Summary

Saggi Neurocircuit per Sequestri in mutanti di Epilessia Drosophila</em

Published: April 15, 2009
doi:

Summary

Utilizzando la stimolazione elettrica ad alta frequenza, il sequestro-simile può essere indotta a<em> Drosophila</em>. Questa attività è facilmente registrato dal sistema di fibra gigante.

Abstract

Drosophila melanogaster è un utile strumento per studiare come il sequestro di attività. Una varietà di mutanti in cui crisi epilettiche possono essere indotte attraverso uno shock fisico o stimolazione elettrica è disponibile per lo studio di vari aspetti della crisi e del comportamento. Tutte le mosche, compreso wild-type, saranno sottoposti a sequestro un'attività simile, se stimolato con una tensione abbastanza alta. Sequestro come attività è una risposta tutto-o-niente e ogni genotipo ha una determinata soglia convulsiva. La soglia di sequestro di un genotipo specifico di volo può essere alterata mediante trattamento con un farmaco o dalla soppressione o il miglioramento genetico. La soglia può essere facilmente misurato con elettrofisiologia. Sequestro un'attività simile può essere indotta attraverso la stimolazione ad alta frequenza elettrica erogata direttamente al cervello e registrato attraverso i muscoli dorsali longitudinali (DLMS) nel torace. Il DLMS sono innervati dal parte del sistema di fibra gigante. A partire da bassa tensione, la stimolazione ad alta frequenza, e di conseguenza aumentare la tensione con piccoli incrementi, la soglia convulsiva per una sola mosca può essere misurata.

Protocol

Preparazione del campione: La notte prima dell'esperimento, le mosche maschio del genotipo desiderati sono anestetizzati e collocato in una fiala con un tappo in nylon morbido. Un batuffolo di cotone potrebbe anche funzionare. A seguito di anestesia, la soglia convulsiva è alterata, per cui le mosche è meglio lasciarle per almeno 6 ore, anche se durante la notte è l'ideale. Il giorno dell'esperimento, le mosche sono montati uno alla volta alle diapos…

Discussion

Questo video ha dimostrato i passaggi fondamentali nel determinare la soglia di sequestro di una mosca drosofila individuale. Invece di usare l'oscilloscopio digitale, un digitalizzatore computerizzato può anche essere usato. Questa tecnica è utile per determinare gli effetti di un farmaco o di alterazione genetica sulla soglia sequestro di una mosca.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato supportato da una ricerca NIH sovvenzione, una sovvenzione della Fondazione Epilessia McKnight e una sovvenzione della Fondazione per Esperimenti MT su moscerini della frutta Drosophila sono stati eseguiti secondo le linee guida e regolamenti stabiliti dal Comitato di Animal Usa UC Berkeley.

Materials

Material Name Typ Company Catalogue Number Comment
Digital oscilloscope   Hitachi VC-6523  
Stimulator   Cornerstone S-900  
Preamplifier   World Precision Instruments Electro 705  
Micromanipulators   Narishige various  

Referenzen

  1. Kuebler, D., Tanouye, M. A. Modifications of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 83, 998-1009 (2000).
  2. Kuebler, D., Zhang, H., Ren, X., Tanouye, M. A. Genetic suppression of seizure susceptibility in Drosophila. J Neurophysiol. 86, 1211-1225 (2001).
  3. Song, J., Tanouye, M. A. Seizure suppression by shakB2, a gap junction mutation in Drosophila. J Neurophysiol. 95, 627-635 (2006).
check_url/de/1121?article_type=t

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Howlett, I. C., Tanouye, M. A. Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila. J. Vis. Exp. (26), e1121, doi:10.3791/1121 (2009).

View Video