Iniezione intratoracica: consegna composta al cuore di zebrafish adulto

Abstract

Fonte: Bise, T., et al. Iniezione intratoracica per lo studio del cuore di zebrafish adulto. J. Vis. Exp. (2019).

Questo video descrive la tecnica di fornire composti nel cuore del pesce zebra adulto utilizzando l’iniezione intratoracica.

Protocol

1. Preparazione del pesce per iniezione intratoracica Prendi un pesce zebra adulto(Danio rerio)con una rete e trasferiscilo nella soluzione anestetica. Dopo 1−2 minuti, quando il pesce smette di nuotare e il movimento dell’opercolo è ridotto, toccare il pesce con un cucchiaio di plastica per assicurarsi che non reagisca ad alcun contatto. Trasferire rapidamente e accuratamente il pesce con il cucchiaio nella scanalatura della spugna bagnata, con lato ventrale verso l’alto. La tes…

Representative Results

Figura 1: Iniezione intratoracica (IT) nel pesce zebra adulto. (A) Fotografia di un capillare di microiniezione tirato con filamento (6″, 1,0 mm di diametro) e valori del programma di trazione dell’ago utilizzato. (B) Fotografia di un capillare di microiniezione tirato con filamento (6″, 1,0 mm di diametro) riempito con 2,5 μL di soluzione contenente il 10% di rosso fenolo. La punta tirata dell’ago è lunga al massimo 7 …

Materials

Macroscope (binocular)	M400		with Apozoom
Micro-injector femtojet	Eppendorf	5247 0034 77
Microloaders femtotips	Eppendorf	5242 956.003
Micropipette glass needles type C	WPI	TW100F-6	thin-wall capillary
Micropipette puller model P-87	Flaming/Brown	20081016	filament box 2.5 mm x 4.5 mm
Sponge	any	any	dim. carved sponge 7cm x 3 cm x 1 cm
Tricaine (Anestethic)	Sigma	E10521