마우스 콘 Photoreceptors에서 단일 셀 석션 레코딩
Summary
우리는 흡입 전극을 사용하여 단일 마우스 콘에서 플래시 응답을 기록하는 방법을 보여줍니다.
Abstract
망막에있는 막대와 원뿔 photoreceptors 빛을 감지 책임이 있습니다. 어둠에서 바깥쪽 구간에 주기적 염기 – 게이 티드 (CNG) 채널 오픈하고 양이온이 세포 depolarizing, 멤브레인 안쪽에 걸쳐 꾸준히 흐름을 수 있습니다. 라이트 노출은 CNG 채널, 블록 안쪽 양이온 전류 흐름, 따라서 세포 hyperpolarization 결과의 폐쇄를 실행시킵니다. photoreceptors의 극성에 따라 흡입 녹음 방법은 고전적인 패치 – 클램프 기법과는 달리, 플라즈마 막을 관통 필요하지 않습니다, 1970 년대에 개발되었습니다<sup> 1</sup>. 세포외 솔루션으로 가득한 단단히 맞는 유리 피펫에 외부 세그먼트를 그리기 테스트 – 플래시 노출에 따라 각각의 세포에서 현재 변경 내용을 녹음하실 수 있습니다. 그러나,이 잘 구축 "객관적인 세그먼트 인 (OS 인)"흡입 녹음 때문에 마우스 망막의 원뿔의 낮은 비율 (3 %)과 원추형을 식별의 어려움, 마우스 콘 레코딩에 적합하지 않습니다 외부 세그먼트. 최근 내부 세그먼트 기능 (IS -)를 녹화 설정은 녹화 피펫으로 내부 세그먼트 / photoreceptor의 핵 영역을 그리기 위해 개발된<sup> 2,3</sup>. 이 비디오에서는, 우리는 단일 셀 흡입 전극을 사용하여 개별 마우스 콘 photoresponses에서 기록하는 방법을 보여줍니다.
Protocol
Discussion
photoreceptor 세포에서 단일 세포 흡입 기록은 3 년 전 개발되었습니다. 이것은 세포막을 관통하지 않고 빛의 자극에 의해 유도된 횡단 막 전류 변화를 기록하는 데 있습니다. 때문에 높은 세포 – 세포 부착, 이건 수륙 양용 망막과 같은 마우스 망막에서 건강한 하나의 막대와 원뿔을 분리하기 어려운이며 그것은 낮은 비율 (3 %)과 작은 크기로 인해 각각의 원뿔을 찾을 수 어렵습니다. 내부 세그먼…
Acknowledgements
실명과 어이 02687을 (워싱턴 대학에서 안과 & 비주얼 과학 계열) 방지하기 위해 연구에서 실명, NIH 그랜트 어이 019,312, 그리고 무제한 부여를 방지하기 위해 연구에서 경력 개발 상을 지원.
References
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