Disociación de células individuales de Caenorhabditis elegans: Un método para aislar las células vivas
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Alemania, E.M., et al. Aislamiento de poblaciones específicas de neuronas de La Lombriz Redonda Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2019).
Este video describe un método para disociar gusanos enteros en una suspensión de una sola célula adecuada para FACS o inmunoprecipitación de células intactas.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Alemania et al, Aislamiento de poblaciones específicas de neuronas de Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Preparación y recolección de gusanos envejecidos para el aislamiento celular NOTA: A continuación se explica el aisla…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Cite This Article
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).