миокарда человека в животной модели. Это достигается за счет окклюзии LAD вмышей. Используя эту модель, мы изучаем, как сердце может быть защищено от повреждений в результате ИБС.
За последнее десятилетие исследователи перешли от использования более крупные животные моделей для мелких животных, в том числе перехода от крыс к мышам. Меньше , мышиная модель начинает быть предпочтительным по многим причинам, в том числе их небольшого размера, большого размера помета, низкая стоимость , чтобы поддержать, и короткий период беременности, а также для экспансивной наличия трансгенных и нокаут гена моделей 7. Хотя мыши имеют небольшие размеры, новые хирургические инструменты, специально разработанные для них помогли в этом развитии. Наш метод использует эти новые хирургические инструменты.
Хотя несколько методов реализация инвазивной трахеотомии, мы используем менее инвазивный метод интубации трахеи. Использование накладных освещения ротоглотки, мы интубация без создания каких-либо разрезов, обеспечивая более безопасный и менее травмирующий опыт для тон животное. Затем мышь помещали на искусственной вентиляции легких и продолжал изофлуран в течение всей процедуры. Из-за короткую продолжительность анестезии, производимых наркотиками, это займет всего несколько минут животного, чтобы оправиться от наркоза после его прекращения. Наша хирургическая модель также включает в себя минимально инвазивной Плевроцентоз. Тщательное удаление крови и избыточного воздух из полости грудной клетки, используя Плевроцентоз через оригинальные торакотомии разрез обратилось общее послеоперационное усложнение ЛАДА перевязки: натяжной пневмоторакс. Этот метод, который исключает необходимость в двух дополнительных разрезах, используемых в других методах-один для трахеотомии, а другой для торакоцентеза-дали меньшего число послеоперационных осложнений и привел к резкому снижению смертности.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Этот протокол животное было рассмотрено и одобрено Animal Care и использование комитета Institutional (IACUC) в больнице Род-Айленд по.
1. Анестезия и интубации
- Взвесьте мышь, чтобы рассчитать дозировку послеоперационного обезболивающего.
- Поместите мышь в индукционной камере и доставить 4% изофлуран в течение 9 - 10 мин, наблюдение за животным во всем. Включите горячую шарик стерилизатор, так что устройство может предварительно нагреть до приблизительно 250 ° С. Предварительный нагрев займет 15 - 20 мин.
- После того, как мыши достигает глубокой плоскости анестезии, с частотой дыхания приблизительно 32 вдохов / мин, поместите лежачем мыши на борту пенополистирола и использовать резинку, прикрепленную под верхними резцами, чтобы держать рот открытым. Подтвердите седации, выполняя носок щепотку. Установите на осветитель высокой интенсивности выше мыши, так что ротоглотки могут быть визуализированы.
- Использование изогнутых щипцов, чтобы открыть челюсти и другую парущипцов поднять язык пути. Убедитесь, что в то время интубации расположена на или чуть ниже уровня глаз с телом мыши. Рекомендуется использование хирургических луп.
- Визуализируйте открытие и закрытие голосовых связок. При открытии вставки 20-го калибра, 1-в внутривенного (IV) катетера с тупым наконечником иглы интродьюсера. Используйте иглу, чтобы направлять катетер в отверстие трахеи, но избежать введения иглы в трахею. Проверка правильного размещения может быть сделано с помощью пластиковой пипетки передачи.
- Передача интубированного мышь к рабочей поверхности, снабженной нагревательным устройством. Подключите мышь к небольшому грызуна вентилятора, установленного на ударный объем 150 мкл / хода и скорости хода 130 ударов / мин.
- Deliver 2,5% изофлуран. Проверьте интубации путем проверки двустороннего подъема груди. Проверка анестезии, выполняя носок щепотку. Мышь может потребоваться 5 - 10 мин на вентиляторе, чтобы стать полностью наркозом.
- Лента вниз интубации трубки на соединительном участке между вентилятором и IV катетера. Ленточный вниз конечностей. Поместите стерильные смазывающие капли на глазах.
- Обрежьте вентральную левую сторону грудной клетки с электрической бритвой. Пыль от бритого меха с сухими салфетками и нанести небольшой слой крема для удаления волос с помощью стерильного ватного тампона. Крем должен оставаться в контакте с волосяными фолликулами в течение примерно 30 - 45 с.
- В то время как процессы крема, поместить три стерильные ватные тампоны в три 1,5-мл пробирки, наполненной Бетадин, чтобы впитать. С помощью салфетки, смоченной дистиллированной воды, аккуратно вытереть крем и мех.
- Очистить операционное поле три раза, чередуя Бетадин и стерильной 70% изопропанол приготовительных колодки, чистку в круговом движении движущегося от центра к периферии. Поместите стерильную драпировку с четвертью размером дыры над операционным полем мыши.
- Очистите область вокруг МОВе с 70% -ным этанолом. Проверьте наркоз еще раз с бордюрным крайним случаем.
3. ЛАД Лигирование
- Поместите автоклавные хирургические инструменты в горячем стерилизаторе шарика, предварительно нагретых до 250 ° С в течение приблизительно 20 с. Поместите простерилизованные инструменты на стерильном автоклавного хирургической простыне. Донские хирургические перчатки.
- Использование тонкого кончика пинцета осторожно поднимите кожу в точке примерно на 5 мм слева от известного мечевидного хряща. Используйте хирургический скальпель с № 10 лезвием, чтобы создать вертикальный разрез в коже от этой точки вверх, до уровня рукоятки.
- Использование изогнутых щипцов, чтобы аккуратно отделить кожу и мышечные слои. Открыть мышечный слой, после разреза кожи. Вставьте две 5-0 полипропиленовых швы через мышечный слой, по одному с каждой стороны разреза, и закрепить швы временно с помощью зажимов, чтобы держать мышечный слой открытым.
- Выявление и сделать надрез в третьем межреберье, следуяестественный угол грудной клетки. Снимите ленту с левой конечности мыши и закрепить его левую заднюю лапку в правую заднюю ногу с лентой. Вырезать длинный кусок ленты и закрепите левую переднюю ножку к рабочей поверхности в слегка приподнятой позиции. Почистите перчатки с 70% этанола.
- Используйте втягивающий осторожно раскрывайте 3 - й и 4 - я ребро. Вырезать небольшой участок стерильной марли, приблизительно 1 дюйм х ½ дюйма, и погрузить его в стерильном 0,9% физиологического раствора. Выжмите избыток раствора и использовать пинцет, чтобы аккуратно вставить марлю против левого легкого, чтобы предотвратить случайное повреждение легких во время процедуры.
- Аккуратно снимите тонкий перикард с пинцетом.
- Оторвите небольшое количество хлопка от стерильного ватного тампона и раскатать его в маленький шарик. Dip этого ватного тампона в стерильный 0,9% -ный солевой раствор и аккуратно тампон по поверхности сердца, чтобы оценить артерии. Аккуратно нажмите левую ушную раковину вверх и найти коронарные артерии приНит.
- Определить ЛАД и передать шовный материал 8-0 нейлона под LAD; полный два броска, чтобы обеспечить перевязку. Если перевязка успешно, левый желудочек дистальнее лигатуры воли бланшируют.
- С помощью пинцета удалите марлю вставленную ранее, а затем аккуратно удалить втягивающий. Вставка 6-в, 25-калибровочной гибкая трубка, прикрепленная к 25-калибровочной игле в грудной полость через отверстие торакотомии. Advance приблизительно 1 - 2 в насосно-компрессорных трубах в указанное выше левом легком пространство. Верните мышь в положении лежа на спине и чистить перчатки с 70% этанола.
- Используйте 5-0 полипропиленовых швы в простом прерванном шаблоне, чтобы закрыть грудную клетку, держа трубку в груди на месте. Удалите два швов, крепящих мышечный слой открыты. Используйте 5-0 полипропиленовые швы в простой непрерывной картине, чтобы закрыть мышечный слой, опять же держа трубку в груди на месте.
- Приложить 1-мл шприц с 25-го калибра иглы на трубке в грудной клетке. Осторожно потяните вверх на погружениег, одновременно постепенно извлекая грудь трубку из полости грудной клетки с щипцами. Извлеките трубку медленно, как этот шаг удаляет избыток воздуха и крови, которые в противном случае стало бы в ловушке в грудной полости и в результате пневмоторакса.
- После того как шприц заполнен, отсоединить шприц от иглы и утилизация отходов в химическом стакане с отходами или раковину. Продолжайте этот процесс до тех пор, пока грудь трубка полностью извлечена. Убедитесь в том, что грудь плотно запечатана.
- Уменьшение изофлурана до 1,5%. Закройте кожу 4-0 полипропиленовых швов в простом прерванном рисунке. Включите изофлуран испарителя выключен.
- Администрирование 0,1 мг / мл бупренорфинов в 0,9% физиологическом растворе с помощью внутрибрюшинного (IP) введения. Местно применяют 2 мг / мл лидокаина с 2 мг / мл бупивакаина в 0,9% солевом растворе до разреза. Администрирование между 200 - 500 мкл 0,9% физиологического раствора с помощью подкожной инъекции, масштабирование количества солевого раствора к массе мыши.
- Подождите, через 5 мин после AdminiStering на обезболивающих, чтобы удалить мышь из интубации трубки. Это помогает при переходе выключенного вентилятора.
- Если мышь не имеет двусторонний увеличения груди сразу от ИВЛ, выполнить иглы декомпрессии. Чтобы сделать это, ввести 25 калибра стерильную иглу и шприц 1-мл между 3 - м и 4 - м ребрами , пока она не войдет в грудную полость, обозначаемый внезапным уменьшением сопротивления. Потяните осторожно на поршень, чтобы удалить избыток воздуха.
- Когда мышь демонстрирует адекватную двустороннюю частоту дыхания и глубину и реагирует на носок щепотку, поместите мышь в чистой клетке восстановления под нагревательной лампой. Обеспечить мышь с влажной пищей и бутылки с водой, мониторинг в ламинарном проточном боксе в течение 15 - 20 мин. Монитор для преувеличенного усилия дыхания, чрезмерного кровотечения, или других потенциально опасной для жизни осложнений.
- В течение следующих трех дней, вводить 0,1 мг / мл бупренорфина обезболивающее через IP вjection два раза в день. Монитор мыши ежедневно.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Мышей умерщвляли через двадцать восемь дней после операции, и сердца собирают и исследуют. Мышей анестезируют с помощью 50 - 75 мг / кг кетамина и 5 - 10 мг / кг ксилазина. Когда животное находится под адекватной анестезией, грудная полость открыта, и с использованием 23-иглы калибра, холодный хлорид калия (KCl, 30 мМ) вводят в задней базальную область сердца. Сердце арестован в диастоле. Для дальнейшей проверки лигирования, сердце удаляется от животного и вводят 4% параформальдегидом, а затем 1% Голубой краситель Эванса. Рисунок 1 показывает отсутствие синего Эванса в ишемическом левом желудочке. Рисунок 2 демонстрирует правильную установку эндотрахеальной интубации. Рисунок 3 показывает размещение трубки грудной клетка для плевроцентоза в исходном месте разреза, с мышечным слоем зашивает вокруг трубы до экстракции воздуха из грХест полости. Трехцветное окрашивание показывает увеличение коллагена в инфарктной области (Рисунок 4).
Рисунок 1: Синий Injection Эвана. Синие инъекции Эваны показывает отсутствие красителя в ишемизированной ткани, локализованное в инфаркте области левого желудочка. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 2: эндотрахеальная интубация. Демонстрация правильной установки эндотрахеальной интубации. Оператор, ношение хирургических луп, сидит на уровне глаз с помощью мыши. Осветитель высокой интенсивности ориентирован вниз на области трахеи, просвечивающий Уплотнительныйropharynx. Резинка зацепляется за верхними резцами, позволяя оператору открыть рот с изогнутым пинцетом. Изогнутые щипцы используются для хранения языка на сторону для четкой визуализации. Внутривенный катетер трахеи канюли с тупым кончиком иглы интродьюсера продвигают под небольшим углом вверх, а открытие и закрытие голосовых связок визуализируется. Визуализация голосовых связок открытия и закрытия до попытки интубации является одним из критических точек для успешной интубации. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 3: Плевроцентоз. Размещение трубки грудь, используемая для плевроцентоза, вставленной в исходном месте разреза. Мышечный слой ушивают закрыт вокругтрубка перед воздухом внутри полости грудной клетки экстрагируют с помощью шприца, а затем грудь трубки удаляется. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 4: Окрашивание трехцветный. Левая панель: управление, не ЛАД перевязанным сердца. Правая панель: ЛАД перевязанных, инфаркт сердце. Трехцветный краситель (Masson) с использованием Biebrich алых кислотами раствора фуксина, раствора фосфовольфрамовым / фосфорно-молибденовой кислотой и анилином синего показывает увеличение коллагена (синий) в качестве маркеров для фиброза в разрежут в поперечном направлении левого желудочка инфаркта области. Bar = 500 мкм. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
С увеличением использования модели MI в лабораториях, описанная процедура направлена на повышение эффективности и выживаемости мышей, минимизируя их послеоперационную боль и дискомфорт. Этот протокол стремится свести к минимуму смертности, делая многочисленные улучшения в различные аспекты процедуры ЛАДА перевязки. Есть несколько различий. Некоторые исследования мышиных интубации , которые используют кетамин и ксилазин вместе с изофлураном для индукции, из - за благо их большей продолжительность анестезии, показали увеличение смертности 8. Наш метод использует только изофлуран для индукции, что значительно снижает вероятность развития осложнений, связанных с наркотиками. Другой подобный протокол ЛАДА лигирования включает в себя трахеотомию, производя длительное время восстановления и повышенную потребность в точную подготовке 9. Процедура мы описываем здесь используется неинвазивный метод интубации трахеи, в результате чего ИоWER смертность и выше воспроизводимость результатов. Кроме того, вместо того, только с использованием электрической бритвы, наша процедура также использует крем для удаления волос для удаления меха, обеспечивая совершенно четкую визуализацию стерильной области менее чем за 1 мин.
Еще одним ключевым отличием является изменение положения мыши, которое происходит после, а не до того, начальные разрезы. Создание разрезов в то время как мышь лежа на спине позволяет более прямую и точную визуализацию ориентиров, такие как мечевидный хрящ, что приводит к более высокой воспроизводимости результатов. Наш метод также использует стерильные ватные тампоны, а не Cauter кровотечение управления, уменьшая ятрогенные ожоги и риск заражения. Помимо этих различий, введение грудной трубки для плевроцентоза особенно отметить, что наш метод не предполагает создание нового разреза для трубки. Скорее всего, она включает в себя вставить трубку в предыдущий разрез, снова снижается морствиях. Процедура мы описываем также включает в себя: (1) использовании втягивающего, что позволяет более точное и стабильное визуализацию коронарных артерий; (2) введение стерильной марли в грудной полости во время процедуры, тем самым снижая риск ятрогенных травм легких; и (3) введение физиологического раствора в соответствии с методикой, которая, как было показано, как сократить время восстановления и предотвратить переохлаждение.
Хотя мы описали постоянную модель лигирования, эта процедура может быть также модифицирована для острой модели MI. Модель острого М.И., также описывается как ишемии и реперфузии, относится к 30 - 60 мин ишемии с последующей реперфузией в сердечной ткани 7. Альтернативный способ для оценки размера инфаркта или зоны риска после того, как и реперфузии является окрашивание 2% хлорида трифенил тетразолия (TTC) 10. TTC окрашивание основано на способности окрашивать жизнеспособную ткань после ишемического инсультав связи с дегидрогеназ, присутствующих в сердечной ткани. Эти ферменты преобразование растворимого компонента в нерастворимый красный компонент, тем самым разграничивая инфаркт области 11. Острое модель MI может имитировать механизмы , которые происходят в человеческой болезни сердца и , таким образом , может быть полезным инструментом для выяснения событий ишемии миокарда 10. ЛАД перевязка может быть проверена путем наблюдения немедленного изменения в цвете ткани, обеспечивая преимущество этого метода индукции ИМ. Другой метод для проверки успешного перевязки является использование электрокардиограммы, хотя это предполагает использование дорогостоящего оборудования и не может быть возможным для всех лабораторий.
Как описано выше, есть несколько простых и доступные молекулярные методы для подтверждения лигирования после уборки сердца. Эти два метода, показанные выше, синий Эванс окрашивание и трехцветное окрашивание. Голубой краситель Эванса впрыскивается непосредственно в арку аоRTA, указывающий, где существует недостаток кровотока. Это быстрый и эффективный метод, используемый сразу же после сбора урожая сердца, чтобы проверить, является ли модель успешной и измерить степень коронарной закупорки. Для трихромом окрашивания, сердце должно быть разрезали и затем подвергали иммуногистохимии. Трехцветное окрашивание может указывать на пост-ишемические фиброзные участки или сердечную область, затронутую хронической ишемией. Инъекции послеоперационного мышей 2 - 24 ч перед умерщвлением с 5-этинил-2'-дезоксиуридина (ОБР), аналог тимидина для, является эффективным способом для указания области репликации ДНК и пролиферации клеток после ишемии, особенно в исследования с участием сосудистой регенерации 12.
В общем, ограничение исследования ЛАДА лигирования включает в себя частоту послеоперационной смертности, вызванную, главным образом, наличие сердечной аритмии, кровотечения и пневмоторакса. Эффективным плевроцентоз, остроумиеХаут дополнительные надрезы грудной клетки (описанные в данном способе), и собственно послеоперационный уход необходимы, чтобы избежать заболеваемости и смертности у животных. Очень тщательный контроль за послеоперационной гипотермии также имеет важное значение. Уменьшение количества шеи и грудной клетки надрезов (для трахеотомии и плевроцентоз), описанные в данном методе поможет улучшить показатели выживаемости. Избегание инъецируемых дооперационных анестетиков, описанные здесь, также улучшит послеоперационное восстановление животных.
Для того, чтобы получить высокую воспроизводимость, модель ЛАДА перевязки требует строгой подготовки и опыта. Оператор должен выполнить несколько недель операций, чтобы получить возможность воспроизводимо сделать инфаркты в нужных местах на сердце. Обучение и опыт являются два важных фактора для успешного ЛАД перевязки хирургии выживания.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| High-Intensity Light Source | Harvard Apparatus | 72-0215 | |
| SurgiSuite Operating Platform | Kent Scientific Corporation | SurgiSuite | Uses a rechargeable, battery-operated far infrared warming pad. Charge overnight before surgery. |
| SurgiSuite LED Lighting Kit | Kent Scientific Corporation | SURGI-5003 | |
| Hot Bead Sterilizer | Fine Science Tools | 18000-45 | Preheating takes 15 - 20 min. Instruments take 20 s to sterilize. |
| Small Rodent Anesthesia System | VetEquip Inc. | 901810 | |
| Isofluorane | Piramal Enterprises | 66794-017-10 | |
| Buprenorphine | Rhode Island Hospital Pharmacy | NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5 | |
| Surgical Loupes | Roboz | RS-6687 | |
| Small Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 73-0043 | |
| Lubricating Drops | Thermo Fisher Scientific | 19-898-350 | |
| Electric Razor | Kent Scientific Corporation | CL 9990-1201 | |
| Hair Removal Cream | Nair | ||
| Medical Tape | Thermo Fisher Scientific | 18-999-380 | |
| Betadine | Thermo Fisher Scientific | 19-027136 | |
| 70% Isopropanol Wipes | Thermo Fisher Scientific | 22-363-750 | |
| Surgical Drapes | Braintree | SP-TS | |
| Surgical Gloves | Thermo Fisher Scientific | 18999102D | |
| 5-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8630G | |
| 8-0 Nylon Sutures | Fine Science Tools | 12051-08 | |
| Platinum-Cured Tubing | Harvard Apparatus | 72-1042 | 0.3 mm inside diameter x 0.6 mm outside diameter |
| 0.9% Saline | Thermo Fisher Scientific | 19-310-207 | |
| 4-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8631G | |
| 1 CC Syringe with 25-Gauge Needle | Thermo Fisher Scientific | 14-826-100 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INSS600225 | |
| Forceps | Kent Scientific Corporation | INS700100 | |
| Cotton Swabs | Thermo Fisher Scientific | 23-400-118 | |
| IV Catheter, 20-Gauge | Thermo Fisher Scientific | NC9892181 | |
| Retractor | Kent Scientific Corporation | INS 750369 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11003-12 | |
| Dissecting Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 700101 | |
| Dissecting Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 700103 | |
| Hemostatic Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 750451 | |
| Hemostatic Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 750452 | |
| Tissue Forceps | Kent Scientific Corporation | INS 700131 | |
| Needle Holder | Kent Scientific Corporation | INS 600109 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INS 600225 |
References
- Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway. Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).
- Roffi, M., et al. 2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).
- Kumar, A., Cannon, C. P. Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I. Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).
- Eitan, A., Nikolsky, E. Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice. Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).
- Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis. Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).
- Zheng, Z., et al. Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling. PLOS ONE. 9 (5), 98179 (2014).
- Tarnavski, O., et al. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).
- Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).
- Kolk, M. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J Vis Exp. (32), e1438 (2009).
- Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K.
- Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model. Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).
- Zeng, C., et al. Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system. Brain Res. 1319, 21-32 (2010).
