Journal
/
/
قياس BK-polyomavirus غير الترميز السيطرة المنطقة مدفوعة النشاط النسخي عن طريق قياس التدفق
JoVE 杂志
遗传学
Author Produced
需要订阅 JoVE 才能查看此.  登录或开始免费试用。
JoVE 杂志 遗传学
Measurement of BK-polyomavirus Non-Coding Control Region Driven Transcriptional Activity Via Flow Cytometry
DOI:

11:54 min

July 13, 2019

, , , , , , , , ,

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:15Collection of Blood and or Urine Samples and Isolation of BKPyV-DNA
  • 02:11Amplification and Sequencing of the Non-coding Control Region (NCCR)
  • 03:37Cloning of the Non-coding Control Region (NCCR) into the Dual Fluorescence Reporter
  • 05:26Transient Transfection of HEK293T Cells with the Dual Fluorescence Reporter Plasmid and Treatment with Potential Antiviral Agents
  • 07:23Fluorescence Microscopy and Flow Cytometry
  • 09:22Results and Data Interpretation
  • 11:26Conclusion

Summary

自动翻译

في هذه المخطوطة، يتم تقديم بروتوكول لإجراء قياس يستند إلى FACS للنشاط النسخي لفيروس الورم الأوب باستخدام خلايا HEK293T المنقولة مع بلازميد مراسل ثنائي الاتجاه يعبر عن tdTomato وeGFP. كما تسمح هذه الطريقة بتحديد تأثير المركبات الجديدة على النسخ الفيروسي بشكل كمي.

Related Videos

Read Article