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समुद्री लकड़ी-उबाऊ क्रस्टेशियन द्वारा बायोडिग्रेडेशन के लिए लकड़ी के प्रतिरोध का तेजी से परीक्षण

Published: January 29, 2022 doi: 10.3791/62776
Automatic Translation
1, 1,2, 1, 1, 1, 1
1University of Portsmouth, 2Microbiology Department, University of Massachusetts

Summary

यह प्रोटोकॉल मल गोली उत्पादन को मापने के द्वारा लकड़ी-उबाऊ क्रस्टेशियन, लिम्नोरिया की खिला दर का आकलन करने के लिए एक विधि प्रस्तुत करता है। इस विधि को गैर-विशेषज्ञ प्रयोगशालाओं में उपयोग के लिए डिज़ाइन किया गया है और इसमें समुद्री परिस्थितियों में बढ़ी हुई लकड़ी के स्थायित्व का मूल्यांकन करने के लिए मानक परीक्षण प्रोटोकॉल में शामिल करने की क्षमता है।

Abstract

लकड़ी-उबाऊ अकशेरुकी तेजी से समुद्री लकड़ी और लकड़ी के तटीय बुनियादी ढांचे को नष्ट कर देते हैं, जिससे हर साल दुनिया भर में अरबों डॉलर का नुकसान होता है। चूंकि व्यापक स्पेक्ट्रम बायोसाइड्स के साथ लकड़ी के उपचार, जैसे कि क्रेओसोट और क्रोमेटेड कॉपर आर्सेनेट (सीसीए), अब कानून द्वारा समुद्री उपयोग में प्रतिबंधित हैं, स्वाभाविक रूप से टिकाऊ लकड़ी की प्रजातियां और लकड़ी के उपन्यास संरक्षण विधियों की आवश्यकता होती है। ये तरीके नियामक मानकों को पूरा करने के लिए परीक्षण से गुजरते हैं, जैसे कि समुद्री बोरर्स के खिलाफ लकड़ी के संरक्षकों के परीक्षण के लिए यूरोपीय मानक, ईएन 275। टिकाऊ लकड़ी प्रजातियों या लकड़ी के संरक्षक उपचार की प्रारंभिक जांच को प्रयोगशाला परीक्षण के माध्यम से जल्दी और सस्ते में प्राप्त किया जा सकता है, जो समुद्री क्षेत्र परीक्षणों पर कई फायदे प्रदान करता है जो आमतौर पर महंगे, दीर्घकालिक प्रयास होते हैं। लिम्नोरिया (ग्रिबल) की कई प्रजातियां समुद्री लकड़ी-उबाऊ क्रस्टेशियन हैं। Limnoria समुद्री लकड़ी-बोरर्स द्वारा लकड़ी के बायोडिग्रेडेशन के प्रयोगशाला परीक्षण में उपयोग के लिए आदर्श हैं, एक्वारिया में उन्हें पालने की व्यावहारिकता और लकड़ी पर उनकी खिला दरों को मापने में आसानी के कारण। इसमें, हम ग्रिबल का उपयोग करके लकड़ी के बायोडिग्रेडेशन का आकलन करने के लिए एक मानकीकृत प्रयोगशाला परीक्षण की रूपरेखा तैयार करते हैं।

Introduction

लकड़ी-बोरर समुद्री लकड़ी की संरचनाओं को व्यापक नुकसान पहुंचा सकते हैं, जैसे कि समुद्री रक्षा, पियर्स और एक्वाकल्चर संरचनाएं; जिसके प्रतिस्थापन या बहाली की लागत दुनिया भर में प्रति वर्ष अरबों डॉलर की लागत 1,2,3 है। इन संरचनाओं की रक्षा के लिए, लकड़ी को अक्सर बायोडिग्रेडेशन को कम करने के लिए इलाज किया जाता है। हालांकि, समुद्री वातावरण में ऑस्ट्रेलिया, यूरोपीय संघ, ब्रिटेन और संयुक्त राज्य अमेरिका में व्यापक स्पेक्ट्रम बायोसाइड्स के उपयोग के प्रतिबंध के कारण, नई संशोधन तकनीकों और लकड़ी की प्रजातियां जो स्वाभाविक रूप से बोरर्स के लिए टिकाऊ हैं, 4,5,6,7 के बाद की मांग की जाती है। समुद्री पर्यावरण में लकड़ी के संरक्षण के लिए उपन्यास तकनीकों को नियामक मानकों को पूरा करने और किसी भी रासायनिक संरक्षक के लीचिंग जैसे खतरों से पर्यावरणीय प्रभावों को सीमित करने के लिए पूरी तरह से परीक्षण की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, यूरोपीय मानक, EN 275, जो 1992 से वर्तमान यूरोपीय मानक है, का उपयोग समुद्री लकड़ी-बोरर क्षति 8,9 के खिलाफ लकड़ी के संरक्षण उपचार का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है। यह मानक, बायोसिडल यौगिकों के उपयोग के खिलाफ अन्य कानूनों के साथ, जैसे कि सीसीए 4, 5,6,7 और क्रियोसोट10, लकड़ी की सुरक्षा के टिकाऊ, गैर-विषैले तरीकों और बायोसाइडल उपचार को बदलने के लिए स्वाभाविक रूप से टिकाऊ लकड़ी प्रजातियों के उपयोग की आवश्यकता होती है11,12 . समुद्री परीक्षण, जैसे कि ईएन 275 में निर्दिष्ट, लंबे समय तक एक्सपोजर अवधि की आवश्यकता होती है और इस प्रकार सार्थक परिणाम देने के लिए महंगे और धीमे होते हैं। प्रयोगशाला परीक्षण, हालांकि, समुद्री लकड़ी-बोरर हमले के खिलाफ लकड़ी के उत्पादों को संरक्षित करने के तरीकों का परीक्षण करने के लिए एक बहुत तेज़ विकल्प प्रदान करते हैं, जिससे उपचार शेड्यूल 13 में समायोजन के तेजी से मूल्यांकन की अनुमति मिलती है। इस तेजी से प्रयोगशाला प्रयोग के परिणाम लकड़ी की उपन्यास संशोधन प्रक्रियाओं को सूचित करने और बोरर क्षति के लिए प्राकृतिक स्थायित्व के साथ लकड़ी की प्रजातियों की पहचान करने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। एक कम खिला दर और जीवन शक्ति संभावित उत्पादों में बढ़े हुए प्रतिरोध का संकेत दे सकती है और इस जानकारी को तब उद्योग के भागीदारों को वापस खिलाया जा सकता है ताकि उन्हें डिजाइन में सुधार करने की अनुमति मिल सके। हमारी विधि एक फुर्तीली और तेजी से प्रतिक्रिया की अनुमति देती है, जो उद्योग में वांछनीय है, और एक बार होनहार उत्पादों की पहचान की गई है, परिणामों को समुद्री परीक्षणों से उन लोगों के साथ पूरक किया जा सकता है।

Gribbles (Limnoria) Limnoriidae परिवार में आइसोपॉड क्रस्टेशियन का एक जीनस है। दुनिया भर में लिम्नोरिया की 60 से अधिक प्रजातियां हैं13,14,15, ब्रिटेन में तीन आम प्रजातियां पाई जाती हैं, लिम्नोरिया लिग्नोरम, लिम्नोरिया ट्रिपुनक्टाटा और लिम्नोरिया क्वाड्रिपंक्टाटा 16। वे लकड़ी की सतह पर सुरंगों को बोर करते हैं जो समुद्री जल में डूबे होते हैं, अक्सर आर्थिक रूप से महत्वपूर्ण नुकसान का कारण बनते हैं। घ्रिब्ल्स तटीय यूके के पानी में अत्यधिक प्रचुर मात्रा में होते हैं और प्रयोगशाला की स्थितियों के तहत बनाए रखना आसान होता है, जिससे उन्हें समुद्री लकड़ी-उबाऊ अकशेरुकी द्वारा लकड़ी के बायोडिग्रेडेशन के अध्ययन के लिए आदर्श जीव बना दिया जाता है। विभिन्न लकड़ी प्रजातियों और लकड़ी के संरक्षण विधियों पर ग्रिबल्स की खिला दर और जीवन शक्ति का मूल्यांकन बायोडिग्रेडेशन के लिए उनके प्रतिरोध की प्रभावकारिता निर्धारित कर सकता है। निम्नलिखित प्रोटोकॉल ग्रिबल फीडिंग दरों को मापने के लिए एक मानक विधि निर्धारित करता है, जो कि बोर्गेस और सहकर्मियों द्वारा वर्णित 12,17 से विकसित किया गया है, इसके अलावा गैर-विशेषज्ञ प्रयोगशालाओं में प्रक्रिया को संचालित करने के लिए छवि विश्लेषण की शुरुआत को सुव्यवस्थित करने के लिए। छवि विश्लेषण का उपयोग बड़ी संख्या में नमूनों की मैन्युअल रूप से गिनती की व्यावहारिक सीमाओं को कम करने के लिए भी किया जाता है। ब्रिटिश मानक EN350-1: 1994 के अनुसार दीर्घकालिक समुद्री परीक्षण में स्थायित्व, पिनस सिल्वेस्ट्रिस सैपवुड 18 के संदर्भ में वर्गीकृत किया गया है। यहां प्रस्तुत अल्पकालिक प्रयोगशाला परीक्षण में, हम स्कॉट्स पाइन (पिनस सिल्वेस्ट्रिस एल) सैपवुड का उपयोग प्रजातियों के दिल की लकड़ी का परीक्षण करने के लिए एक नियंत्रण के रूप में करते हैं एक्की (लोफिरा अलाटा बैंक्स पूर्व सी.एफ. गेर्टन), बीच (फागस सिल्वेटिका एल), मीठे चेस्टनट (Castanea sativa मिल) और तारपीन (Syncarpia glomulifera (Sm.) Nied)। प्रति लकड़ी प्रजातियों के आठ प्रतिकृतियों के बीच औसत मल गोली उत्पादन और जीवन शक्ति का उपयोग स्थायित्व के संकेतक के रूप में किया गया था। हम एक विशिष्ट मूल्यांकन से एकत्र किए गए उदाहरण डेटा प्रदान करते हैं, जिसमें घिसने वाली प्रजातियों लिम्नोरिया क्वाड्रिपंक्टाटा और स्वाभाविक रूप से टिकाऊ लकड़ी की प्रजातियों की एक श्रृंखला का उपयोग किया जाता है। Limnoria quadripunctata, Menzies (1951) द्वारा प्रदान की गई चाबियों द्वारा पहचाना गया था, इस तथ्य के कारण बायोडिग्रेडेशन परीक्षणों के लिए इष्टतम प्रजातियों के रूप में चुना गया था कि यह परिवार का सबसे अच्छी तरह से अध्ययन किया गया सदस्य है और बायोडिग्रेडेशन परीक्षणों में उपयोग के लिए एक मॉडल प्रजाति के रूप में अच्छी तरह से स्थापित है। यह प्रोटोकॉल विभिन्न उपचारों के जंगलों के परीक्षण के लिए भी लागू होता है, हालांकि उपयोग किए जाने वाले नियंत्रण को एक ही प्रजाति की अनुपचारित प्रतिकृतियां होनी चाहिए।

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Protocol

1. टेस्ट स्टिक्स की तैयारी

  1. किसी भी उपचार प्रक्रिया के पूरा होने के बाद, परीक्षण छड़ें में सूखी लकड़ी को 2 मिमी x 4 मिमी x 20 मिमी (चित्रा 1) के आकार में काट लें। हवा सूखी प्रयोगशाला की स्थिति में, एक स्थिर वजन के लिए चिपक जाती है। परीक्षण किए जा रहे प्रत्येक लकड़ी के कम से कम 5 प्रतिकृतियों का उपयोग करें।

Figure 1
चित्रा 1: परीक्षण छड़ें अल्पकालिक प्रयोगशाला परीक्षण में इस्तेमाल किया gribble खिला दरों का आकलन करने के लिए.  परीक्षण लकड़ी छड़ें आकार 2 मिमी x 4 मिमी x 20 मिमी. बाएं से दाएं: ekki, तारपीन, मिठाई चेस्टनट और बीच heartwood और स्कॉट्स पाइन sapwood. स्केल बार 4 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

  1. निर्वात गर्भाधान
    1. लकड़ी की तैयारी के बाद (यानी, काटने और उपचार, यदि लागू हो), तो वैक्यूम डेसिकेटर के अंदर एक खाद्य-सुरक्षित प्लास्टिक कंटेनर में एक जाल के नीचे छड़ें रखें और ढक्कन को प्रतिस्थापित करें यह सुनिश्चित करें कि एक तंग सील है, जो वैक्यूम ग्रीस की कोटिंग द्वारा सुविधाजनक है (चित्रा 2)।
    2. desiccator और पंप को जोड़ने टयूबिंग के बीच एक तीन-तरफ़ा वाल्व संलग्न करें, एक तीसरी ट्यूब के साथ खुली हवा के लिए अग्रणी (चित्रा 2)। सुनिश्चित करें कि तीन-तरफ़ा वाल्व हवा में बंद हो गया है और वैक्यूम डेसिकेटर के भीतर -0.75 से -1.0 बार के बीच वैक्यूम प्राप्त करने के लिए पंप चलाएं और इस वैक्यूम को 45 मिनट - 1 घंटे के लिए रखें।
    3. तीसरी ट्यूब के खुले सिरे को समुद्री जल के कंटेनर में डुबोएं। पंप को बंद करें और पंप की ओर जाने वाले वाल्व को बंद करें, फिर धीरे-धीरे वाल्व को खोलें जब तक कि समुद्री जल को वैक्यूम द्वारा डेसिकेटर में खींचा न जाए। पानी को तब तक बहने दें जब तक कि यह जाल के स्तर से ऊपर प्लास्टिक कंटेनर को भर न दे।
    4. फिर कंटेनर में समुद्री जल से ट्यूब को वापस ले लें, जिससे हवा में प्रवेश करने की अनुमति मिलती है, जब तक कि डेसिकेटर वायुमंडलीय दबाव में वापस नहीं आ जाता। छड़ें जाल के नीचे डूबे रखें जब तक कि वे प्लास्टिक कंटेनर के नीचे तक डूब न जाएं।

Figure 2
चित्रा 2: उपकरण एक प्रयोगशाला खिला परख के दौरान gribbles को खिलाने के लिए तैयारी में, समुद्री जल के साथ लकड़ी की छड़ें impregnate लकड़ी की छड़ें वैक्यूम करने के लिए इस्तेमाल किया.  ए) वैक्यूम desiccator; बी) पंप; सी) वैक्यूम desiccator के लिए दबाव गेज; डी) वैक्यूम desiccator, पंप और खुली हवा या समुद्री जल (नारंगी ट्यूब) के लिए अग्रणी तीन तरफा वाल्व। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

  1. लीचिंग लकड़ी
    1. 50 मिलीलीटर ट्यूबों में निहित समुद्री जल में समुद्री जल-संतृप्त परीक्षण छड़ें जलमग्न करें (चित्र3)। 20 दिनों की अवधि के लिए नियमित रूप से पानी बदलें।
      नोट: लीचिंग प्रक्रिया परीक्षण के तहत किसी भी प्रयोगात्मक लकड़ी पर लागू होती है, जिसमें उपचारित या प्राकृतिक लकड़ी शामिल है।

Figure 3
चित्रा 3: एक प्रयोगशाला खिला परख के दौरान gribbles को खिलाने के लिए तैयारी के लिए लकड़ी की छड़ें से लीचेट.  लकड़ी जो पूरी तरह से समुद्री जल में डूबी हुई थी, जो 50 मिलीलीटर फाल्कन ट्यूब में निहित थी, नियमित रूप से पानी के परिवर्तन (1-3 दिन) के साथ, स्पष्ट रूप से रंगीन लीचेट का उत्पादन किया। के दिल की लकड़ी से बाएं से दाएं लीचेट तक; मिठाई चेस्टनट, तारपीन, ekki, और बीच और स्कॉट्स पाइन sapwood. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

2. निकालने Gribble

  1. एक संक्रमित लकड़ी के ब्लॉक से ग्रिबल के अलग-अलग नमूनों को निकालें। ठीक संदंश और एक पतली (आकार 000/ ध्यान से वापस किसी भी लकड़ी है कि संदंश के साथ gribble बिल को कवर कर रहा है छील
    नोट: Burrows लकड़ी की सतह पर पाए जाते हैं और छोटे छेद (चित्रा 4) द्वारा पहचाना जा सकता है।
  2. एक बार जब ग्रिबल उजागर हो जाता है, तो नीचे से व्यक्तियों को धीरे-धीरे लेने और समुद्री जल से भरे पेट्री डिश में जमा करने के लिए पेंटब्रश का उपयोग करें। प्रजातियों की पहचान करने के लिए एक माइक्रोस्कोप के नीचे ग्रिबल की जांच करें और यह सुनिश्चित करने के लिए कि निकालने के दौरान कोई नुकसान नहीं हुआ था।
    नोट: pleopods की पिटाई जीवन शक्ति का एक संकेत हैं.
    1. अंडे को ब्रूडिंग करने वाली किसी भी मादा को छोड़ दें क्योंकि गुरुत्वाकर्षण मादाओं में कम खिलाने की क्षमता होती है।

Figure 4
चित्रा 4: दो ठेठ वेंटिलेशन छेद के साथ एक gribble burrow की छवि. एल। रेडिएटा पाइन लकड़ी की एक छड़ी पर चतुर्भुज बिल, आकार 2 मिमी x 4 मिमी x 20 मिमी। दो छोटे वेंटिलेशन छेद burrow प्रवेश द्वार के बगल में देखा जा सकता है. स्केल बार 2 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।  

  1. Limnoria quadripunctata की पहचान
    1. चार अलग-अलग ट्यूबरकल्स द्वारा एक स्टीरियोमाइक्रोस्कोप के तहत लिम्नोरिया क्वाड्रिपंक्टाटा की पहचान करें, जो पांचवें प्लीओनाइट 19 (चित्रा 5) पर एक्स-आकार के कैरिना के अलावा जानवर के प्लियोटेलसन पर एक वर्ग पैटर्न में व्यवस्थित है।

Figure 5
चित्रा 5: Limnoria quadripunctata विशेषताओं की पहचान.  पृष्ठीय सतह Limnoria quadripunctata की छवि, x20 आवर्धन पर एक stereomicroscope पर लिया. लाल तीर द्वारा दिखाई गई विशेषताओं की पहचान करना - एक्स- आकार के कैरिना और नीले तीर को इंगित करता है - प्लियोटेलसन पर चार ट्यूबरकल को इंगित करता है। स्केल बार 1 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

3. अच्छी तरह से प्लेटों की तैयारी

  1. 20 मिमी व्यास के कुओं के साथ बहु-अच्छी तरह से प्लेटों में, एक परीक्षण छड़ी और 5 मिलीलीटर अनफ़िल्टर्ड समुद्री जल, 32-35 पीएसयू के बीच, प्रति अच्छी तरह से (चित्रा 6) रखें।
  2. अच्छी तरह से प्लेट में व्यवस्थित रूप से लकड़ी के उपचार / प्रजातियों को रखें ताकि प्रत्येक प्रकार की लकड़ी को प्रति प्लेट कम से कम एक बार दर्शाया जा सके। अच्छी तरह से प्रति एक gribble जोड़ें.
    नोट: तापमान को एक इनक्यूबेटर में 20 डिग्री सेल्सियस ± 2 डिग्री सेल्सियस पर प्रजातियों एल के लिए स्थिर रखा जाना चाहिए। quadripunctata, Limnoria की अन्य प्रजातियों का उपयोग विशिष्ट प्रजातियों के अनुरूप किए गए तापमान में समायोजन के साथ किया जा सकता है।
  3. प्लेटों को निरंतर अंधेरे परिस्थितियों में रखें क्योंकि फोटोपीरियड का ग्रिबल फीडिंग रेट 15 पर प्रभाव नहीं पड़ता है।

Figure 6
चित्रा 6: प्रयोगात्मक gribble खिला परख के लिए स्थापित.  एक 12 बहु-अच्छी तरह से प्लेट का एक उदाहरण जो ग्रिबल फीडिंग दर के प्रयोगशाला परीक्षण में उपयोग किया जाता है। प्रत्येक अच्छी तरह से 5 मिलीलीटर समुद्री जल और विभिन्न लकड़ी प्रजातियों के एक परीक्षण छड़ी (20 मिमी x 4 मिमी x 2 मिमी) शामिल हैं; स्कॉट्स पाइन sapwood और ekki, बीच, मिठाई चेस्टनट, और तारपीन heartwood. स्केल बार 20 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

4. संग्रह और मल छर्रों गिनती और जीवन शक्ति का आकलन.

  1. प्रति सप्ताह दो बार, अच्छी तरह से प्लेट से परीक्षण छड़ी और प्रत्येक ग्रिबल (प्रति अच्छी तरह से एक) को हटा दें और एक ताजा पूर्व-तैयार अच्छी तरह से प्लेट में रखें (जिसमें प्रति अच्छी तरह से 5 मिलीलीटर समुद्री जल होता है [32-35 पीएसयू, 18-22 डिग्री सेल्सियस])।
  2. स्थानांतरित करने से पहले छड़ी से किसी भी मल छर्रों को धीरे से ब्रश करने के लिए एक पेंटब्रश का उपयोग करें और मूल अच्छी तरह से मल छर्रों को बनाए रखें।
    नोट: एक ताजा अच्छी तरह से प्लेट के लिए gribble स्थानांतरित करने से पहले, जीवन शक्ति 1-5 के पैमाने पर मूल्यांकन किया जा सकता है; 1 = मृत, 2 = निष्क्रिय, लकड़ी पर नहीं, 3 = सक्रिय रूप से तैरना या प्लियोपोड्स को मारना, लकड़ी पर नहीं, 4 = लकड़ी की सतह पर रेंगना, 5 = लकड़ी में घुसना।
  3. छवि प्रसंस्करण
    1. किसी भी clumps को अलग करने के लिए एक ठीक पेंटब्रश का उपयोग करें ताकि व्यक्तिगत छर्रों दिखाई दे और अच्छी तरह से किनारों से दूर छर्रों को ब्रश करें। एक स्टीरियो माइक्रोस्कोप के तहत एक विस्तृत तस्वीर लें, आवर्धन x4 पर और एक कंप्यूटर पर अपलोड करें (चित्रा 7)।
      नोट: सुनिश्चित करें कि छर्रों फोकस में हैं और पृष्ठभूमि एक समान है, जिसमें पानी की सतह पर कोई छाया या प्रकाश प्रतिबिंब नहीं है।

Figure 7
चित्रा 7: gribble मल छर्रों की छवि. एल। एक बहु-अच्छी तरह से प्लेट के एक कुएं में रेडिएटा पाइन लकड़ी पर खिलाने से चतुर्भुज मल छर्रों (छोटे, बेलनाकार, भूरे रंग के छर्रों)। x4 आवर्धन पर लिया गया। छवि विश्लेषण के लिए हेरफेर से पहले छवियां (चित्रा 7 देखें)। ए) इमेजजे में स्वचालित गिनती के लिए उपयोग किए जाने वाले एक उपयुक्त छवि का उदाहरण। छर्रों को पर्याप्त रूप से फैलाया जाता है और कुएं के किनारों से दूर किया जाता है। कुआं केंद्रित है और कोई बाधा या प्रतिबिंब नहीं हैं। बी) एक छवि का एक उदाहरण जो छवि विश्लेषण के लिए अनुपयुक्त है। कुआं ऑफ-सेंटर है, जो नीचे के आधे हिस्से को काटता है। नीला (बिंदीदार) वृत्त पानी की सतह से प्रकाश परावर्तन दिखाता है। नारंगी (ठोस) सर्कल छर्रों को दिखाता है जो बहुत बारीकी से एक साथ और कुएं के किनारे के पास भी clumped हैं। लाल (धराशायी) सर्कल एक लकड़ी की चिप दिखाता है जिसे हटाया नहीं गया था। स्केल बार 10 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।  

  1. प्रक्रिया छविजे का उपयोग कर मल गोली गिनती उत्पन्न करने के लिए.
    1. डाउनलोड ImageJ (03/08/21, 1.8.0_172 के रूप में नवीनतम संस्करण) https://imagej.nih.gov/ij/download.html से या कंप्यूटर के ब्राउज़र से चलाएँ.
    2. छवियों का एक स्टैक खींचकर और छोड़कर या फ़ाइल | का चयन करके अपलोड करें | आयात करें छवि अनुक्रम | ब्राउज़ करें. किसी भी पैरामीटर को न बदलें फिर ठीक का चयन करें।
    3. इसके बाद, अच्छी तरह से मल छर्रों युक्त के निचले अनुभाग का चयन करने के लिए सर्कल टूल का उपयोग करें। अच्छी तरह से किनारों को निकालें, | संपादित करें का चयन करें बाहर साफ़ करें। छवि बाइनरी बनाएँ, प्रक्रिया | का चयन करें बाइनरी बनाएं।
    4. विश्लेषण | का चयन करके कैलिब्रेट करें स्केल सेट करें और छवि के लिए प्रति मिलीमीटर पिक्सेल की संख्या चुनें (उदाहरण के लिए 10 पिक्सेल = 1 मिमी)। छर्रों की गणना करें, विश्लेषण | का चयन करें कणों का विश्लेषण करें।
    5. आकार (unit2) के बगल में बॉक्स में, एक कम थ्रेशोल्ड का चयन करें जो पहले सेट किए गए यूनिट स्केल का उपयोग करके सबसे छोटे आकार के पैलेट के समान है (उदाहरण के लिए, यदि 10 पिक्सेल = 1 मिमी और सबसे छोटी गोली 0.5 मिमी है, तो 5-अनंत चुनें)।
    6. ड्रॉप डाउन दिखाएँ बॉक्स में, बाह्यरेखाका चयन करें और फिर सारांश ति करें पर टिक करें और ठीक (चित्र8) दबाएँ.
      नोट: अधिक जानकारी https://imagej.nih.gov/ij/docs/guide/index.html पर पाया जा सकता है

Figure 8

Figure 8.1
चित्रा 8: मल छर्रों की गिनती करने के लिए ImageJ में उपयोग की जाने वाली प्रक्रिया का एक प्रवाह आरेख।  A) ImageJ के फ़ाइल टैब में एक छवि अनुक्रम आयात करना. B) एक स्थानीय डिवाइस से छवियों का एक अनुक्रम आयात करने के लिए 'छवि अनुक्रम आयात करें' संवाद बॉक्स में ब्राउज़ बटन। C) मल छर्रों वाले क्षेत्र का चयन करने के लिए सर्कल टूल का उपयोग करना D) चयनित क्षेत्र के बाहर निकालने के लिए संपादन टैब क्षेत्र में बाहरी बटन साफ़ करें। E) प्रक्रिया टैब में बाइनरी बटन बनाएं। F) विश्लेषण टैब में स्केल बटन सेट करें। पिक्सेल में दूरी माप की एक इकाई (मिमी) के लिए पिक्सेल की संख्या के बराबर है। G) विश्लेषण टैब में कणों का विश्लेषण बटन। आकार (इकाई ^ 2) मल गोली आकार की निचली दहलीज पर सेट, पिक्सेल में, अनंत के लिए। दिखाएँ 'बाह्यरेखाएँ' और 'सारांश' चयनित हैं. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

  1. डेटा विश्लेषण
    1. प्रति दिन छर्रों के लिए छर्रों की गिनती को परिवर्तित करें, जो खिलाने की दर का अप्रत्यक्ष उपाय देता है और अप्रत्यक्ष उपाय करता है। किसी भी moulting व्यक्तियों से डेटा को उन दिनों पर छोड़ें जब moulting हुआ (चित्रा 9).
      नोट: Moulting 1-3 दिनों में होता है और जब एक्सोस्केलेटन का एक पूर्ण moult देखा जा सकता है तो पहचाना जा सकता है।

Figure 9
चित्रा 9: एक gribble moult का उदाहरण.  Gribble (एल quadripunctata) moulting, एक Radiata पाइन लकड़ी परीक्षण छड़ी पर आकार 20 मिमी x 4 मिमी x 2 मिमी. Moults लाल हलकों द्वारा इंगित कर रहे हैं. स्केल बार 2 मिमी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Representative Results

एल का एक खिला प्रयोग। क्वाड्रिपंक्टाटा को 20 दिनों में आयोजित किया गया था, जिसमें पांच अलग-अलग लकड़ी के प्रकारों (स्कॉट्स पाइन (पिनस सिल्वेस्ट्रिस एल) सैपवुड, और बीच (फागस सिल्वेटिका एल), एककी (लोफिरा अलाटा बैंक्स एक्स सी एफ गैर्टन), स्वीट चेस्टनट (कास्टनेया सैटिवा मिल), और तारपीन (सिंकार्पिया ग्लोमुलिफेरा (एसएम) नीड)) (सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करके नवंबर 2020 में। लकड़ी की प्रजातियों के प्रति आठ प्रतिकृति छड़ें का उपयोग किया गया था और लिम्नोरिया क्वाड्रिपंक्टाटा का एक नमूना प्रति छड़ी खिलाया गया था। सभी gribble स्टॉक है कि समुद्री विज्ञान संस्थान, पोर्ट्समाउथ विश्वविद्यालय, ब्रिटेन में aquaria में बनाए रखा जाता है से अधिग्रहित किए गए थे. स्टॉक नियमित रूप से इंग्लैंड के दक्षिणी तट से जंगली संग्रह के साथ पूरक होते हैं। जानवरों को प्रयोग से पहले स्थिर और सुसंगत संस्कृति की स्थिति के लिए अच्छी तरह से अनुकूलित किया जाता है। लकड़ी की छड़ें (20 मिमी x 4 मिमी x 2 मिमी) को खिला परीक्षण से पहले दो सप्ताह के लिए समुद्री जल में लीच किया गया था। एक ग्रिबल, एक परीक्षण छड़ी और 5 मिलीलीटर समुद्री जल को 12 बहु-अच्छी तरह से प्लेट में प्रति अच्छी तरह से रखा गया था और 20 डिग्री सेल्सियस (± 0.2 डिग्री सेल्सियस) की स्थिर स्थितियों में और निरंतर अंधेरे परिस्थितियों में एक इनक्यूबेटर में रखा गया था। मल छर्रों की गिनती की गई और प्रत्येक संग्रह में पूर्ण पानी के परिवर्तन के साथ हर 2 से 5 दिनों में एकत्र किया गया। प्रत्येक लकड़ी की प्रजातियों की आठ प्रतिकृतियों का उपयोग किया गया था, जिसमें से प्रत्येक में एक व्यक्तिगत ग्रिबल के साथ कुल चालीस छड़ें दी गई थीं। लकड़ी को लीचिंग के लिए उपयोग किए जाने वाले समुद्री जल और पूरे प्रयोग के दौरान उपयोग किए जाने वाले नमूनों को पीछे करने के लिए उपयोग किए जाने वाले मछलीघर से सीधे प्राप्त किया गया था। समुद्री जल की स्थिति मछलीघर में स्थिर और इनक्यूबेटर में स्थिर होती है। प्रति कुएं में उपयोग किए जाने वाले पानी की छोटी मात्रा से वाष्पीकरण को अच्छी तरह से प्लेटों के ढक्कन डिजाइन और हर 2-5 दिनों में होने वाले पूर्ण पानी के परिवर्तनों द्वारा कम किया जाता है।

छर्रों को छवि जे (संस्करण 1.8.0_112) का उपयोग करके स्वचालित रूप से गिना गया था।

स्कॉट्स पाइन सैपवुड लकड़ी पर एक नियंत्रण के रूप में ग्रिबल फीडिंग, प्रति दिन सबसे मल छर्रों का उत्पादन लगातार किया, इसके अलावा दिन 20 में जहां छर्रे उत्पादन बीच से आगे निकल गया था। एक्की ने परीक्षण किए गए सभी लकड़ी प्रजातियों के प्रति दिन सबसे कम मल छर्रों का उत्पादन किया। दूसरा सबसे अधिक मल गोली उत्पादन बीच पर देखा गया था, इसके बाद मीठे चेस्टनट और तारपीन। दिन 5 से दिन 7 तक सभी प्रजातियों में मल गोली उत्पादन में वृद्धि हुई थी। दिन 7 और दिन 12 के बीच एक्की के अलावा सभी प्रजातियों में पैलेट उत्पादन में गिरावट आई, संभवतः पानी के परिवर्तनों के बीच बढ़े हुए समय के कारण। इसके बाद, मल गोली उत्पादन लकड़ी की प्रजातियों में से प्रत्येक के बीच काफी सुसंगत रहा। दिन 14 से, स्कॉट्स पाइन दैनिक मल गोली उत्पादन में कमी आई, जबकि बीच में वृद्धि हुई (चित्रा 10)।

Figure 10
चित्रा 10: प्रति दिन मल छर्रों की संख्या (एन = 40) (एसई ± मतलब) एल क्वाड्रिपंक्टाटा द्वारा विभिन्न लकड़ी की प्रजातियों का उपयोग करके उत्पादित, 20 दिनों से अधिक। तारपीन, मीठे चेस्टनट, बीच और एक्की हार्टवुड का परीक्षण किया गया, जिसमें स्कॉट्स पाइन सैपवुड को नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

स्कोर (5) की उच्चतम जीवन शक्ति स्कॉट्स पाइन की लकड़ी पर खिलाने वाले अधिकांश व्यक्तियों में देखी गई थी, जो एक मृत व्यक्ति के अलावा अन्य थी। 5 उन जानवरों को इंगित करता है जो लकड़ी में घुस गए हैं और यह केवल स्कॉट्स पाइन सैपवुड और बीच हार्टवुड पर देखा गया था। स्कॉट्स पाइन के लिए दिन 12 और बीच के लिए दिन 20 तक, सभी जीवित व्यक्तियों ने लकड़ी में प्रवेश किया था। मीठे चेस्टनट में उच्चतम प्रतिशत मृत्यु दर थी, लेकिन समय के साथ इसमें वृद्धि नहीं हुई। जीवित व्यक्तियों के शेष 4 (लकड़ी की सतह पर रेंगने) की जीवन शक्ति पर रहे, दिन 14 के अलावा जहां दो व्यक्ति लकड़ी से दूर थे (3 की जीवन शक्ति)। एक्की और तारपीन में भी प्रयोग की अवधि में 4 की जीवन शक्ति पर अधिकांश व्यक्ति थे, इसके अलावा तारपीन के लिए दिन 14 और दिन 5 में। मृत्यु दर ने लकड़ी की किसी भी प्रजाति में समय के साथ वृद्धि नहीं दिखाई। स्कॉट्स पाइन और बीच पर केवल बिलिंग में वृद्धि देखी गई थी, जबकि अन्य तीन लकड़ी प्रजातियां ज्यादातर 4 की जीवन शक्ति पर बनी हुई थीं (चित्रा 11)।

Figure 11
चित्रा 11: समय के साथ व्यक्तियों की जीवन शक्ति, प्रतिकृति के प्रतिशत के रूप में, विभिन्न लकड़ी की प्रजातियों पर खिलाना।  तारपीन, मीठे चेस्टनट, बीच और एक्की हार्टवुड का परीक्षण किया गया, जिसमें स्कॉट्स पाइन सैपवुड को नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। प्रति लकड़ी की प्रजातियों में आठ प्रतिकृतियों में से, विभिन्न जीवन शक्तियों पर प्रतिशत को 20-दिवसीय प्रयोगात्मक अवधि में प्लॉट किया गया था। गहरा नीला 5 (बिलिंग) की जीवन शक्ति का प्रतिनिधित्व करता है, हल्का नीला 4 (लकड़ी पर) की एक जीवन शक्ति का प्रतिनिधित्व करता है, ग्रे 3 की जीवन शक्ति (लकड़ी से बाहर लेकिन सक्रिय), बैंगनी 2 की जीवन शक्ति (लकड़ी और निष्क्रिय से बाहर) और काला 1 या मृत व्यक्तियों की जीवन शक्ति दिखाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

इस परीक्षण विधि के परिणामों का उपयोग लकड़ी के प्रकारों या उपचारों की पहचान करने के लिए किया जा सकता है जिनमें समुद्री लकड़ी-बोरर क्षति के लिए प्रतिरोध में वृद्धि हुई है। फिर, समुद्री क्षेत्र परीक्षण, जैसा कि यूरोपीय मानक EN 275 में वर्णित है, आयोजित किया जा सकता है और स्थायित्व को गैर-टिकाऊ नियंत्रण लकड़ी की तुलना में (0 = 'कोई हमला नहीं', 1 = 'मामूली हमला', 2 = 'मध्यम हमला', 3 = 'गंभीर हमला', 4 = 'विफलता'20) वर्गीकृत किया जा सकता है।

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Discussion

खिला प्रयोग में उपयोग किए जाने वाले ग्रिबल नमूनों का चयन करने से पहले, व्यक्तियों को उनकी उपयुक्तता का आकलन करने के लिए जांच की जानी चाहिए। आकार में अंतर के कारण व्यक्तियों के बीच खिलाने की दर में कुछ भिन्नता हो सकती है, इसलिए केवल पूरी तरह से विकसित वयस्क नमूनों का चयन किया जाना चाहिए। बोर्गेस एट अल. 200917 द्वारा 1.5 मिमी और 3 मिमी लंबाई के बीच व्यक्तियों की खिला दर के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया था। मादा लिम्नोरिया अपने अंडों को ब्रूड करती है, जिसके दौरान समय में कम खिलाने की दर होती है। इसलिए, नमूनों का चयन करते समय किसी भी ब्रूडिंग मादा की जांच की जानी चाहिए और छोड़ दिया जाना चाहिए। इसी तरह, moulting व्यक्तियों को भी एक कम खिला दर 21 होगा. इसलिए, मल गोली उन दिनों पर गिना जाता है जब व्यक्ति मोल्टिंग कर रहे हैं, उन्हें त्याग दिया जाना चाहिए17। जैसा कि मोल्टिंग एक दिन से अधिक समय तक होती है, मोल्ट्स की गिनती की जाती है जब एक पूर्ण एक्सोस्केलेटन मोल्ट को पैलेट संग्रह के दिनों में देखा जा सकता है। Limnoria, जब उनके burrows बनाने, एक वृद्धि हुई मल गोली उत्पादन है और भी अधिक frass (ठीक लकड़ी अपशिष्ट है कि मल छर्रों में शामिल नहीं है) का उत्पादन होगा. फ्रैस के उच्च स्तर मल छर्रों की पहचान के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं, लेकिन स्वचालित गिनती के लिए छवि पर कब्जा करने से पहले, एक पिपेट या ठीक पेंटब्रश का उपयोग करके स्टीरियोमाइक्रोस्कोप अवलोकन के तहत सावधानीपूर्वक हटाया जा सकता है। वैकल्पिक रूप से, छर्रों को मैन्युअल रूप से गिना जा सकता है।

सॉफ्टवेयर ImageJ छवि प्रसंस्करण के लिए गुणवत्ता, में फोकस छवियों की आवश्यकता है. इस अंत तक, छवियों पर कब्जा कर लिया जाना चाहिए जिसमें मल छर्रों को अच्छी तरह से दीवारों द्वारा बाधित नहीं किया जाता है और व्यक्तिगत मल छर्रों को अलग करने के लिए एक पेंटब्रश का उपयोग किया जाना चाहिए। छवि की पृष्ठभूमि प्रकाश या छाया के किसी भी क्षेत्र के साथ समान होनी चाहिए, जो छवि को इमेजजे में प्रसंस्करण के लिए बाइनरी में परिवर्तित होने पर हस्तक्षेप करेगी। छवि प्रसंस्करण से पहले इसके विपरीत या प्रकाश को समायोजित करने की कोई आवश्यकता नहीं है। छवियों के ढेर को आयात करते समय, सभी तस्वीरों को एक ही विमान में लिया जाना चाहिए ताकि प्रसंस्करण के दौरान कोई त्रुटि न हो।

समुद्री जल के साथ वैक्यूम गर्भवती लकड़ी को डूबने का कारण बनता है और ग्रिबल के लिए आसानी से सुलभ हो जाता है। इसे ग्रिबल्स को उजागर करने से पहले लीचिंग लकड़ी किसी भी पानी में घुलनशील निष्कर्षण को हटा देगी जो उनकी खिला दर को प्रभावित कर सकती है या मृत्यु दर का कारण बन सकती है12। पानी में निष्कर्षण के कारण मृत्यु दर समुद्र में अपेक्षित मृत्यु दर का प्रतिनिधि नहीं है, जहां निष्कर्षण तेजी से पतला हो जाएगा। अच्छी तरह से प्लेटों को एक स्थिर तापमान पर रखा जाना चाहिए जो परीक्षण की जा रही ग्रिबल प्रजातियों के लिए इष्टतम है। आम दक्षिणी ब्रिटिश प्रजातियां, एल। quadripunctata, 15 और 25 डिग्री सेल्सियस के बीच अच्छी तरह से फ़ीड करता है और 20 डिग्री सेल्सियस पर एक इष्टतम खिला दर है, इसलिए अच्छी तरह से प्लेटों को आसानी से एक इनक्यूबेटर में 20 डिग्री सेल्सियस ± 0.5 डिग्री सेल्सियस पर रखा जा सकता है।

खिला gribble की जीवन शक्ति का आकलन sublethal या लकड़ी के उपचार या स्वाभाविक रूप से टिकाऊ लकड़ी के पूर्व घातक प्रभाव का पता लगाता है. 5 की एक उच्च जीवन शक्ति इंगित करती है कि ग्रिबल लकड़ी में घुसकर प्राकृतिक व्यवहार का प्रदर्शन कर रहा है और इसके संपर्क से कोई प्रतिकूल प्रभाव नहीं पड़ता है। 4 की एक जीवन शक्ति से पता चलता है कि लकड़ी में burrowed नहीं होने के दौरान, gribble अभी भी अपनी सतह के साथ क्रॉल करने के लिए आरामदायक है। 3 का स्कोर ग्रिबल को दिया जाता है जो लकड़ी पर नहीं होते हैं, बल्कि इसके बजाय सक्रिय रूप से पानी में तैरते हैं या स्थिर होते हैं, लेकिन तेजी से धड़कते पैरों और प्लियोपोड्स के साथ। 2 की कम जीवन शक्ति का मतलब है कि ग्रिबल उजागर होता है और / या इसमें बहुत कम ऊर्जा होती है। यह कम खिला दर की एक लंबी अवधि से या extractives या तो पानी में leaching या खिलाने के दौरान सुलभ हो रही से के बारे में आ सकता है. यदि 7-8 सप्ताह के बाद उच्च मृत्यु दर देखी जाती है, तो यह भुखमरी के कारण हो सकता है, क्योंकि भूखे घ्रिब्ल्स (केवल 5 मिलीलीटर समुद्री जल और कोई लकड़ी के साथ कुओं में रखे गए) इस लंबे समय तक जीवित रह सकते हैं (व्यक्तिगत अवलोकन)।

लंबी अवधि के समुद्री क्षेत्र परीक्षणों के विपरीत अल्पकालिक प्रयोगशाला परख का उपयोग करने के लाभ, यह है कि उपन्यास उपचार और लकड़ी के उत्पादों को व्यावसायिक रूप से उपयोग करने की उनकी क्षमता की पहचान करने के लिए तेजी से परीक्षण किया जा सकता है। इसके अलावा, इस तरह के assays उपचार प्रक्रियाओं के तेजी से अनुकूलन की सुविधा प्रदान कर सकते हैं। यदि नियंत्रण लकड़ी की तुलना में काफी कम मल गोली उत्पादन देखा जाता है, तो परीक्षण को समुद्री परीक्षणों द्वारा पूरक किया जा सकता है। Slevin et al., 201523 और Westin et al., 201624 दो अलग-अलग सेटिंग्स में एक ही लकड़ी का परीक्षण करने के माध्यम से प्रयोगशाला और क्षेत्र के आकलन के बीच एक अच्छा सहसंबंध प्रदर्शित करता है, जो पूर्व की एक सक्षम भविष्यवाणी क्षमता का संकेत देता है। एक अल्पकालिक परख कई हफ्तों के लिए चलाया जा सकता है. भूखे ग्रिबल्स 7-8 सप्ताह तक जीवित रह सकते हैं जब लकड़ी (व्यक्तिगत अवलोकन) के बिना अच्छी तरह से वातित पानी में रखा जाता है जो विभिन्न प्रकार के जंगलों के लिए मृत्यु दर की प्रतिक्रिया की जांच करते समय अतिरिक्त तुलना प्रदान कर सकता है। हालांकि, हाल ही में, अप्रकाशित टिप्पणियों के माध्यम से, 20 दिनों से अधिक समय की अवधि में मल गोली उत्पादन में कोई महत्वपूर्ण उतार-चढ़ाव नहीं होता है, इसके अलावा जब मृत्यु दर शुरू होती है। इसके अलावा, पिछले तरीके, जैसे कि बोर्गेस एट अल द्वारा उपयोग किए जाने वाले, 2008 और 2009, 15 दिनों तक चलते हैं। इसलिए, लकड़ी के स्थायित्व का संकेत प्रदान करने के लिए एक तेजी से प्रयोगशाला-आधारित परीक्षण के लिए 20 दिन पर्याप्त समय है।

हालांकि यह विधि अल्पकालिक परीक्षणों के लिए उपयुक्त है, निष्कर्षों को दीर्घकालिक समुद्री क्षेत्र प्रयोगों द्वारा पूरक किया जाना चाहिए। प्रयोगशाला की स्थिति जैविक और अजैविक कारकों की विविधता को दोहरा नहीं सकती है जो समुद्री वातावरण में लकड़ी को प्रभावित कर सकती हैं। समुद्री लकड़ी-बोरर्स (जैसे शिपवर्म्स) की अन्य प्रजातियों के साथ बायोफाउलिंग जीव अभी भी मौजूद हो सकते हैं और लकड़ी को नुकसान पहुंचा सकते हैं25,26। इसके अलावा, लहर-फेंके गए शिंगल या रेत से घर्षण लकड़ी को नीचे पहन सकता है, जो तब gribbles27 के लिए सुलभ हो सकता है। हालांकि, एक मानक प्रयोगशाला विधि नए उत्पादों की प्रारंभिक स्क्रीनिंग प्रदान कर सकती है जो समुद्री अनुप्रयोगों के लिए वादा दिखाती है। मल गोली उत्पादन और जीवन शक्ति का आकलन करके, जंगल है कि gribble खिला दर को कम करने में बेहतर कर रहे हैं की पहचान की जा सकती है.

सीसीए और क्रेओसोट जैसे लकड़ी के परिरक्षकों के नियमों और प्रतिबंधों के कारण, इन उपचारों को बदलने के लिए उपन्यास उत्पादों को ढूंढना महत्वपूर्ण है। लकड़ी समुद्री वातावरण में बायोडिग्रेडेशन के उच्च स्तर के अधीन है, लेकिन अभी भी उपलब्ध सबसे नवीकरणीय निर्माण सामग्रियों में से एक है और समुद्री जल में अपनी ताकत और संरचना को अच्छी तरह से बरकरार रखती है27,28। न केवल लकड़ी जो बायोडिग्रेडेशन के लिए प्रतिरोधी है, लागत को कम करेगी, बल्कि कंक्रीट या स्टील जैसी वैकल्पिक सामग्रियों का उपयोग करने की तुलना में अधिक पर्यावरण के अनुकूल होगी, जिसे निर्माण के दौरान उच्च ऊर्जा इनपुट की आवश्यकता होती है29,30, या व्यापक स्पेक्ट्रम बायोसाइड परिरक्षक जो आसपास के पारिस्थितिकी तंत्र को बाहर निकाल सकते हैं और प्रभावित कर सकते हैं31,32,33,34,35,36, ३७ ।

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Disclosures

लेखकों के पास इस अध्ययन से संबंधित हितों का कोई संघर्ष नहीं है।

Acknowledgments

आप नॉर्वे के अनुसंधान परिषद (ओस्लो क्षेत्रीय कोष, Alcofur rffofjor 269707) और पोर्ट्समाउथ विश्वविद्यालय (विज्ञान पीएचडी अनुसंधान bursary के संकाय) लुसी मार्टिन के अध्ययन के लिए धन प्रदान करने के लिए धन्यवाद. इसके अलावा, Gervais एस Sawyer जो लकड़ी प्रदान करने के लिए प्रतिनिधि परिणाम उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया. तारपीन ब्रिटिश कोलंबिया विश्वविद्यालय के प्रोफेसर फिलिप इवांस द्वारा प्रदान किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
12-well cell culture plates ThermoFisher Scientific 150200
50ml Falcon tubes Fisher Scientific 14-432-22
Adjustable volume pipette Fisher Scientific FBE10000 1-10 ml
Beech G. Sawyer (consultant in timber technology) Fagus sylvatica Taxonomic authority: L
Ekki G. Sawyer (consultant in timber technology) Lophira alata Taxonomic authority: Banks ex C. F. Gaertn.
Forceps Fisher Scientific 10098140
Incubator LMS LTD INC5009
Microporous specimen capsules Electron Microscopy Sciences 70187-20
Petri dish Fisher Scientific FB0875713
Scots Pine G. Sawyer (consultant in timber technology) Pinus sylvestris Taxonomic authority: L.
Size 00000 paintbrush Hobby Craft 5674331001 Size 000 or 0000 also acceptable
Sweet Chestnut G. Sawyer (consultant in timber technology) Castanea sativa Taxonomic authority: Mill
Turpentine P. Evans (Professor, Dept. Wood Science, University of British Columbia) Syncarpia glomulifera Taxonomic authority: (Sm.) Nied.
Vacuum desiccator Fisher Scientific 15544635

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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पर्यावरण विज्ञान अंक 179 Limnoria gribble मल छर्रों खिला दर लकड़ी संरक्षण EN275 समुद्री बायोडिग्रेडेशन
समुद्री लकड़ी-उबाऊ क्रस्टेशियन द्वारा बायोडिग्रेडेशन के लिए लकड़ी के प्रतिरोध का तेजी से परीक्षण
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Martin, L. S., Shipway, J. R., Martin, M. A., Malyon, G. P., Akter, M., Cragg, S. M. Rapid Testing of Resistance of Timber to Biodegradation by Marine Wood-Boring Crustaceans. J. Vis. Exp. (179), e62776, doi:10.3791/62776 (2022).

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