냉동 건조 된 감자 괴경 샘플의 신속한 높은 처리량 아밀로스 결정
Summary
이 프로토콜은 요오드와 녹말 포도당 분자 사슬 사이의 복잡한의 형성에 의존 넣어 비색법을 통해 고 설명합니다. 요오드는 아밀로스와 아밀로펙틴 내 긴 사슬 모두와 복합체를 형성한다. 전분 시료에 요오드를 첨가 한 후, 아밀로오스와 아밀로펙틴의 최대 흡수는 각각 620 및 550 nm에서 발생한다. 아밀로스 / 아밀로펙틴의 비율은 620 및 550 nm의 흡광도 값의 비율을 추정하고 특정한 알려진 농도는 흡수 값에 대해 도시 된 표준 곡선에 비교를 할 수있다. 이것은 높은 처리량은, 저렴 방법은 감자 클론의 많은 개체군의 평가를 허용 신뢰성과 재현성이다.
Abstract
이 프로토콜은 요오드와 녹말 포도당 분자 사슬 사이의 복잡한의 형성에 의존 넣어 비색법을 통해 고 설명합니다. 요오드는 아밀로스와 아밀로펙틴 내 긴 사슬 모두와 복합체를 형성한다. 전분 시료에 요오드를 첨가 한 후, 아밀로오스와 아밀로펙틴의 최대 흡수는 각각 620 및 550 nm에서 발생한다. 아밀로스 / 아밀로펙틴의 비율은 620 및 550 nm의 흡광도 값의 비율을 추정하고 특정한 알려진 농도는 흡수 값에 대해 도시 된 표준 곡선에 비교를 할 수있다. 이것은 높은 처리량은, 저렴 방법은 감자 클론의 많은 개체군의 평가를 허용 신뢰성과 재현성이다.
Introduction
감자 괴경의 신선한 무게의 약 80 %가 물이며, 거의 모든 남아있는 건조 물질의 전분 1입니다. 나머지 동안 아밀로스 전분 (70 %)의 대부분은, 아밀로펙틴으로 구성된다. 아밀로스와 아밀로펙틴의 비율은 전분의 물성을 좌우하는 가장 중요한 속성이다. 아밀로펙틴 알파 1-6 분기 2 선형 알파 1-4 체인 동안 아밀로스는 선형 알파 1-4 포도당 체인입니다. 요오드 등의 방법 바인딩, 시차 주사 열량계 (DSC)는, 고성능 크기 배제 크로마토 그래피 (HPSEC) 및 콘 카나 발린의 상호 작용은 다양한 작물 3,4 전분 판별을 위해 개발되었다. 각 프로토콜은 어려운 한 번에 다수의 샘플을 계량하는 확장 할 만드는 특별한 기술과 장비가 필요합니다. 우리가 여기서 제시하는 방법은 바인딩 듀얼 파장 요오드 Hovenkamp-Hermelink 등. 5에서 수정 된 프로토콜입니다스테인드 전분 과립에 따라 방법. 다른 대이 방법의 장점은 정제하지 않고 원료 전분 아밀로스 판별 및 메서드 4,6의 정밀도를 높이기 위해 이중 파장 시스템의 사용을 포함한다.
Protocol
Representative Results
Discussion
감자 괴경의 아밀로스 함량은 일반적으로 20 ~ 35 % 7,8 범위. 가장 값이 범위를 벗어나는 경우, 이러한 오류 가능성 고려 : 1) 원시 데이터가 아밀로오스 / 아밀로펙틴 표준 곡선의 건설 대신 숨겨진 데이터를 사용했다가, 2) 원시 데이터는 아밀로오스의 결정 대신에 숨겨진 데이터를 사용 하였다 / 아밀로펙틴 감자 샘플에서 비율, 또는 3) 해석에 사용하는 물이 충분히 순수하지 않았다. 우리?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구를위한 자금 조달은 USDA-ARS 연구원 프로그램 및 USDA 작물 유전자 원위원회에 의해 부분적으로 제공되었습니다.
Materials
| Reagents | |||
| Amylose | Sigma | 859656 | |
| Amylopectin | Sigma | A8515 | |
| Perchloric Acid 60% | Sigma | 311413 | Very hazardous to skin and eyes |
| Iodine | Sigma | 23214TD | |
| Potassium iodide | Sigma | 08625JE | |
| Equipment | |||
| Plate Reader | Bio Tek | ELx800 |
References
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