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Summary
Die In-vitro-Reifung (IVM) vor der gynäkologischen Operation (OP-IVM) kombiniert IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßiger gynäkologischer Chirurgie und dient als Erweiterung herkömmlicher IVM-Anwendungen zur Fertilitätserhaltung.
Abstract
Die Anwendung der In-vitro-Reifung (IVM) vor der gynäkologischen Operation (OP-IVM) ist eine Erweiterung der konventionellen IVM, die IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßigen gynäkologischen Operationen kombiniert. OP-IVM eignet sich für Patienten, die sich einer gutartigen gynäkologischen Operation unterziehen und die Fruchtbarkeitserhaltung (FP) oder Unfruchtbarkeitsbehandlungen wie In-vitro-Fertilisation und Embryotransfer (IVF-ET) benötigen. Im Operationssaal werden Patienten, die sich einer gutartigen gynäkologischen Operation unterziehen, zunächst betäubt und erhalten eine ultraschallgeführte Behandlung mit unreifer Follikelaspiration (IMFA). Während der anschließenden gynäkologischen Operation werden die Kumulus-Eizell-Komplexe (COCs) untersucht und die unreifen COCs in das IVM-Medium übertragen und für 28-32 Stunden im IVF-Labor kultiviert. Nach der Beurteilung werden reife Eizellen im MII-Stadium ausgewählt und in flüssigem Stickstoff für FP kryokonserviert oder durch intrazytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) für IVF-ET befruchtet. Durch die Kombination von IVM mit gynäkologischer Chirurgie können unreife Eizellen, die verworfen worden wären, gerettet und für die assistierte Reproduktionstechnologie (ART) verwendet werden. Das Verfahren, die Bedeutung und die kritischen Aspekte von OP-IVM werden in diesem Artikel beschrieben.
Introduction
IVM ist eine ART, bei der menschliche unreife Eizellen in vitro kultiviert werden, um für IVF-ET oder FP zu reifen. Bei IVM werden keine Ovulationsinduktionsmedikamente verwendet, wodurch Schmerzen, finanzielle Belastungen und Komplikationen wie das ovarielle Überstimulationssyndrom (OHSS)1,2reduziert werden. Darüber hinaus eignet sich IVM besonders für die FP von Krebspatienten und die Unfruchtbarkeitsbehandlung von hormonsensitiven Patientinnen, die möglicherweise nicht in der Lage sind oder keine Zeit haben, eine Ovulationsinduktionstherapie zu erhalten3. Obwohl die Anzahl der entnommenen Eizellen, die klinische Schwangerschaftsrate (CPR) und die Lebendgeburtenrate (LBR) niedriger sind als die von IVF4,5,hat IVM seine eigenen einzigartigen Vorteile.
Unfruchtbare Patienten mit Endometriumläsionen, Hydrosalpinx oder Ovarialzysten haben in der Regel vor der ART-Behandlung eine gynäkologische Operation, und ihre Eizellen sind normalerweise unreif. OP-IVM verwendet geführten transvaginalen Ultraschall, um die unreifen Eizellen zu entnehmen und sie in vitro bis zur Reifung für IVF-ET oder FP zu züchten. OP-IVM kombiniert IVM nach der Eizellentnahme und gynäkologischen Operation, wodurch Komplikationen, die in kontrollierten Ovarialüberstimulationszyklen üblich sind, reduziert und Zeit und Geld gespart werden. Für fruchtbare Patienten könnte OP-IVM als "Fruchtbarkeitsversicherung" dienen, während sie sich einer routinemäßigen gynäkologischen Operation unterziehen.
Darüber hinaus könnten Schäden, die durch gynäkologische Operationen wie Elektrokauter6,7 und Ovarialtumorresektion verursacht werden, durch Eizellentnahme vor der gynäkologischen Operation reduziert werden. Daher könnte OP-IVM im Vergleich zu routinemäßigen gynäkologischen Operationen die Anzahl der Operationen während der Unfruchtbarkeitsbehandlung reduzieren und den Verlust funktioneller Eizellen während der Ovarialchirurgie verhindern.
Eine frühere Studie hat gezeigt, dass das zusätzliche Verfahren der Eizellentnahme weder chirurgische Komplikationen und nachteilige Schwangerschaftsergebnisse erhöhen noch den Krankenhausaufenthalt verlängern würde8. Einige Patienten haben durch OP-IVM8eine Lebendgeburt bekommen, was auf die Machbarkeit dieser Methode hinweist. Dieses Papier beschreibt Merkmale von Patienten, die von OP-IVM profitieren können, sowie Verfahren und kritische Punkte von OP-IVM und diskutiert die Bewertung der menschlichen Eizellreife.
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Protocol
HINWEIS: Studien im Zusammenhang mit der OP-IVM-Methode wurden vom Institutional Review Board (IRB) des Dritten Krankenhauses der Universität Peking und der Ethikkommission der Universität Peking (2014S2004) genehmigt. Eine Zusammenfassung von OP-IVM ist in Abbildung 1 dargestellt. Die Schritt-für-Schritt-Vorgehensweise wird im folgenden Abschnitt vorgestellt.
1. Einführung von OP-IVM bei geeigneten Patienten
- Identifizieren Sie potenzielle Patienten, die von OP-IVM profitieren könnten, wie in den Schritten 1.1.1-1.1.3 beschrieben:
- Patientinnen des polyzystischen Ovarialsyndroms (PCOS) mit Clomifenresistenz, die eine laparoskopische Ovarialbohroperation benötigen.
- Unfruchtbare Patienten, die vor der ART-Behandlung gutartige gynäkologische Operationen wie hysteroskopische Myomektomie, Polypektomie, transzervikale Septumresektion und laparoskopische Tubenchirurgie sowie Oophorozystektomie benötigen.
- Patienten mit Krebs oder hämatologischen Erkrankungen, die eine Chemoradiotherapie oder Strahlentherapie erhalten.
2. Einwilligung nach Aufklärung
- Bereitstellung vollständiger Informationen für Patienten, einschließlich der Frage, warum OP-IVM von Vorteil sein kann, seines Verfahrens, der Verwendung von IVM-Eizellen (IVF-ET oder Kryokonservierung), geschätzter CPRs und LBRs und möglicher Komplikationen. Bitten Sie die Patienten, eine Einwilligung nach Aufklärung zu geben, indem Sie die Einverständniserklärung unterschreiben.
3. Etiketten und IVM-Eizellmedium vorbereiten
- Drucken Sie Identifikationsetiketten (ID) mit dem Namen und den Daten des Patienten für Kulturschalen und Tuben.
- Fügen Sie 0,5 ml IVM-Medium, ergänzt mit 0,075 I.E./ml follikelstimulierendem Hormon (FSH) und 0,075 I.E./ml luteinisierendem Hormon (LH), zu jeder Vertiefung einer 4-Well-Platte hinzu. Bedecken Sie das Medium mit Öl.
HINWEIS: Führen Sie alle diese Verfahren in Laminar-Flow-Clean-Bänken durch. - Die 4-Well-Platte mit IVM-Eizellmedium bei 37 °C in befeuchteter Luft mit 5%CO2 und 5% O2 mindestens6 h vor Gebrauch vorwärmen.
4. Verabreichen Sie eine Anästhesie in einem Operationssaal
- Überprüfen Sie den Namen des Patienten, bevor Sie eine Anästhesie verabreichen.
- Intravenöse Anästhesie des Patienten durch Anästhesisten.
5. Eizellentnahme durchführen
- Markieren Sie die Etiketten mit Name, Datum und ID auf den Kulturschalen und Tuben.
- Setzen Sie den Patienten in die Blasenlithotomie-Position; Ständig desinfizieren, drapieren und schrubben Sie die Vagina mit warmer Kochsalzlösung.
- Platzieren Sie die Ultraschallsonde in der Vagina; Scannen und notieren Sie die Anzahl der Follikel in beiden Eierstöcken. Finden Sie den Ort, der dem Eierstock als Einstichstelle am nächsten ist, und vermeiden Sie den Darm, die Blase und die großen Blutgefäße.
- Aspirieren Sie follikuläre Flüssigkeit.
- Waschen Sie die Nadel vor dem Durchstechen mit pH-stabilem Handhabungsmedium(siehe Materialtabelle ).
- Injizieren Sie die 19 G, Ein-Lumen-Aspirationsnadel unter Anleitung von Ultraschall in die Eierstöcke.
- Punktieren Sie größere Follikel mit klaren Grenzen, die der Sonde am nächsten sind. In einer niedrigen Position die Spüllösung, die mit 25 U / ml Heparin ergänzt wird, schnell injizieren. Aspirieren Sie follikuläre Flüssigkeit mit der Nadel unter einem Druck von 80-90 mmHg und drehen Sie die Nadel leicht, um so viel Follikelflüssigkeit wie möglich abzusaugen. Punktieren Sie andere Follikel von der nahen bis zur anderen Seite auf dieser Ebene.
HINWEIS: Während der Aspiration fließt follikuläre Flüssigkeit, die Eizellen enthält, unter Unterdruck in ein steriles 10-ml-Reagenzglas. Heparin kann die Viskosität der Follikelflüssigkeit reduzieren, um den Aspirationsprozess zu erleichtern. - Entfernen Sie die Nadel vom Eierstock (halten Sie die Nadel in der Vaginalwand). Stellen Sie die Richtung der Ultraschallsonde ein und punktieren Sie die verbleibenden Follikel auf anderen Ebenen. Versuchen Sie, alle Follikel mit einem Durchmesser von ~ 5-9 mm abzusaugen.
HINWEIS: Stellen Sie die Position der Sonde ein, um sie jederzeit am nächsten an den Eierstöcken zu halten. Drücken Sie den vaginalen Fornix mit entsprechender Kraft, um Verletzungen und Blutungen zu reduzieren. - Ziehen Sie die Nadel nach dem Beenden in einem Eierstock heraus, waschen Sie die Nadel mit dem Handhabungsmedium und punktieren Sie die andere Seite mit der gleichen Methode.
HINWEIS: Vollständige Follikelaspiration innerhalb von 25-30 min.
- Übertragen Sie die Follikelflüssigkeit innerhalb weniger Minuten nach Bestätigung des Namens und der ID des Patienten aus dem Operationssaal in das IVF-Labor.
HINWEIS: Übertragen Sie aspirierte Follikelflüssigkeit so schnell wie möglich in die IVF-Laborbank, um eine Gerinnung zu verhindern. - Erkennen Sie aktive Blutungen in der Beckenhöhle mit B-Mode-Ultraschall nach Punktion aller Follikel. Setzen Sie ein Spekulum ein und richten Sie die Spitze auf den hinteren Fornix, um aktive Blutungen an der Einstichstelle zu erkennen.
HINWEIS: An der vaginalen Punktionsstelle sollte keine aktive Blutung beobachtet werden, wenn die Eierstockposition normal ist und die Eizellentnahme sorgfältig durchgeführt wird. Für leichte Blutungen, die auch nach der Kompression anhalten, halten Sie eine sterile Mullkompresse in der Vagina für 2-4 h. Kontrollieren Sie übermäßige Blutungen aus kleinen Arterien mit Klammern mit Gefäßzange für 2-4 h. Blutungen in der Beckenhöhle oder im Eierstock, die selten auftreten, sollten durch Elektrokoagulation durch laparoskopische Operation kontrolliert werden.
6. Gynäkologische Chirurgie
- Führen Sie je nach Bedarf und Zustand des Patienten nach der Eizellentnahme eine geeignete gynäkologische Operation durch.
- Führen Sie eine laparoskopische Ovarialbohroperation für Patientinnen mit polyzystischem Ovarialsyndrom (PCOS) mit Clomifenresistenz durch.
- Führen Sie vor der ART-Behandlung eine gutartige gynäkologische Operation für unfruchtbare Patienten durch, wie hysteroskopische Myomektomie, Polypektomie, transzervikale Septumresektion und laparoskopische Tubenchirurgie sowie Oophorozystektomie.
- Führen Sie eine Ovariektomie zur Kryokonservierung der Fruchtbarkeit von Patienten mit Krebs oder hämatologischen Erkrankungen durch, die eine Chemoradiotherapie benötigen.
HINWEIS: Diese gynäkologischen Operationen sind grundlegende und standardisierte klinische Operationen. Die Operationsrichtlinien in verschiedenen Ländern und Krankenhäusern sollten relativ ähnlich sein.
7. IVM durchführen
HINWEIS: Führen Sie den gesamten IVM-Prozess auf einer homothermen Ebene mit 37 °C durch.
- Filtern Sie die angesaugte Follikelflüssigkeit mit einem 70 μm Nylon-Zellsieb. Kulturröhrchen und Sieb wiederholt mit vorgewärmtem pH-stabilem Handhabungsmedium abspülen. Stellen Sie sicher, dass alle unreifen COCs vollständig auf das Kulturgericht übertragen werden. Die gefilterte Flüssigkeit sammeln, ausspülen und in einer 100 x 15 mm großen Petrischale entnehmen.
- Untersuchen Sie die COCs (Abbildung 2) unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung. Übertragen Sie die Unreifen schnell in ein vorgewärmtes IVM-Eizellmedium.
HINWEIS: Wählen Sie eine geeignete Vergrößerung in Abhängigkeit von der Gewohnheit des Bedieners. - Notieren Sie die Anzahl der kultivierten unreifen COCs.
- Informieren Sie den Patienten über die Anzahl der kultivierten COCs. Besprechen Sie die Samenentnahme mit den Patienten und ihren Partnern. Führen Sie die Spermienextraktion nach dem normalen Verfahren durch.
- Kultivieren Sie die unreifen COCs bei 37 °C in befeuchteter Luft mit 5% CO2 und 5%O2 für 28-32 h.
- Beurteilen Sie die Reife der Eizelle.
- Entleeren Sie die Kumuluszellen durch wiederholtes Pipettieren mit einer Glas-Pasteur-Pipette unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung. Untersuchen Sie die Extrusion des Polkörpers (PB), um das Entwicklungsstadium der Eizellen zu identifizieren. Siehe Abbildung 2 für repräsentative Bilder von Eizellen in COCs, Metaphase II (MII), Metaphase I (MI) und Keimbläschen (GVs) mit klaren morphologischen Merkmalen.
HINWEIS: Verwenden Sie eine vertikale Flamme (z. B. eines Bunsenbrenners), um den Durchmesser der Pasteurpipette aus Glas auf die Größe einer Eizelle einzustellen. - Zählen Sie MII-Eizellen und notieren Sie die Anzahl.
- Wählen Sie reife Eizellen für IVF oder Vitrifikation.
HINWEIS: Sammeln Sie Spermien an dem Tag, an dem die Eizellen für IVF reifen, aber nicht für die Vitrifizierung von Eizellen. - Kultivieren Sie die unreifen Eizellen im GV- und MI-Stadium im ursprünglichen IVM-Kulturmedium mit Kumuluszellen für weitere 10-14 h. Wiederholen Sie die Schritte 7.6.2-7.6.3.
- Entleeren Sie die Kumuluszellen durch wiederholtes Pipettieren mit einer Glas-Pasteur-Pipette unter dem Stereoskop mit 40-facher Vergrößerung. Untersuchen Sie die Extrusion des Polkörpers (PB), um das Entwicklungsstadium der Eizellen zu identifizieren. Siehe Abbildung 2 für repräsentative Bilder von Eizellen in COCs, Metaphase II (MII), Metaphase I (MI) und Keimbläschen (GVs) mit klaren morphologischen Merkmalen.
8. ICSI oder Eizellvitrifikation durchführen
- Befolgen Sie das Standardverfahren des Fortpflanzungszentrums8.
9. Kultivieren Sie Embryonen und führen Sie eine Kryokonservierung von Embryonen durch
- Befolgen Sie das Standardverfahren des Fortpflanzungszentrums8.
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Representative Results
Bis Dezember 2019 wurde OP-IVM zur Erhaltung der Fruchtbarkeit von 274 Patienten eingesetzt. Embryologische und reproduktive Ergebnisse von 158 Patienten zwischen 2014 und 2016 wurden in einer früheren Arbeit veröffentlicht8. Im folgenden Beispiel wird das Verfahren für einen PCOS-Patienten beschrieben, der 2016 OP-IVM erhielt. Der Patient ist ein 28-Jähriger, bei dem primäre Unfruchtbarkeit, linke Adnexzyste und PCOS diagnostiziert wurden. Sie erhielt am28.September 2016 eine laparoskopische Zystektomie und OP-IVM; Es wurden 27 unreife COCs gewonnen. Nach einer 28-stündigen Kultur wurden 7 Eizellen im MII-Stadium ausgewählt und von ICSI befruchtet. Die Anzahl der qualitativ hochwertigen 2 Pro-Kerne (2PNs) an Tag 1 und der Embryonen an Tag 3 und Tag 5 betrug 6, 6 bzw. 2. Die am5.Tag (4. Oktober 2016) gewonnenen Blastozysten wurden eingefroren. Am 14.Februar 2017 wurde eine Blastozyste aufgetaut. Diese aufgetaute Blastula war am Leben und wurdeam 14. Februar 2017 in die Gebärmutter übertragen. Die Ergebnisse eines Bluttests mit humanem Choriongonadotropin (hCG) waren positiv, und die Sonographie zeigte eine intrauterine Frühschwangerschaft. Die Patientin brachte am 2. November 2017 nach 40 Wochen eingesundesMädchen per Kaiserschnitt zur Welt.
Abbildung 1: OP-IVM-Flussdiagramm. Vor der gynäkologischen Operation wird unter transvaginaler Ultraschallführung Follikelflüssigkeit durch IMFA abgesaugt. Die erhaltene Follikelflüssigkeit wird in das IVF-Labor übertragen, filtriert und gespült. Unreife COCs werden in eine vorgewärmte IVM-Kulturlösung überführt und für 28-32 h kultiviert. Reife Eizellen mit PB werden für die Kryokonservierung oder IVF-ET verwendet. Abkürzungen: IMFA = unreife Follikelaspiration; IVF = In-vitro-Fertilisation; IVF-ET = IVF und Embryotransfer; COCs = Kumulus-Eizell-Komplexe; IVM = In-vitro-Reifung; OP-IVM = IVM vor einer gynäkologischen Operation; GV = Keimbläschen; MI = metaphase I; ICSI = intrazytoplasmatische Spermieninjektion; PB = Polkörper; PN = Pro-Kern; D1 = Tag 1. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 2: Morphologische Merkmale repräsentativer Bilder von Eizellen. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV Stadium. Abkürzungen: COCs = Kumulus-Eizell-Komplexe; GV = Keimbläschen; MI = metaphase I; MII = metaphase II. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
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Discussion
Die in diesem Artikel beschriebene OP-IVM-Methode erstreckt sich auf konventionelle IVM-Anwendungen und kombiniert IVM nach Eizellentnahme mit routinemäßigen gynäkologischen Operationen. Eizellen, die in der gynäkologischen Chirurgie verloren gegangen wären, können nun ohne zusätzliche chirurgische Risiken für IVF-ET oder FP verwendet werden. OP-IVM wurde zuerst verwendet, um Eizellen vor dem Eierstockbohren bei PCOS-Patienten zu entnehmen. Seine Anwendung weitete sich bald auf unfruchtbare Patienten aus, die eine gutartige gynäkologische Operation benötigen, und auf Krebs- oder hämatologische Patienten, die eine Chemoradiotherapie benötigen. Aufgrund des potenziellen Metastasierungsrisikos ist OP-IVM für Patienten mit bösartigen Tumoren nicht geeignet oder empfohlen. Basierend auf OP-IVM wurde an dieser Einrichtung eine neue chinesische Art der Eizellbank für die FP von unfruchtbaren Patienten und Krebspatienten etabliert.
Für OP-IVM sollten sowohl die Dringlichkeit einer gynäkologischen Operation als auch das Potenzial einer höheren Anzahl von Eizellen berücksichtigt werden. Im Allgemeinen korreliert das IVM-Ergebnis positiv mit der Anzahl der unreifen Eizellen, die während der Eizellentnahme erhalten wurden9. Dominante Follikel können das Wachstum der umgebenden kleineren Follikel hemmen und Atresie10verursachen, was zu einer reduzierten Anzahl von entnommenen unreifen Eizellen führt. Wenn die gynäkologische Operation nicht dringend ist, ist das beste Fenster für OP-IVM, wenn eine größere Anzahl kleiner Follikel mit wenigen dominanten Follikeln durch B-Mode-Sonographie beobachtet wird. Darüber hinaus kann das Anti-Müller-Hormon (AMH) als Parameter zur Vorhersage der Eierstockreserve verwendet werden, da die Anzahl der entnommenen Eizellen signifikant positiv mit AMH11,12korreliert ist. In Fällen, in denen die gynäkologische Operation priorisiert wurde, sollten so viele unreife Eizellen wie möglich entnommen werden. Bei Notfalloperationen sollten Eizellentnahme und IVM sorgfältig auf der Grundlage des Zustands und des Willens des Patienten bewertet werden.
IMFA unter transvaginaler Ultraschallführung ist eine Methode zur Gewinnung von Eizellen, die schädigen können, um die Schädigung der Eierstockfunktion zu reduzieren13,14. In einigen Studien wird auch eine laparoskopische Ovarialpunktion verwendet, um unreife Eizellen anzusaugen15. Im Vergleich zur Laparoskopie nimmt DIE IMFA unter transvaginalem Ultraschall jedoch weniger Zeit in Anspruch, ist weniger invasiv, lässt sich leichter durchführen16,17und kann eine gezieltere Follikelaspiration erreichen. Um die Auswirkungen auf die Eierstockreserve zu minimieren und die Aspirationsgenauigkeit zu erhöhen, wird DAHER IMFA unter transvaginaler Ultraschallführung als bessere Methode für die Eizellentnahme bei OP-IVM empfohlen. Für die Befruchtung wird jedoch ICSI empfohlen. Frühere Studien haben gezeigt, dass die Zona pellucida nach längerer Kultivierung in vitro aushärtet, was zu einer reduzierten Rate erfolgreicher Befruchtung führt18. Es wurde gezeigt, dass ICSI die Befruchtungsrate von IVM-Eizellen in natürlichenZyklen 19,20effektiv verbessert. Obwohl neuere Studien ähnliche Befruchtungsraten für ICSI und IVF21,22gezeigt haben, hat ICSI den Vorteil, natürliche Zyklen anstelle der Stimulation der Eierstöcke zu verwenden. Gesammelte Embryonen werden aufgrund eines unvorbereiteten Endometriums eingefroren, und der Embryotransfer kann später nach dem Standardverfahren in jedem Zentrum durchgeführt werden.
Der Zweck von ART ist es, Unfruchtbarkeit zu behandeln und gesunde Babys zu liefern. Frühere Untersuchungen über die Fortpflanzungsergebnisse von OP-IVM zeigten, dass die Anzahl der entnommenen Eizellen und die Reifungsraten der Eizellen mit denen vergleichbar sind, die für konventionelle IVM-Zyklen mit FSH und hCG beobachtet wurden. OP-IVM hat jedoch eine niedrigere CPR und einen niedrigeren LBR als herkömmliche IVM8,23,24,25. Dies kann durch eine eingeschränkte Eizellreifung aufgrund des schlechten Entwicklungspotenzials unreifer Eizellen in natürlichen Zyklen erklärt werden. Die Hormonstimulation ist jedoch für einige Patienten, die nicht in der Lage sind oder nicht die Zeit haben, die Behandlung zu erhalten, keine Option. Darüber hinaus kann die Vitrifikation das Entwicklungspotenzial der Eizellen schädigen, was zu niedrigen CPRs und LBRsführt 26,27.
Darüber hinaus können Gonadotropine die Eierstöcke vergrößern und das Blutungsrisiko während der Eizellentnahme erhöhen, was die Exposition der Operationsfelder in der Laparoskopie beeinträchtigt. Der LBR der OP-IVM-Methode ist relativ gering. Weitere Studien sind erforderlich, um das beste operative Timing zu untersuchen und das IVM-Kultursystem zu modifizieren, um die OP-IVM-Ergebnisse zu verbessern. Insgesamt kombiniert OP-IVM IVM IVM mit gynäkologischer Chirurgie, so dass unreife Eizellen, die beschädigt oder verworfen worden wären, gerettet und für die ART verwendet werden können. OP-IVM hat die Vorteile, Komplikationen zu vermeiden, die durch eierstockstimulierende Medikamente verursacht werden, und die Anzahl der Operationen zur Behandlung von Unfruchtbarkeit zu reduzieren. Daher sollte OP-IVM als potenziell wertvolle Behandlungsmethode für bestimmte Patienten betrachtet und eingehender untersucht werden, um ihre Auswirkungen und Ergebnisse besser zu verstehen.
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Disclosures
Die Autoren haben nichts preiszugeben.
Acknowledgments
Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse des China National Key R&D Program (Nr. 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), der National Science Foundation of China (Nr. 81571386, 81730038), des CAMS Innovation Fund for Medical Sciences (2019-I2M-5-001) und des Special Research Project of Chinese Capital Health Development (2018-2-4095) unterstützt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 19 G single-lumen aspiration needles | Cook, Australia | K-OPS-7035-REH-ET | |
| 4-well plate | Corning | ||
| 70 μm nylon cell strainer | Falcon, USA | 352350 | |
| CO2 Incubator | Thermo | ||
| Culture oil | Vitrolife, Sweden | 10029,OVOIL | Step 3.2. |
| FSH & LH | Ferring Reproductive Health, Germany | MENOPUR® | |
| Glass Pasteur pipette | Hilgenberg GmbH, Germany | 3154102-26 | |
| G-MOPS medium | pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing | ||
| IVM medium | Origio, Denmark | ART-1600-B | |
| Laminar Flow Clean Benches | ESCO | ||
| Petri dish | Thermo Fisher Scientific, Denmark | 263991 | |
| pH stable handing media designed to support the handling and manipulation of oocytes and embryos outside the incubator | Vitrolife, Sweden | 10130, G-MOPS PLUS | Step 7.1. |
| Rinse solution | Cook, Australia | K-SIFB-100 | |
| Stereoscope | Nikon |
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Medizin Ausgabe 171 IVM Fertilitätserhaltung transvaginale Entnahme endoskopische gynäkologische Verfahren PCOSErratum
Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 06/26/2023.
Citeable Link.
An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
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Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
