을 평가하기 위해<em> 생체내에</em근육 질환에 대한 치료 개입의> 효과, 치료 방법은 근육의 힘 생성 및 fatigability을 quantitate 필요합니다. 우리는 세부 explanted 마우스 hindlimb 근육의 묘 – 기계적 성질을 평가하는 방법을. 이 분석은 유전자 근육 기능에 수정뿐만 아니라 근육 질환의 마우스 모델 요법의 비교의 효과를 quantitating하는 강력한 방법을 제공합니다.
근육 질환 1,2,3의 치료를위한 치료 개입의 생체내 효과에 평가하기 위해 양적 방법이 필요합니다 그 치료 근육의 힘 생성 및 fatigability 측정. 우리는 마우스에서 신선한 explanted hindlimb 근육의 묘 – 기계적 성질을 평가하기위한 상세한 방법을 설명합니다. 를 사용하고, 최대한의 트위치와 파상풍의 긴장, 수축 시간 및 반 휴식 시간의 측정, 우리는 근육 스트립 myograph (덴마크어 묘 기술 모델 820MS)의 근육을 장착, 마우스 신근 digitorum의 longus 근육의 atraumatic 수확을 설명 사각형 펄스 자극기 (모델 S48, 그라스 기술). 이러한 측정을 사용하여, 우리는 근육 단면적, 트위치 – – 파상풍에 장력 비율 힘을 주파수 관계 곡선과 낮은 주파수 피로 곡선 4 정규화 특정 트위치 및 파상풍 긴장의 계산을 보여줍니다. 이 분석은 치료 근육 질환 1,2,3,5의 마우스 모델에서 중재뿐만 아니라, 근육의 기능 6,7,8,9에 유전자 조작의 효과 비교 사이의 양적 비교하는 방법을 제공합니다.
우리는 마우스 explanted hindlimb 근육의 묘 – 기계적 성질을 평가하기위한 상세한 방법을 설명합니다. 편집 판단리스트는 때문에 정강뼈 앞쪽에 근육 뒤쪽의 사후 위치의 해부하다 더 어려운 반면, 그 유명한 건의 첨부 파일 때문에 발목과 무릎 관절에 정강뼈 앞쪽이보다 평가하기가 쉽습니다. 이 인대는 근육 스트립 myograph에 장착 용이. 대조적으로,보다 쉽게 액세스할 정강뼈 앞쪽에은 예외적으로 어려운이 모두 근육을 손상시키지 않고 절개하다, 그리고 myograph에서 안전하게 탑재하고, 무릎 관절에서 광범위한 거의 atendinous 첨부 파일을했다. 우리는 또한 빠른 속도로 생리 버퍼와 온도의 산소 욕조에있는 근육을 장착하면 근육의 기계적 성질을 유지하기 위해 필수적이라는 지적. 우리는 이러한 조건 하에서 근육 응답에 상당한 변화없이 30 분이 분석을 반복할 수 것으로 나타났습니다. 마지막으로, 이것이 근육 기능에 악영향을 가지고 있고, 묘 – 기계의 힘을 싼 견적이 발생할 수있는 근육 섬유의 해부 및 장착 절차 동안 접촉하지 않는 것이 중요합니다. 다음 절차에 따라,이 분석은 근육 기능 6,7,8,9에 유전자 조작의 효과뿐만 아니라 근육 질환 1,2,3,5의 마우스 모델에서 치료 중재 사이의 비교 평가하기 위해 강력한 양적 접근 방식을 제공합니다 .
The authors have nothing to disclose.
이 작품은 NHLBI에서 PEO에 대한 보건 서비스 그랜트 (HL086513) 및 재생 의료 (RC1 – 00104), NHLBI에서 보건 서비스 그랜트 (HL085377)의 캘리포니아 연구소에서 종합적인 연구 그랜트에 의해 지원하고 있던 선물 Pollin 재단 HSB로
SC는 샌프란 시스코 주립 대학에 세포 연구 수상 (TB1 – 01194) 줄기로 재생 의학의 교량에 대해 캘리포니아 공과 대학에 의해 지원되었다.
Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
5-0 silk sutures | Oasis | MV682 | General surgery | |
Dupont #5 forceps | WPI | 500233 | General surgery | |
Hemostat, straight | WPI | 501241 | General surgery | |
Iris forceps | WPI | 15914 | General surgery | |
Lab Chart software | ADInstruments | Version 7 | Data analysis | |
Muscle Strip Myograph | DMT | 820MS | Tension transduction | |
Operating scissors | WPI | 501754 | General surgery | |
Oscilloscope | EZ | OS-5020 | Tension stimulation | |
Pentobarbital, sodium salt | Sigma | P3761 | Euthanasia | |
PowerLab | ADInstruments | 8/30 | Data acquisition | |
Square Pulse Stimulator | Grass Tech. | S48 | Tension stimulation | |
Vannas spring scissors | WPI | 14003 | General surgery |
Solutions and Media
Lactated Ringer’s solution
Krebs Henseleit solution
Pentobarbital