Encyclopedia of Experiments: Biology
需要订阅 JoVE 才能查看此 内容. 登录或开始免费试用。
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- وxenograft هو عضو أو نسيج مأخوذة من نوع وزرعها في آخر. وxenograft المشتقة من المريض، أو PDX، هو نموذج السرطان الذي يتم زرع الأنسجة من ورم المريض في مناعي، مثل يرقة حمار وحشي الذي لم يتم تطوير جهاز المناعة بشكل كامل، لدراسة تطور الورم أو فعالية الدواء.
بعد ذلك ، قم بتحميل تعليق خلايا الكسب غير المشروع للمريض ونقلها إلى إبرة صغيرة رأس ية. تحت المجهر قم بحقن الخلايا في كيس صفار اليرقة باستخدام إبرة صغيرة، والآن ، قم بزراعة اليرقات المحقونة في محلول E3 الذي يحتوي على الجلوكوز وL glutamine ، والذي يدعم الطلب العالي على الطاقة لخلايا xenograft.
للعلاج من المخدرات نقل اليرقات xenografted إلى لوحة بئر، وتقسيم الآبار إلى مجموعات على أساس عدد وجرعات المركبات التي تحتاج إلى اختبار، وإضافة المركبات.
في البروتوكول التالي، سوف ندرس المخدرات gemcitabine و navitoclax في نموذج zPDX من سرطان البنكرياس.
- بعد تخدير يرقات حمار وحشي، نقلها إلى لوحة الحقن، التي تمتلئ E3 المعدلة. تناول 25 ميكرولتر من تعليق الخلية المختلطة في الإبرة الصغيرة، وإدراج الإبرة في المتلاعب microinjection. تعيين ضغط الحقن والوقت، وحقن 50 إلى 80 خلية في كيس صفار من 48 ساعة بعد الإخصاب حمار وحشي.
نقل يرقات حمار وحشي ما بعد xenografted إلى 40 ملليلتر من محلول المزيج في 32 درجة مئوية.
علاج مجموعة التحكم مع E3 التي تحتوي على 0.1٪ DMSO، وعلاج المجموعات الأخرى مع gemcitabine و / أو navitoclax. احتضان جميع اليرقات في 32 درجة مئوية لمدة يومين.
استخدم مجهرا مفلورا أو كونفوكوكال لتصوير اليرقات من المنظر الجانبي.
