Summary

圧負荷心肥大モデルの作成のためのラットの大動脈狭窄昇順

Published: June 29, 2014
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Summary

我々は、小さな金属クリップを用いて上行大動脈の狭窄によってWistarラットにおける圧負荷及び左心室肥大を作成するための段階的な手順を記載している。このモデルは、広範囲に心肥大中にリモデリングの変化を研究するためのそのような変更の退行ための戦略を同定および評価するために使用される。

Abstract

大動脈狭窄昇順ことは心肥大および心不全を誘発した圧負荷を作成するための最も一般的で成功した外科的なモデルです。ここでは、小さな金属クリップを用いて上行大動脈の狭窄によってラットにおいて圧負荷心肥大を作成するための詳細な外科的処置を記載している。麻酔後、気管切開気管の2軟骨輪間で半分の方法を通じてカニューレを挿入することにより、挿管されている。次いで、皮膚切開は、左胸壁上の第2肋間腔のレベルで行われ、筋層を大動脈の上昇部分を見つけるためにクリアされる。上行大動脈は、小型のチタンクリップを適用することによって、元の直径の50〜60%まで収縮している。大動脈狭窄後に、第二および第三リブはプロレン縫合糸で近似される。気管カニューレが除去され、一度自発呼吸が再確立された。動物は、Oを回復させる徐々に麻酔を低下させることにより、加熱パッドをn個。上行大動脈の狭窄によって生じる圧力負荷の強度は、経胸腔二次元ドップラー心エコー検査を用いて圧力勾配を記録することによって決定される。全体的に、このプロトコルは、心不全期に補償心肥大から徐々に発症し、進行の間に改造イベントや心臓の収縮特性を研究することは有用である。

Introduction

小動物モデルは、心肥大および心不全への進行の発展における慢性変化の研究のための最も好ましい手段である。これらの動物は、開胸外科的処置、心エコー検査および血行力学パラメータの評価に最も適しているように、外科的方法による心不全のラットモデルは、もともと開発された。彼らはまた、組織、細胞および分子レベルでの研究1で十分死後サンプルを提供。上行大動脈の狭窄は、圧負荷心不全2、3を作成するための最も一般的かつ成功した外科的モデルの一つである。このモデルは、肥大から心不全への移行中4細胞の細胞リモデリングおよびサブイベントや心臓の収縮特性を研究するのに適している。

このモデルの主な利点は心臓5上の圧負荷を徐々に発症は</ SUP> 6。このモデルは、理由に補償心肥大から非代償期へ、そして最後に心不全の段階へゆっくりだが着実に進行の臨床的に関連している。心不全と関連する生理学的変化に対する心臓肥大の進行の持続時間は、主に7を生成した狭窄の程度によって影響される。上行大動脈狭窄は、縫合糸を使用することによって又は金属クリップ8,9のアプリケーションのいずれかによって、二つの方法で行うことができる。大動脈狭窄のための金属製のクリップを使用することの主な利点は、外科的処置がより複雑であることである。この方法では、1は、前出の弁膜上行大動脈を見つけて、くびれの所望のレベルを得るために、大動脈の周りにクリップを挿入しなければならない。胸のトラクターは、この手順は必要ありません。縫合による大動脈結紮は、上行大動脈の横にゲージの針を配置し、それを中心に縫合するためのより多くの外科的操作を必要とする大動脈狭窄の所望のレベルを生成する。後者の技術は、大動脈狭窄用金属クリップを用いた場合に比べ、より多くの時間がかかる。このビデオで説明した方法は、作成圧のオーバーロードされた左心室肥大モデルを可能にする、ラットにおける大動脈狭窄を昇順、外科的処置を示しています。

Protocol

動物実験は、動物実験倫理委員会の承認を得た後に実施された。 Wistar系ラットを明サイクル、(CPCSEAガイドラインに従って)食物と水を自由に一定の室温(24±2℃)に12時間の暗闇の下で飼育した。 1)術前ケアと麻酔 (水の500 mg / Lの用量)を経口アモキシシリンを投与することによって、手術前の抗生物質の傘の下で24時間ラット(約200gの体重)を保つ。 <…

Representative Results

我々の実験では、80%以上の生存率を達成することができる。大動脈狭窄の有効性は、ドップラー心エコー検査を行うことによって確認された。大動脈狭窄部位でのHg約60mmの圧力勾配を有するラット(n = 6)は、8週間観察し、心臓肥大( 図1)の開発のために分析するために屠殺した。 8週間後、手術後の心エコー評価は、偽手術と比較して、そのような大動脈狭窄を受けた動物?…

Discussion

圧負荷の誘導ならびに心肥大および心不全のためのいくつかの外科的モデルがある。小動物では、Lorellらは我々がここで説明したモデルを開発し、彼らが補償心肥大8週間後の大動脈結紮5が発生したことを報告した。心臓の変化は徐々に非代償性状態に進行した後、心不全につながる。このモデルの主な利点は、左心室圧の増加および慢性高血圧の臨床状況に類似し、従ってを徐々に…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、このプロジェクトの財政支援のためのバイオテクノロジー本部、インド政府を認める。 AjithクマーGSは医学研究、インド政府のインド評議会の上級研究フェローシップと科学産業研究評議会、インド、Binilラジ政府の上級研究フェローシップでサポートされていました。

Materials

Wistar rats Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems  VetEquip AB19276
Rodent ventilator CWE Inc SAR- 830/AP 
Rat tracheal cannula CWE Inc 13-21032
Ultrasound system Philips HD7
Ultrasound transducer Philips S 12
Titanium clip (small) Horizon 1204
Clip applicator Weck 137081
Electric shaver Vinverth VBT0817
BP blade (size:11) Surgeon REF10111 Preparation of surgical site
Tramadol Orchid health care OCH043
Amoxycillin Hydrochloride Ranbaxy
Isoflurane Piramal health care A23M10A
Syringes BD 2015-09
4-0 braided silk Diamond
3-0 prolene Johnson&Johnson NW018
Surgical tape Romsons SH 6301
Povidone iodine Win Medicare
Temp. controlled heating pad Flamingo HC1003

Referenzen

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Diesen Artikel zitieren
GS, A. K., Raj, B., S, S. K., G, S., Kartha, C. C. Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model. J. Vis. Exp. (88), e50983, doi:10.3791/50983 (2014).

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