우리는 미국의 바닷가재의 뱃속에서 stomatogastric 신경계의 미세 절개를 설명 (<i> Homarus americanus</i>).
시스템 활동을 생산 환경에 대응 얼마나 긴장 이해의 목적으로, neuroscientists 관심의 활동을 전시하고 접근 및 실험 방법 의무 아르 모델 시스템 설정. 미국의 바닷가재의 stomatogastric 신경계 (STNS) (<i> Homarus americanus</i>;) 대서양 또는 메인 가재되었습니다도 알고는 네트워크와 네트워크의 neuromodulation을 생성 리듬을 공부를위한 모델 시스템으로 설립되었습니다. STNS은 stomatogastric 신경절 (STG)를 중심 프로젝트 것을 modulatory의 뉴런을 포함하는 3 앞쪽에 신경 (2 commissural 신경 및 신경절 oesophageal)로 구성되어 있습니다. STG는 두 중앙 패턴 생성 네트워크를 구성하는 약 30 뉴런, 갑각류의 먹이 동작을 기초 pyloric과 위장 네트워크를 포함<sup> 1,2</sup>. 그것은이 시스템을 연구 할 수있는 동안<i> 생체내에</i<sup> 3</sup> STNS가 고립되면 그 리듬 활동을 생산하기 위해 계속<i> 체외에서</i>. 접시에 STNS의 물리적 격리는 세포내 electrophysiological 레코딩에 대한 신경의 somata와 세포외 레코딩을위한 STNS의 신경에 쉽게 액세스할 수 있습니다. STNS를 분리하면 두 부분으로 이루어집니다. 동물의 배를 해부 첫 번째 부분은, 수반되는 비디오 문서에 설명되어있는<sup> 4</sup>. 이 동영상이 문서에서는 미세 절개 기법은 위장에서 STNS을 분리하는 데 사용됩니다. 이 절차는 electrophysiological 레코딩에 사용할 수있는 신경계 준비 결과.
랍스터 위장과 STNS의 해부학은 물론 이전에 5,6 설명하고 있으며,이 해부 절차의 변화는 수많은 연구에서 널리 사용되었습니다. 우리는 이전부터 해부하는 5-7과 STNS 5,8 위의 해부에 익숙한되고 좋습니다. 이러한 친숙는 신경 조직에 손상 사고의 위험을 감소합니다.
준비의 건강을 유지하기 위해서는 시원한 온도에서 준비를 유지하기 위해 중요합니다. 이것은 쉽게 호수에게 ˚ C 생리가 냉장고에 보관 4 매 30 분를 교환하여 이루어진다. 차가운 호수에 열중하면, 절연 STNS 준비는 많은 시간 동안 가능한 것입니다. 관련 Homarus의 gammarus의 레코딩은 체외 9 오일 내내 STG에서 안정적인 리듬 활동을 보여준, 유사한 견고은 H.에서 볼되었습니다 americanus (obs pers..).
commissural 신경에서 STG에 Modulatory 입력은 지속 모터 패턴을 유지하기 위해 필요합니다. 따라서, 정상적인 리듬 활동이 신경 및 이온, 아들을 유지하고, 역의 신경은 그대로 보관해야합니다. (위의 밀 (GM) axons를 포함), mvn S (래터럴 위장 (LG)와 인퍼리어 심장 (IC) axons를 포함), pyn S agn S : 우리가 설명 해부 여러 모터 신경을 (모터 신경 세포 axons를 포함)의 보존 (Pyloric 신경 세포 (PY) axons를 포함), pdn S 및 lvn S (래터럴 Pyloric (LP), 중간 위장 (MG), LPG의 axons뿐만 아니라 GM의 사람들을 포함하는 (Pyloric 확장시키는 (PD) axons를 포함) PD와 PY). 추가 (또는 다른) 신경을 해부함으로써, 다른 모터 신경의 axons가 기록될 수 있습니다. 모터 신경 축삭의 각 유형은 해부 및 신경에서 녹화하는하는 근육 innervating에 의해 개별적으로 기록될 수 있습니다 뉴런 프로젝트의 유형입니다.
이 준비는 신경계의 기능에 초점을 맞춘 연구의 다양한 사용할 수 있습니다. 뉴런의 활동은 somata 또는 axons에서 세포, 날카로운 전극 기록을 사용하여, 또는 신경의 전기 자극 extracellularly 녹음을 통해 기록됩니다. STG 뉴런에 많은 이온 채널은 부분적으로 복제된하고 mRNA는 수동으로 뽑아 somata 10,11에서 측정할 수 있습니다.
우리는 고문, 박사 이브 Marder을 인정하고 싶습니다. 이 연구는 AE T.에 이브 Marder와 NS059255에 건강 보조금 NS17813 국립 연구소에 의해 지원되었다
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Tool | California Fine Wire | Cut into 1-2mm pieces to use as fine pins. | |
Forceps #5 | Tool | FST | 91150-20 | |
Minuten Pins | Tool | FST | 26002-10 | |
Moria Spring Scissors (7mm blades) | Tool | FST | 15370-52 | These are the top of the line. There are more economical spring scissors available from the same company. |
Petri Dish (100x15mm) | Tool | Fischer | 08-757-12 | Fill 2-4mm with Sylgard 182. |
Sylgard 182 | 其他 | Dow Corning | 182 | |
Pin Holder | Tool | FST | 26018-17 | Optional. Desheathing can be done with scissors and fine forceps alone. |
Super fine forceps #5SF | Tool | FST | 11252-00 | |
Tungsten Needles | Tool | FST | 10130-05 | Optional. Desheathing can be done with scissors or with pins cut from fine tungsten wire. |
Dissection microscope |