Summary
Præcis offentliggørelse af metoder og protokoller er afgørende for en storstilet udbredelse af stamcelleterapier. Her præsenterer vi en protokol til isolering af fedtafledte regenerative celler, der anvendes til en enkelt intracavernøs injektion som behandling af erektil dysfunktion (ED) efter radikal prostatektomi (RP).
Abstract
Stamceller anvendes i mange forskningsområder inden for regenerativ medicin, dels fordi disse behandlinger kan være helbredende snarere end symptomatiske. Stamceller kan fås fra forskellige væv, og flere metoder til isolering er blevet beskrevet. Den præsenterede metode til isolering af fedtafledte regenerative celler (ADRC'er) kan anvendes inden for mange terapeutiske områder, fordi metoden er en generel procedure og derfor ikke begrænset til behandling af erektil dysfunktion (ED). ED er en almindelig og alvorlig bivirkning til radikal prostatektomi (RP), da ED ofte ikke behandles godt med konventionel terapi. Brug af ADRC'er som behandling for ED har tiltrukket stor interesse på grund af de indledende positive resultater efter en enkelt injektion af celler i corpora cavernosum. Metoden til isolering af ADRC'er er en enkel, automatiseret proces, der er reproducerbar og sikrer et ensartet produkt. Desuden sikres steriliteten af det isolerede produkt, fordi hele processen foregår i et lukket system. Det er vigtigt at minimere risikoen for forurening og infektion, da stamcellerne bruges til injektion hos mennesker. Hele proceduren kan udføres inden for 2,5-3,5 timer og kræver ikke et klassificeret laboratorium, hvilket eliminerer behovet for at sende væv til et off-site. Proceduren har dog nogle begrænsninger, da den mindste mængde drænet lipoaspirat for at isolationsanordningen kan fungere er 100 g.
Introduction
Stamceller har evnen til at differentiere sig til forskellige celletyper, og de udskiller parakrine faktorer, der menes at fremme helingsprocessen i beskadiget væv 1,2,3,4. De er derfor attraktive inden for regenerativ medicin, fordi de kan repræsentere en mulig helbredende behandling.
Radikal prostatektomi (RP) er den gyldne helbredende behandling til patienter med lav / mellemliggende risiko lokaliseret prostatakræft og en forventet levetid > 10 år. Formålet med operationen er udryddelse af kræften, men den har flere bivirkninger. Forekomsten af post-prostatektomi inkontinens varierer fra 2-60%, og erektil dysfunktion (ED) opleves af 20-90% af patienterne5. Nervebesparende teknik er en mulighed hos nogle patienter (Gleason score < 7, lav risiko for ekstrakapsulær sygdom)5. Denne teknik skåner nerverne, der er ansvarlige for erektion, men selvom dette er muligt, rapporterer mange patienter stadig ED postoperativt.
Behandlingsmuligheder for penisrehabilitering efter RP består primært af behandling med PDE-5-hæmmere, injektions- eller instillationsterapi og vakuumpumper. Lægemidler, der anvendes til penisrehabilitering, adskiller sig farmakologisk, men deres virkningsmekanisme omfatter afslapning af de glatte muskelceller i corpus cavernosum. Mange patienter oplever dog behandlingssvigt og opnår aldrig en effekt af medicinen, der muliggør samleje6.
ED, der opstår efter RP, menes at skyldes strukturelt irreversible ændringer7. Disse ændringer forekommer i det kavernøse væv og omfatter apoptose af de glatte muskel- og endotelceller og fibrose. Den veno-okklusive mekanisme, der er ansvarlig for en central del af erektionen, svækkes af ændringerne, hvilket resulterer i dårligere fyldning og hårdhed af penis7.
Mange af patienterne rapporterer, at den ED, de oplever, har en negativ indvirkning på deres livskvalitet8. De er ikke klar til at opgive deres seksuelle aktivitet efter operationen, og derfor er en helbredende terapi til ED attraktiv, når de andre tilgængelige behandlinger til penisrehabilitering mislykkes.
I tidligere forsøg, herunder dyreforsøg og små fase 1-forsøg på mennesker, har stamceller vist lovende resultater som en alternativ behandling for ED 2,9,10,11,12. Resultaterne viser, at det er sikkert at bruge ADRC'er, og at den erektile funktion forbedres signifikant efter en enkelt injektion i corpora cavernosum 2,9,10,11,12. Fedtafledte regenerative celler (ADRC'er) menes at understøtte vævsregenerering ved hjælp af parakrine mekanismer gennem frigørelse af flere hormoner, neurotrofiske og andre vækstfaktorer, cytokiner og muligvis mikro-RNA'er13. Derudover er ADRC'er i stand til at differentiere sig i flere modne celletyper, herunder endotel- og vaskulære muskelceller, bruskceller, osteocytter og neuroner14,15. Disse egenskaber gør stamceller interessante for at udvikle en permanent ny behandling for ED.
Stamceller er opdelt i flere grupper, dybest set dem, der stammer fra det tidlige embryo (embryonale stamceller) og dem fra voksent væv (voksne stamceller). Voksne stamceller omfatter mesenkymale stamceller (MSC), der er multipotente og kan findes i knoglemarv, fedtvæv, navlestrengsblod, moderkage og tandmasse17.
Stamceller fra fedtvævet er lette at få adgang til, i modsætning til stamceller afledt af knoglemarv. Høstning af stamceller fra knoglemarv er en risikabel og smertefuld procedure sammenlignet med fedtsugning. Antallet af celler, der er mulige at høste fra knoglemarv, vil være begrænset, mens kun patientens depoter af fedtvæv sætter grænsen for antallet af celler, der kan høstes. Det er derfor muligt at isolere en stor mængde stamceller fra fedtvævet uden efterfølgende behov for at dyrke cellerne for at opnå en tilfredsstillende mængde. De fedtafledte regenerative celler, også ofte omtalt som den stromale vaskulære fraktion (SFV), består af mange celletyper, herunder MSC'er, endotelceller, pericytter, immunceller og forfædre heraf18. Disse kan alle spille en rolle i den regenerative proces.
Formålet med denne undersøgelse er at undersøge stamcellernes virkning på ED efter RP ved at anvende 4 ml autologe ADRC'er isoleret fra friskhøstet fedtvæv efter injektion i corpora cavernosum.
Protocol
Alle metoder beskrevet i protokollen er godkendt af Den Nationale Etiske Komité (nr. 37054), Sundhedsstyrelsen (EUDRA-CT-nummer 2013-004220-11) og Datatilsynet (2008-58-0035). Undersøgelsen blev registreret på ClinicalTrials.gov (NCT02240823). Studiet er udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen, som er overvåget af enheden for God Klinisk Praksis (GCP) på Odense Universitetshospital. ADRC-præparatet blev udført på et autoriseret vævscenter til håndtering af humane væv og celler på Odense Universitetshospital (Sundhedsstyrelsen, autorisationsnr. 29035).
1. Rekruttering af patient/deltagere
- For at deltage i forsøget rekrutteres patienter, der opfylder følgende kriterier for inklusion.
- Rekruttere patienter, der er over 18 år, seksuelt aktive før RP og ikke inficeret med de seksuelt overførte sygdomme, f.eks. human immundefektvirusinfektion, syfilis eller hepatitis.
- Sørg for, at de lider af erektil dysfunktion efter en RP, som blev udført på grund af prostatakræft.
BEMÆRK: I denne undersøgelse blev patienterne indskrevet i undersøgelsen 5-18 måneder efter RP og blev inkluderet uanset operationsmetoden: åben / robotassisteret eller nerveparing / ikke-nerveparing. - Sørg for, at værdien af prostataspecifikt antigen (PSA) ikke kunne påvises ved den kliniske opfølgning efter RP.
- Sørg for, at patienterne var seksuelt aktive før RP og stadig udtrykte et ønske om at forblive seksuelt aktive efter RP. Sørg for, at farmakologisk intervention med en phosphodiesterase type 5-hæmmer (PDE5-hæmmer ) eller en syntetisk analog af prostaglandin E1 (PGE1) er blevet forsøgt før deltagelse og anses for utilstrækkelig.
- Sørg desuden for, at patienterne har nok subkutant fedt på maven eller låret.
- Ekskluder patienter fra forsøget, hvis der var alvorlige hændelser under anæstesi under RP, eller hvis de blev behandlet med antikoagulantia.
2. Fedtsugning
BEMÆRK: Fedtsugning er en operation, der fjerner fedt eller lipocytter fra det subkutane område. Denne del af protokollen udføres som en standard fedtsugning, og proceduren udføres under sterile forhold på en operationsstue. Alle instrumenter, der anvendes under proceduren, skal være sterile, og kirurgen skal bære skrubber, steril kirurgisk kjole, sterile handsker, kirurgisk maske og hat.
- Anæstesi patienten.
- Sørg for, at patienten er under generel anæstesi under proceduren, og denne del udføres af en anæstesiolog.
- Desinficere huden på maven og pungen med chlorhexidin 0,5% (clorhexidin spiritus, 96% ethanol medicineret chlorhexidin digluconat 77% W/W = 83% v/v). Brug en kirurgisk markør til at tegne de områder på maven, hvor fedtsugningen skal udføres. Området vil normalt være området mellem symfysen og navlestrengen.
- Lav to 6 mm brede snit i mavens hud med en skalpel (nummer 11). Placer snittene symmetrisk og lateralt fra det optrukne område af fedtsugning.
- Sæt lidt smøremiddel som vaselin på snittene for at sikre, at infiltrationskronylen glider let ind og ud af snittene under fedtsugningen.
- Indfør en størrelse 14 G infiltrationskanula gennem snittene i huden. Injicer modificeret Kleins-opløsning subkutant i de markerede områder parallelt med hudoverfladen. Injicer så meget af opløsningen, at det målrettede væv bliver hævet og fast eller tumescent.
BEMÆRK: Den modificerede Kleins-opløsning består af en opløsning af 1.000 ml Ringers lactat og 1 mg adrenalin (adrenalin (1:1.000.000)). Æd ikke lokalbedøvelse til opløsningen, da det kan have en negativ indvirkning på ADRC'erne.- Injicer et volumen modificeret Kleins-opløsning, der svarer til forholdet 1:1 til fedtvæv.
- Vent i 10 minutter for at maksimere effekten af adrenalin og reducere mængden af blod i høstet fedtvæv.
- Udfør en standard fedtsugning ved hjælp af en jetinfusionsfedtsugning for at høste 200-300 ml fedtvæv. Brug stumpe kanyler, der er hule, hvortil et infusionsrør og en dyse er integreret. Fastgør kanylen til en sugeanordning til fedtsugning.
BEMÆRK: En kontinuerlig ventilatorformet vandinfusion løsner fedtvævet i fragmenter, der let kan suges ud gennem åbningen i kanylen.- Indfør en 3 mm sprøjte med en stump spids gennem snittene på maven
- Saml fedtvævet i en lipo-samler for at bevare lipoaspiraten i et sterilt miljø. Lipoaspiraten begynder at adskille sig fra vandfasen.
- Brug 50 ml sterile sprøjter til at suge lipoaspiraten op fra lipoopsamleren.
- Minimer mængden af vand, der suges op i sprøjterne, og skru et stik på spidsen af sprøjterne for at holde fedtvævet sterilt.
- Anbring sprøjter med spidsen nedad i en steril plastpose for at starte adskillelsen af lipoaspirat fra vandfasen. Læg posen i steril beholder stadig med spidserne nedad for at fortsætte adskillelsen.
- Dæk beholderen med steril drapering for at sikre det sterile miljø under transport.
BEMÆRK: I henhold til brugervejledningen til den maskine, der anvendes til isoleringen, kan lipoaspiraten opbevares i op til maksimalt 4 timer før isolering af ADRC'erne, men vi behandler den altid med det samme.
- Dæk beholderen med steril drapering for at sikre det sterile miljø under transport.
- Luk hudsnittene med kirurgernes foretrukne suturmateriale. Placer en kompressionsbeklædning, et abdominalt bindemiddel, rundt om maven for at reducere det postoperative ødem.
- Lav en penisblok ved at injicere 20 ml bupivacain 5 mg / ml indeholdende 5 μg adrenalin.
- Brug en 20 ml sprøjte og påfør med en 23 G nål, 1 1/4 inches lang.
- Påfør 5 ml bupivacain i hver kvadrant i subcutis.
- Injicer bupivacain på to steder, den ene placeret ventralt den anden dorsalt. Indfør nålen i hele dens længde i det subkutane væv, der peger nålen sideværts til højre, og injicer anæstesien, når nålen trækkes tilbage. Gentag injektionen, der peger nålen til venstre.
BEMÆRK: Patienten kan nu vækkes fra den generelle anæstesi af anæstesiologen.
3. Isolering af ATDC'er
BEMÆRK: Isoleringsprocessen for ADRC'er udføres som beskrevet detaljeret i brugervejledningen efter enheden (se Materialetabel). Det er vigtigt, at proceduren udføres under sterile forhold for at sikre, at lipoaspiratet ikke udsættes for forurenende stoffer under rensningen af ADRC'erne. Den tid, det tager at isolere ADRC'er, afhænger af mængden af lipoaspirat, men hele proceduren vil tage ca. 2,5 timer ved hjælp af den halvautomatiske enhed som beskrevet her.
- Placer alle forbrugsstoffer og enzymer aseptisk på et bord dækket af et sterilt engangskirurgisk håndklæde.
BEMÆRK: Et proceduresæt indeholder alle nødvendige forbrugsstoffer og enzymer, der er nødvendige for isolering af ADRC'er fra en patient. Derudover skal der være tre 37-39 °C, en-liters infusionsposer med ammende ringere til rådighed sammen med sterilt tøj, handsker og håndklæder og ethanol til desinfektion. Noter alle partinumre af forbrugsstoffer og enzymer og også temperaturen på de lakterede ringere, når de er tilsluttet systemet.- Tør enheden af med ethanol og følg producentens anvisninger
- Læg forbrugssættet på enheden, og tilslut en pose lakterede ringere til systemet.
- Udfør serien af halvautomatiske tests (systemkontrol og lækagetest), før du tilføjer lipoaspiraten.
- Lad lipoaspiraten stå i 50 ml rør, mens trinnene i 3.1 udføres. Dette vil gøre det muligt for fedtet at adskille sig fra den flydende fase. Noter den samlede mængde (i ml) fedtvæv, og brug dette til at sikre, at mængden af indlæst fedt vil være inden for enhedens kapacitet.
- Læg vævet i, når du bliver bedt om det af enheden. Maskinen vil nu dræne overskydende væske og veje mængden af fedtvæv, der er indlæst, før det vaskes med lacterede ringere.
- Når vævet er blevet vasket og tømt igen, skal du tilslutte en ny infusionspose med 37-39 °C lacterede ringere, når maskinen anmoder om det.
- Rekonstituer det kommercielt tilgængelige enzym indeholdende kollagenase og proteaseblanding i 5 ml lacterede ringere (et hætteglas med enzym er nok til fedtmængder op til 270 ml).
- Sørg for, at enheden viser mængden af enzym (baseret på vævsvægten), der skal injiceres i beholderen med fedtvævet. Når den er injiceret, vil den enzymatiske fordøjelse, der udføres under omrøring, vare omkring 20 minutter.
- Efter vævsfordøjelse skal du lade omrøreren stoppe og kontrollere, at indholdet er adskilt i to faser: en øvre lipidholdig, gul fase og et nedre lyserødt lag, der indeholder ADNC'erne. Lad sidstnævnte lag dræne ind i cellebehandlingskammeret (der går ind i enhedens indbyggede centrifuge) af forbrugssættet, mens lipidlaget efterlades.
- Lad ADRC'er koncentrere sig i cellebehandlingskammeret under flere centrifugeringsrunder. Tilføj nu 10 ml Intravase (indeholder DNase, der hjælper med at undgå klumpning i den endelige ADRC-suspension), der er rekonstitueret i lacterede ringere. Den enzymatiske reaktion varer i 10 minutter, hvorefter ADRC'erne vaskes.
BEMÆRK: Dette trin er fuldautomatisk, og maskinen informerer, når processen er færdig. - Når isoleringen af ADRC'er er afsluttet, suspenderes cellerne igen i 5 ml Ringer Lactat. Aspirer opløsningen i en 5 ml sprøjte.
- Monter en 3-vejs stophane hun Luer-lås på 5 ml sprøjten indeholdende ADRC'erne, og aspirer 4 ml ADNC'er i en anden 5 ml steril sprøjte.
- Overfør de sidste 1 ml til en 1 ml sprøjte. Brug denne 1 ml til ADRC-karakterisering, f.eks. celleantal, cellelevedygtighed, analyse af overflademarkører ved flowcytometri og ADRC-differentieringsevne.
- Sæt en 25 G nål på 5 ml sprøjten indeholdende 4 ml ADRC'er, før den pakkes i en steril drapering. Brug ADRC'erne til injektion i modtageren. I dette tilfælde vil opløsningen af ADRC'er i gennemsnit indeholde 8,4-32,7 millioner celler.
4. Implantation af ADRC'erne i corpora cavernosum
BEMÆRK: Dette er en steril procedure. Alle instrumenter skal være sterile, og den person, der injicerer opløsningen indeholdende stamcellerne i corpora cavernosum, skal bære sterile handsker. Patienten er vågen under denne procedure og vil modtage sine egne stamceller. ADRC'erne injiceres uden at tælle cellerne før injektionen.
- Hold opløsningen af ADRC'er homogen ved at vippe sprøjten forsigtigt, indtil den injiceres i corpora cavernosum.
- Placer en blænde drapering over penis. Placer en tourniquet ved roden af penis ved hjælp af en silikonebeholdersløjfe. Stram løkken og fastgør den med tangbuet ærter. Gør turneringen stram nok til at stoppe blodgennemstrømningen fra penis.
- Brug to antiseptiske swaps til at desinficere penishuden på injektionsstedet (lateralt sted for corpora cavernosum). 1 ml af opløsningen indeholdende ADNC'er injiceres i en direkte vinkel i corpora cavernosum på højre side på to forskellige steder, gentag dette trin bagefter i venstre corpora cavernosum. Det samlede volumen af injicerede ADRC'er er 4 ml.
- Vent i 30 minutter, og fjern derefter turneringen.
- Aflad patienten efter 2 timers observation efter injektion af ADRC'er for at sikre, at patienten er godt genoprettet efter anæstesien.
5. Postoperativ pleje
- Anbefal patienten ikke at udføre nogen fysisk præstation, der kan hæve blodtrykket inden for den første uge for at forhindre udvikling af hæmatomer.
- Anbefal patienten at bære mavebindemidlet i 24 timer de første 14 dage efter operationen og herefter i 14 dage i dagtimerne.
- Behandle postkirurgiske smerter med oral acetaminophen (f.eks. Paracetamol; 1.000 mg, 4 gange om dagen) og oral antiinflammatorisk (f.eks. ibuprofen; 400 mg 3 gange om dagen).
Representative Results
Den præsenterede procedure er blevet anvendt til et åbent fase 1 klinisk forsøg med 21 patienter19. Det primære endepunkt for forsøget var sikkerheden ved brugen af ADRC'er hos mennesker, og sekundært endepunkt var ADRC's effekt på den erektile funktion.
21 mænd blev inkluderet i forsøget med en gennemsnitsalder på 60 år (interval 46-69) og en normal erektion og aktivt sexliv før RP på grund af prostatakræft. De led alle af ED efter RP, uden tegn på genopretning fra medicin til rådighed for penis rehabilitering. Seks mænd led af inkontinens som en bivirkning til RP. Alle mænd fik en enkelt intracavernøs injektion af ADRC'er isoleret med den præsenterede metode.
Alle 21 mænd blev fulgt op med 4 besøg i ambulatoriet 1,3,6 og 12 måneder efter injektionen. Den seksuelle funktion blev evalueret med validerede spørgeskemaer - International Index of Erectile Function-5 (IIEF-5) og Erektionshårdhedsscore (EHS) (Vedhæftet som bilag).
Der opstod ingen alvorlige hændelser i løbet af observationstiden. Otte mænd rapporterede forbigående rødme og hævelse på injektionsstederne, tre rapporterede reaktion i penisområdet. Otte oplevede reversible mindre hændelser relateret til fedtsugningen blev rapporteret, såsom let abdominal ubehag og mindre abdominale hæmatomer. Ingen patienter rapporterede ubehag ved 1 måneds opfølgning. Otte ud af femten (53%) i kontinentgruppen rapporterede, at erektilfunktionen var tilstrækkelig til samleje efter 12 måneder. Gruppen på 6 inkontinente mænd viste ingen forbedring af erektil funktion.
| Kontinent | Inkontinente | |
| Inkluderede patienter | 15 | 6 |
| Signifikant effekt | 8 | 0 |
Tabel 1: Tabellen viser forskellene i signifikant effekt af behandlingen mellem kontinentale og inkontinente patienter.
Discussion
Den præsenterede procedure for isolering af ADRC'er er ikke begrænset til kun at blive anvendt til ED-terapi, men kan anvendes i flere andre former for behandling og eksperimenter. Vores forsøg viste, at autologe, friskisolerede ADRC'er er sikre at bruge, og behandlingen er godt tolerabel i en 12 måneders opfølgning.
Før proceduren anvendes, er der nogle overvejelser, der skal foretages. En ulempe ved denne procedure er, at patienten skal være under generel anæstesi under fedtsugningen. Fedtsugning er mulig at udføre under lokalbedøvelse, men et tidligere forsøg har vist, at en kombination af lokalbedøvelsesmidler og adrenalin kan have en negativ indvirkning på cellevæksten af fibroblaster20. Risikoen for at være under generel anæstesi er generelt lav, men et negativt resultat ses stadig. Denne risiko skal tages i betragtning, når patienter udvælges til behandlingen. Fedtsugning er en kirurgisk procedure og vil derfor altid medføre risiko for komplikationer. Som med alle andre kirurgiske procedurer er der risiko for postoperativ blødning, der resulterer i dannelse af hæmatomer og risiko for infektion. Nogle af vores patienter rapporterede også en forbigående nedsat følsomhed i mavehuden. En øjeblikkelig komplikation til fedtsugning er blødning. Det er kendt, at patienter risikerer at få systemiske komplikationer, når store mængder væv fjernes. Fedtsugningen i denne procedure var relativt lille og betragtes derfor ikke som en risikofaktor.
Komplikationer til injektion af celler rapporteres som forbigående rødme, ømhed og hæmatomer.
Den enhed, der anvendes til isolering af ADRC'erne, blev valgt, fordi systemet er CE-godkendt. I Danmark er det obligatorisk at anvende CE-godkendt udstyr, fordi myndighederne kategoriserer behandling med stamceller som et lægemiddeltestforsøg, når ADRC anvendes til injektion i mennesker.
Enheden har fordele, såsom at hele proceduren standardiseres og udføres i et lukket sterilt miljø uden at kræve et højt klassificeret laboratorium. Risikoen for forurening reduceres derfor. Dette sikrer, at proceduren er ensartet og reproducerbar, og at slutproduktets kvalitet altid er den samme hver gang (det afhænger dog også af inputvævets kvalitet). Det er let at udføre isoleringen på enheden og kræver ikke specialuddannede operatører.
En begrænsning af enheden er, at den mindste indgang til maskinen er 100 g drænet lipoaspirat. Da fedtsugningen er helt færdig, før cellebehandlingen starter (og i vores tilfælde på et andet sted, ikke i OR) efter vores erfaring, vil dette kræve, at mængden af lipoaspirat er mindst 125 ml ved hjælp af det grove mål for 50 ml sprøjter. Ellers er der risiko for, at der ikke er nok materiale til, at maskinen kan gå videre med. Brug af den øvre endegrænse (maks. Input er 425 ml) ville også resultere i en meget lang isolationsprocedure.
Voksne stamceller fra både fedtvæv og knoglemarv synes at have kapacitet til selvfornyelse og differentiering som embryonale stamceller. En af fordelene ved ADRC'er i forhold til hæmopoietiske stamceller er et 100-500 gange højere udbytte pr. vævsvolumen sammenlignet med knoglemarv21,22, og derfor behøver ADRC'er ikke at blive dyrket. Desuden er hæmopoietiske stamceller vanskeligere og mere smertefulde at høste fra patienten end fedtvæv. I mange situationer er fedtvæv bare et affaldsprodukt efter operationen. Det er muligt at dyrke stamceller for at give et højere udbytte, der er egnet til angiogenese, men friskisolerede ADRC'er kan have højere angiogent potentiale end dyrket23.
Disclosures
Forfatteren Søren P. Sheikh er CEO hos Blue Cell Therapeutics, København, Danmark.
Acknowledgments
Dette arbejde er grundlagt af Odense Universitetshospital (11/31936), Center for Regenerativ Medicin (14/50427) og Kræftens Bekæmpelse.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Liposuction | |||
| Abdominal Binder | Dale | Size depent of the patient | |
| Adhessive OP-towel | Mölnlycke Health Care | 906677 | 90x75 cm |
| Adrenalin 1 mg/ml | Amgros I/s | 74 44 23 | 1 ml |
| Basic OP supplies | Mölnlycke Health Care | 97010873-07 | |
| Carbon Steel blade 11 | Swann-Morton | ||
| Chlorhixidine Ethanol | Faarborg Pharma | 5% colored | |
| Disposable set Lipocollector 3 | Human Med | 670200 | |
| Extension hoses | Extrudan | 5.8/8.3 mm, Ch 25, 3,5 M long | |
| Gaze Rags | Barrier | 175201 | 30x45 cm |
| Jelonet | Smith and Nephew Medical Ltd | 90509225 | 10 x 10 cm |
| Marcaine 5 mg/ml + Adrenaline 5 micrigram | Astra Zeneca | 20 mL | |
| Mesorb Bandage | Mölnlycke Health Care | 677001 | 10x13 cm |
| Microlance | Becton Dickinson | 304622 | 18 G + 23 G |
| Monocryl suture | Ethicon | 04:00 | |
| Ringer-lactat | Fresinus Kabi | ||
| Sterile gloves | Gammex | 330052065 | |
| Surgical Gown | Mölnlycke Health Care | 690103-01 | |
| Surgical Marker | Richard-Allan | ||
| Surgical Mask | 3M | ||
| Syringe | Codan Medical | 6,28,402 | 50/60 ml cath tip |
| Syringe | Becton Dickinson | 700016181 | 1 ml |
| WAL- Applikator for cannulae 25/30 cm | Human Med | REF 500001 | |
| Isolation of ADRC's | |||
| 1 ml Syringe | Becton Dickinson | REF 303172 | |
| 3 way stopcock | One Med | REF 10554-01 | |
| Adhesive OP-towel | Mölnlycke Health Care AB | REF 906677 | 90x75 cm |
| Cytori Celution 800IV device | Cytori | ||
| Desinfection swaps | Mediq Danmark | 3340010 | |
| Microlance | Becton Dickinson | 25G (0,5*25 mm) | |
| Nitril Gloves | Abena | Powder free | |
| OR drape Sheet, 2 layers | Lohmann & Rauscher | REF 33005 | |
| Ringers Lactate | Fresinus Kabi | 06756 (DK) | |
| Sterile gloves | |||
| Sterile gown | |||
| Supplemental kit for Cytori Celution 800IV devise | Cytori | ||
| Termometer | Thomas Scientific | traceable | |
| Injection of ADRC's | |||
| Aperture drape | One Med | REF1565-01 | 75*90 cm |
| Desinfection swap | Mediq Danmark | 3340010 | |
| Pean | Leibinger | 32-01257 | |
| Silicone Vessel Loop | Purple Surgical | REF PS3203 | |
| Sterile gloves | Sempermed | Or Use your favorite |
References
- Baraniak, P. R., McDevitt, T. C. Stem cell paracrine actions and tissue regeneration. Regenerative Medicine. 5 (1), 121-143 (2010).
- Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. The Journal of Sexual Medicine. 7 (10), 3331-3340 (2010).
- Zuk, P. A., et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).
- Yang, J., et al. Adipose-derived stem cells improve erectile function partially through the secretion of IGF-1, bFGF and VEGF in aged rats. Andrology. 6, 498-509 (2018).
- Phillippou, Y. A., et al. Penile rehabilitation for postprostatectomy erectile dysfunction. Cochrane Database Systematic Review Issue 10. 012414, (2018).
- Nelson, C. J., et al. Back to baseline: erectile function recovery after radical prostatectomy from the patients' perspective. Journal of Sex Medicine. 10, 1636-1643 (2013).
- Fode, M., Ohl, D. A., Ralph, D., Sonksen, J. Penile rehabilitation after radical prostatectomy: what the evidence really says. British Journal of Urology International. 112 (7), 998-1008 (2013).
- Johansson, E., et al. Long-term quality-of-life outcomes after radical prostatectomy or watchfull waiting: the Scandinavian Prostate Cancer Group-4 randomised trail. Lancet Oncology. 12, 891-899 (2011).
- Huang, Y. C., et al. The effect of intracavernous injection of adipose tissue-derived stem cells on hyperlipidemia-associated erectile dysfunction in a rat model. The Journal of Sexual Medicine. 7 (4), Pt 1 1391-1400 (2010).
- Garcia, M. M., et al. Treatment of erectile dysfunction in the obese type 2 diabetic ZDF rat with adipose tissue-derived stem cells. The Journal of Sexual Medicine. 7 (1), Pt 1 89-98 (2010).
- Lin, C. S., Xin, Z., Dai, J., Huang, Y. C., Lue, T. F. Stem-cell therapy for erectile dysfunction. Expert Opinion on Biological Therapy. 13 (11), 1585-1597 (2013).
- Haahr, M. K., et al. Safety and Potential Effect of a Single Intracavernous Injection of Autologous Adipose-Derived Regenerative Cells in Patients with Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy: An Open-Label Phase I Clinical Trial. EBioMedicine. 5, 204-210 (2016).
- Mirotsou, M., Jayawardena, T. M., Schmeckpebper, J., Gnecchi, M., Dzau, V. J. Paracrine mechanisms of stem cell reparative and regenerative actions in the heart. Journal of Molecular Cellular Cardiology. 50 (2), 280-289 (2011).
- Baraniak, P. R., McDevitt, T. C. Stem cell paracrine actions and tissue regeneration. Regenerative Medicine. 5 (1), 121-143 (2010).
- Albersen, M., et al. Injections of adipose tissue-derived stem cells and stem cell lysate improve recovery of erectile function in a rat model of cavernous nerve injury. The Journal of Sexual Medicine. 7 (10), 3331-3340 (2010).
- Zuk, P. A., et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).
- Gokce, A., Peak, T. C., Abdel-Mageed, A. B., Hellstrom, W. J. Adipose Tissue-Derived Stem Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction. Current Urology Reports. 17, 14 (2016).
- Bourin, P., et al. Stromal cells from the adipose tissue-derived stromal vascular fraction and cultured expanded adipose tissue-derived stromal/stem cells: a joint statement of the International Frederation for Adipose Therapeutics and Science (IFATS) and the International Society for Cellular Therapy (ISCT). Cytotherpy. 15 (6), 641-648 (2013).
- Haahr, M. K., et al. A 12-month Follow-up after a Single Intracavernous Injection of Autologous Adipose-derived Regenerative Cells in Patients with Erectile Dysfunction following Radical Prostatectomy: An Open-label Phase 1 Clinical Trial. Urology. 121, 203 (2018).
- Fedder, C., et al. In vitro exposure of human fibroblasts to local anesthetics impairs cell growth. Clinical & Experimental Immunology. 162 (2), 280-288 (2010).
- D'Andrea, F., et al. Large-scale production of human adipose tissue from stem cells: a new tool for regenerative medicine ad tissue banking. Tissue Engineering Part C: Methods. 14 (3), 233-242 (2008).
- Zhang, S., et al. Comparison of the therapeutic effects of human and mouse adipose-derived stem cells in a murine model of lipopolysaccharide-induced acute lung injury. Stem Cell Research and Therapy. 4 (1), 13 (2013).
- Yusuke, H., et al. Transplantation of freshly isolated adipose tissue-derived regenerative cells enhances angiogenesis in a murine model of hind limb ischemia. Biomedical Research. 34 (1), 23-29 (2013).
