Summary

Les dosages des Saisies en Neurocircuit Mutants épilepsie du Drosophile</em

Published: April 15, 2009
doi:

Summary

En utilisant la stimulation électrique à haute fréquence, la saisie-comme l'activité peut être induite dans<em> Drosophile</em>. Cette activité est facilement enregistrées par le système de fibre géante.

Abstract

Drosophila melanogaster est un outil utile pour étudier la saisie comme activité. Une variété de mutants dont les crises peuvent être induites soit par un choc physique ou la stimulation électrique est disponible pour l'étude des divers aspects de l'activité épileptique et de comportement. Toutes les mouches, y compris de type sauvage, va subir une saisie-comme activité si stimulés à une tension assez élevée. Saisie comme l'activité est une réponse tout-ou-rien et chaque génotype a un seuil de crise spécifique. Le seuil de la saisie d'un génotype spécifique de la mouche peut être modifiée soit par un traitement avec un médicament ou par la suppression génétique ou d'amélioration. Le seuil est facilement mesuré par l'électrophysiologie. Saisie-comme l'activité peut être induite par stimulation électrique à haute fréquence livrés directement au cerveau et enregistrées par les muscles dorsaux longitudinaux (DLMS) dans le thorax. La DLMS sont innervés par une partie du système de fibre géante. A partir de basse tension, la stimulation à haute fréquence, et ensuite élever la tension par petits incréments, le seuil de saisie pour une seule mouche peut être mesurée.

Protocol

Préparation des échantillons: La nuit avant l'expérience, les mouches mâles du génotype désiré sont anesthésiés et placés dans un flacon avec un bouchon en nylon souple. Une boule de coton serait également travailler. Après l'anesthésie, le seuil épileptogène est altérée, alors les mouches sont mieux laisser pendant au moins 6 heures, bien que pendant la nuit est idéal. Le jour de l'expérience, les mouches sont montées une à la fois…

Discussion

Cette vidéo a démontré les étapes de base pour déterminer le seuil épileptogène d'une mouche drosophile individuels. Au lieu d'utiliser l'oscilloscope numérique, un numériseur informatique peut également être utilisé. Cette technique est utile pour déterminer les effets d'un médicament ou une modification génétique sur le seuil épileptogène d'une mouche.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par une subvention du NIH de recherche, une subvention de la Fondation Epilepsie et une subvention de la Fondation McKnight aux expériences sur les mouches des fruits MT drosophile ont été effectuées en conformité avec les directives et les règlements énoncés par le Comité UC Berkeley utilisation des animaux.

Materials

Material Name Typ Company Catalogue Number Comment
Digital oscilloscope   Hitachi VC-6523  
Stimulator   Cornerstone S-900  
Preamplifier   World Precision Instruments Electro 705  
Micromanipulators   Narishige various  

Referenzen

  1. Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
  2. Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
  3. Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
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Diesen Artikel zitieren
Howlett, I. C., Tanouye, M. A. Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila. J. Vis. Exp. (26), e1121, doi:10.3791/1121 (2009).

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