بوغ زقي zeae Gibberella الإنتاج والتحصيل للتجارب ميكروأري.
Summary
لدراسة العمليات التنموية في ascospores zeae Gibberella ، وهو إجراء لجمع تحت ظروف معقمة تم تصويره من أجل توليد أكبر قدر من المعلومات لوصف البروتوكول. هذا يجب تسهيل استنساخ التجربة ، جانبا حاسما عندما تنفذ بالكامل الاختبارات الشخصية الجينوم التعبير.
Abstract
فيوزاريوم graminearum شواب (teleomorph Gibberella zeae) هو الممرض مصنع يسبب مرض الجرب على القمح والشعير الذي يقلل من المحصول وجودة الحبوب. F. graminearum يتسبب أيضا في ساق والأذن وتتعفن من الذرة هو منتج للسموم الفطرية مثل trichothecenes التي تلوث الحبوب ومضرة للانسان والماشية (جوسوامي وكيستلر ، 2004). الفطريات تنتج نوعين من الجراثيم. Ascospores ، وبطرق الزراعه الناتجة عن التكاثر الجنسي ، هي المصدر الرئيسي لنقل العدوى الأولية. يتم تفريغها قسرا من هذه الجراثيم perithecia ناضجة ومشتتة بفعل الرياح (Francl وآخرون 1999). هي سبب رئيسي العدوى الثانوية macroconidia التي تنتجها وسائل اجنسي على سطح المصنع. لدراسة العمليات التنموية للascospores في هذا الفطر ، وكان المطلوب إجراء لجمع كمية كبيرة في ظل ظروف معقمة. لدينا بروتوكول تم تصويره من أجل توليد أكبر قدر من المعلومات لفهم واستنساخ ، والجوانب الحاسمة عندما يتم إنشاؤها بالكامل ملامح التعبير الجيني الجينوم وتفسيرها. على وجه الخصوص ، تقلب بوغ زقي الإنبات والنشاط البيولوجي تعتمد على التلاعب مسبقة من المواد. ويقترح استخدام الفيديو لتوثيق كل خطوة من خطوات الإنتاج بوغ زقي من أجل زيادة التوحيد القياسي ، والامتثال للمتطلبات الصارمة المتزايدة للتحليل [ميكروأري. الإجراء يتطلب معدات المختبرات فقط القياسية. تظهر الخطوات اللازمة لمنع التلوث وصالح تزامن وقت ascospores.
Protocol
Discussion
ويستند البروتوكول المقدمة هنا على الإجراءات السابقة المستخدمة لإنتاج perithecial لSPP الفيوزاريوم. (Klittich ويزلي ، 1988 ؛ تريل والمشتركة عام 2000 ،). وتوحيد الإجراءات التي تم إنشاؤها على كميات كبيرة من ascospores (تكفي لتحليل ميكروأري) ضروري لاستنساخ التجربة. وقد أفيد أن العوامل البيئية ، والعمر?…
Acknowledgements
المؤلفان بالشكر كارين Hilburn حصول على الدعم الفني الممتاز. وقد أيد هذا المشروع من قبل مبادرة القومي للبحوث التعاونية للدولة وزارة الزراعة الأميركية للتعليم والبحوث والإرشاد (جائزة 2004-35604-14327 #). معتمد من قبل ماتياس باسكوالي برانكو فايس الزمالة. ومن المسلم به أيضا الولايات المتحدة والقمح والشعير والجلبة مبادرة للدعم المتواصل من البحوث.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Petri dish 9 cm Diameter | Tool | |||
| Tween 60 (20%) | Reagent | |||
| Carrot agar (20% w/v organic carrots and 1.5% w/v agar) | Reagent |
References
- Beyer, M., Verreet, J. A., Francl, L., Shaner, G., Bergstrom, G., Gilbert, J., Pedersen, W., Dill-Macky, R., Sweets, L., Corwin, B., Jin, Y., Gallenberg, D., Wiersma, J., Goswami, R. S., Kistler, H. C., Klittich, C. J. R., Leslie, J. F., Trail, F., Common, R., Tschantz, A. T., Horst, R. L., Nelson, P. E., Tschanz, A. T., Horst, R. K., Nelson, P. E. Germination of Gibberella zeae ascospores as affected by age of spores after discharge and environmental factors. 遗传学. 118, 417-2013 (2005).
