Intrathoracale injectie: samengestelde levering aan het volwassen zebravishart

Abstract

Bron: Bise, T., et al. Intrathoracale injectie voor de studie van volwassen zebravis hart. J.Vis. Exp. (2019).

Deze video beschrijft de techniek van het leveren van verbindingen in het hart van volwassen zebravissen met behulp van intrathoracale injectie.

Protocol

1. Bereiding van de vis voor intrathoracale injectie Vang een volwassen zebravis (Danio rerio) met een net en breng deze over in de verdovingsoplossing. Na 1−2 min, wanneer vissen stoppen met zwemmen en de beweging van operculum wordt verminderd, raak de vis aan met een plastic lepel om ervoor te zorgen dat deze niet reageert op contact. Breng de vis snel en voorzichtig met de lepel over in de groef van de natte spons, met de ventrale kant naar boven. Het hoofd van de vis moet weg…

Representative Results

Figuur 1: Intrathoracale (IT) injectie bij volwassen zebravissen. (A) Foto van een getrokken micro-injection capillair met filament (6″, 1,0 mm in diameter) en waarden van het gebruikte naaldtrekkerprogramma. (B) Foto van een getrokken micro-injection capillair met filament (6″, 1,0 mm in diameter) gevuld met 2,5 μL oplossing met 10% fenolrood. De getrokken punt van de naald is maximaal 7 mm lang. (C) Schematische weerga…

Materials

Macroscope (binocular)	M400		with Apozoom
Micro-injector femtojet	Eppendorf	5247 0034 77
Microloaders femtotips	Eppendorf	5242 956.003
Micropipette glass needles type C	WPI	TW100F-6	thin-wall capillary
Micropipette puller model P-87	Flaming/Brown	20081016	filament box 2.5 mm x 4.5 mm
Sponge	any	any	dim. carved sponge 7cm x 3 cm x 1 cm
Tricaine (Anestethic)	Sigma	E10521