وصفنا تشريح غرامة الجهاز العصبي فموي معدي من المعدة من جراد البحر الأميركية (<i> Homarus americanus</i>).
بهدف فهم الكيفية التي تنتج نظم النشاط العصبي والاستجابة للبيئة وعلماء الأعصاب إلى أنظمة تشغيل النموذج الذي يحمل نشاط الفائدة ويسهل الوصول إليها وقابلة للطرق تجريبية. فموي معدي النظام العصبي (STNS) من اللوبستر الاميركية (<i> Homarus americanus</iوقد أنشئت أيضا كان يعرف جراد البحر أو المحيط الأطلسي ولاية ماين) ، ونظام نموذجي لدراسة الإيقاع توليد شبكات وتعديل العمليات العصبية الشبكات ؛>. ويتكون من 3 STNS العقد الأمامي (2 العقد صواري والمريء العقدة) ، التي تحتوي على الخلايا العصبية modulatory هذا المشروع مركزيا إلى العقدة فموي معدي (STG). ويحتوي على ما يقرب من 30 STG الخلايا العصبية التي تضم شبكتين نمط توليد المركزية ، وشبكات البواب في المعدة والتي تكمن وراء سلوكيات التغذية في القشريات<sup> 1،2</sup>. في حين أنه من الممكن دراسة هذا النظام<i> في الجسم الحي</i<sup> 3</sup> ويستمر لإنتاج STNS نشاطها الإيقاعي عندما معزولة<i> في المختبر</i>. العزلة المادية للSTNS في صحن يسمح لسهولة الوصول إلى somata في العقد التسجيلات الكهربية بين الخلايا والأعصاب من STNS للتسجيلات خارج الخلية. عزل STNS عملية جزئين. الموصوفة في الجزء الأول ، تشريح المعدة من الحيوانات ، في مقال الفيديو المصاحبة<sup> 4</sup>. في هذه المقالة الفيديو ، وتستخدم تقنيات تشريح غرامة لعزل STNS من المعدة. نتائج هذا الإجراء في إعداد الجهاز العصبي ما هو متاح للتسجيلات الكهربية.
وقد تم تشريح المعدة وسرطان البحر وصفا جيدا STNS 5،6 سابقا ، واستخدمت أشكال مختلفة من هذا الإجراء في تشريح العديد من الدراسات. نوصي تصبح مألوفة مع تشريح المعدة 5-7 و 5،8 STNS قبل بداية التشريح. ومثل هذه الألفة تقلل من خطر حدوث التلف العرضي إلى الأعصاب والأنسجة.
للحفاظ على صحة الإعداد ، فمن الأهمية بمكان للحفاظ على التحضير في درجة حرارة معتدلة. ويتم تحقيق ذلك بسهولة من خلال تبادل والمالحة كل 30 دقيقة مع 4 ˚ C المالحة يحتفظ بها في الثلاجة. عندما يغوص في المياه المالحة الباردة ، وإعداد STNS معزولة هي قابلة للتطبيق لعدة ساعات. وقد أظهرت التسجيلات في gammarus Homarus النشاط الإيقاعي مستقرة ذات الصلة من STG طوال 5 أيام في المختبر 9 ؛ فقد رأينا قوة مماثلة في H. americanus (pers. OBS).
مطلوب مدخلات Modulatory إلى STG من العقد صواري للحفاظ على أنماط السيارات الجارية. لذلك ، للحفاظ على النشاط العادي الايقاعي هذه العقد وايون ابنه ، ويجب أن تبقى الأعصاب STN سليمة. تشريح وصفنا يحفظ العديد من الأعصاب الحركية (التي تحتوي على محاور العصبون الحركي) : ليالي AGN (التي تحتوي على مطحنة المعدة (GM) المحاوير) ، ليالي mvn (التي تحتوي على المعدة الجانبي (LG) وأدنى المحاوير القلب (IC)) ، ليالي PYN (التي تحتوي على الخلايا العصبية البواب (PY) المحاوير) ، ليالي PDN (التي تحتوي على الموسع البواب (PD) المحاور) ، وق lvn (التي تحتوي على البواب الجانبي (LP) ، المعدة الإنسي (MG) ، المحاوير غاز البترول المسال وكذلك من جنرال موتورز ، PD وPY). بواسطة تشريح إضافية (أو مختلفة) الأعصاب ، قد يتم تسجيل السيارات الأخرى المحاور العصبية. قد يتم تسجيل كل نوع بعينه من العصبون الحركي محوار بشكل فردي عن طريق تشريح وتسجيل من العصبية التعصيب العضلات التي هذا النوع من المشاريع الخلايا العصبية.
ويمكن استخدام هذا المستحضر لمجموعة متنوعة من الدراسات التي تركز على وظيفة الجهاز العصبي. قد يتم تسجيل نشاط الخلايا العصبية إما باستخدام الخلايا ، والتسجيلات القطب حادة من somata أو المحاور العصبية ، أو عن طريق تسجيل النبضات الكهربائية خارج الخلية من الأعصاب. وقد تم العديد من القنوات الأيونية في الخلايا العصبية STG مستنسخ جزئيا ويمكن قياس مرنا من somata سحبت 10،11 يدويا.
نود أن نعترف مستشار لدينا ، والدكتور حواء ماردر. وأيد هذا البحث من قبل المعهد الوطني للصحة منح NS17813 ماردر لحواء وNS059255 إلى T. AE
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Tool | California Fine Wire | Cut into 1-2mm pieces to use as fine pins. | |
Forceps #5 | Tool | FST | 91150-20 | |
Minuten Pins | Tool | FST | 26002-10 | |
Moria Spring Scissors (7mm blades) | Tool | FST | 15370-52 | These are the top of the line. There are more economical spring scissors available from the same company. |
Petri Dish (100x15mm) | Tool | Fischer | 08-757-12 | Fill 2-4mm with Sylgard 182. |
Sylgard 182 | 其他 | Dow Corning | 182 | |
Pin Holder | Tool | FST | 26018-17 | Optional. Desheathing can be done with scissors and fine forceps alone. |
Super fine forceps #5SF | Tool | FST | 11252-00 | |
Tungsten Needles | Tool | FST | 10130-05 | Optional. Desheathing can be done with scissors or with pins cut from fine tungsten wire. |
Dissection microscope |