Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: Een methode om levende cellen te isoleren
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Duitsland, E.M., et al. Isolatie van specifieke neuronpopulaties van rondworm Caenorhabditis elegans. J.Vis. Exp. (2019).
Deze video beschrijft een methode om hele wormen te dissocieren in een eencellige suspensie die geschikt is voor FACS of immunoprecipitatie van intacte cellen.
Protocol
Dit protocol is een uittreksel uit Duitsland et al, Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Bereiding en verzameling van oude wormen voor celisolatie OPMERKING: Hieronder wordt de isolatie van cholinerge neuronen van d…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Cite This Article
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).