Intrathorakale Injektion: Zusammengesetzte Lieferung an das erwachsene Zebrafischherz

Abstract

Quelle: Bise, T., et al. Intrathorakale Injektion für die Studie von erwachsenen Zebrafisch Herz. J. Vis. (2019).

Dieses Video beschreibt die Technik der Lieferung von Verbindungen in das Herz von erwachsenen Zebrafischen durch intrathorakale Injektion.

Protocol

1. Zubereitung des Fisches zur intrathorakalen Injektion Fangen Sie einen erwachsenen Zebrafisch (Danio rerio) mit einem Netz und übertragen Sie ihn in die Anästhetikumlösung. Nach 1 bis 2 min, wenn der Fisch aufhört zu schwimmen und die Bewegung von Operculum reduziert wird, berühren Sie den Fisch mit einem Plastiklöffel, um sicherzustellen, dass er nicht auf irgendeinen Kontakt reagiert. Den Fisch mit dem Löffel schnell und vorsichtig in die Nut des nassen Schwamms geben, m…

Representative Results

Abbildung 1: Intrathorakale (IT) Injektion bei erwachsenen Zebrafischen. (A) Foto einer gezogenen Mikroinjektionskapillare mit Filament (6″, 1,0 mm Durchmesser) und Werten des verwendeten Nadelzieherprogramms. (B) Foto einer gezogenen Mikroinjektionskapillare mit Filament (6″, 1,0 mm Durchmesser), gefüllt mit einer Lösung von 2,5 l, die 10 % Phenolrot enthält. Die gezogene Spitze der Nadel ist maximal 7 mm lang. (C) Sc…

Materials

Macroscope (binocular)	M400		with Apozoom
Micro-injector femtojet	Eppendorf	5247 0034 77
Microloaders femtotips	Eppendorf	5242 956.003
Micropipette glass needles type C	WPI	TW100F-6	thin-wall capillary
Micropipette puller model P-87	Flaming/Brown	20081016	filament box 2.5 mm x 4.5 mm
Sponge	any	any	dim. carved sponge 7cm x 3 cm x 1 cm
Tricaine (Anestethic)	Sigma	E10521