간 전이의 전임상 쥐과 모델
Summary
간 전이 전임상, 뮤린 모델 hemispleen 주입 기법을 통해 수행 하였다.
Abstract
수많은 뮤린 모델은 인간의 암 연구 및 암 치료 및 개발의 이해를 발전하기 위해 개발되어왔다. 여기서, 동계 생쥐 췌장 종양 세포의 주입 hemispleen 통한 간내 전이 전임상, 쥐 췌장 종양 모델을 설명한다. 이 모델간에 전이성 질환을 가진 환자에서의 임상 조건의 많은 모방. 마우스는 지속적으로 전이 과정의 조사, 실험적인 치료 테스트 및 종양 면역학 연구를 허용 간에서 전이을 개발한다.
Introduction
췌장 유관 선암 (PDA)는 미국 한 암 관련 사망의 네 번째 주요 원인이다. 전이성 PDA 환자 5 년 생존율은 2-12% 일이다. 췌장암에 대한 보조 및 보조 항암 화학 요법이 그 어느 때보 다 오늘날 더 효과적이지만, 여전히 새로운 치료를위한 절박한 필요성이 남아있다.
신규 한 치료제의 개발을 신뢰성 전임상 동물 모델을 필요로한다. 피하 종양 모델은 사용하기 간단하지만, 단점은 인간의 암에서 볼 수있는 종양의 진행과 미세 환경을 전이하고 모방하는이 종양의 무능력을 포함한다. 같은 Kras 호텔 및 p53의 노크에 발암 돌연변이 (KPC 모델) (2)와 YFP 계보 추적 (PKCY 모델)와 KPC 모델을 포함하는 유전자 변형 마우스와 같은 유전자 조작 모델, 3 immunocompete에서 자연적으로 발생하는 종양에 대한 연구 허용NT 마우스. 또한, 종양 미세 환경은 불변이고 더 밀접 인간 종양 진행에서 본 것을 닮았다. 불행하게도, 종양 발생의 타이밍 어려운 실험 요법을 연구 할 수있다 이러한 모델 내의 변수이다. 또한,이 마우스의 교잡 시간과 항상 가능하지 않을 금융 약속, 상당한 양을 필요로한다. 마지막으로, 이식 이종 이식 PDA 마우스 모델을 변경 한 마우스, 결석, 종양 미세 환경을 면역이 필요로. 따라서 이러한 전임상 모델에서 입증 실험 요법의 효능은 종종 인간 임상 시험에서 4 재현성 아니다.
이 hemisplenectomy 마우스 모델 C57BL / 6 마우스 (5, 6)로부터 유도 고도로 종양, 췌장 종양 methylcholanthrene 유도 세포주이다 Panc02 종양 세포를 이용한다. 또한, 다른 PDA 뮤린 세포주 KPC 마이크에서 파생전자는이 모델에서 사용될 수있다. Schulick 등. 이전에 hemisplenectomy 기술을 개발하고 대장 암의 전이 (7)의 동계 마우스 모델을 만들었습니다. 이 hemisplenectomy 모델 (그림 1)는 새로운 치료제 7-10의 조사 자체를 빌려주는 면역 생쥐에서 일관되고 동일한 종양 접종을 제공합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
hemispleen 주입 기법을 통해 간으로 췌장 암전이 전임상 뮤린 모델간에 전이성 질환이있는 환자의 임상 적, 면역 학적 조건 중 많은 거울 설명한 제 모델이다. 이 모델은 다른 쥐 모델에 비해 여러 가지 장점을 제공합니다. 쥐의 30 %가 간 및 전이 형성의 타이밍에 전이를 개발하는 췌장암의 형질 전환 모델은 상당히 가변적 달리 먼저,이 모델에서 마우스의 100 %에서 간으로 일관 획득 전이 이점을 제?…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
KF 및 KO는 KS와 함께 첫번째 저자 공동 아르
이 작품은 AHPBA 원정대 (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), 존스 홉킨스 의과 대학 임상 과학 자상 (LZ), Viragh 재단과 존스 홉킨스 건너 뛰기 Viragh 췌장 암 센터 (EMJ에 의해 부분적으로 지원 LZ), 국립 췌장 재단 (LZ), Lefkofsky 가족 재단 (LZ), 위장관 암의 P50의 CA062924에서 NCI 포자 (EMJ, LZ), Lustgarten 재단 (LZ), 그리고 솔 골드만 췌장 암 센터의 보조금 (KS , BHE, LZ).
Materials
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line | ||
| Phosphate Buffered Saline | Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
| 15 mL centrifigure tubes | Corning | 430052 | |
| Curved Operating Scissor | Roboz Surgical Store | RS-6835 | |
| Micro dissecting Graefe Forceps | Roboz Surgical Store | RS-5130 | |
| Needle holder (regular) | World Precision Instruments, Inc | ||
| 3-0 or 4-0 suture | courtesy of dept of surgery, Johns Hopkins | ||
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, small, angled | Teleflex | 137085 | |
| Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, medium, angled | Teleflex | 237115 | |
| Weck Horizon medium ligating clips | Teleflex | 002200 | |
| Weck Horizon small ligating clips | Teleflex | 001200 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 3/8" slip tip | Becton Dickinson | 309625 | |
| Syringe, 1 cc, tb syringe, 5/8" slip tip | Becton Dickinson | 309597 | |
| 9 mm Autoclip Applier | Mikron | 427630 | |
| 9 mm Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
| Heating pad | Sunbeam | CAT93 | |
| 70% Ethanol | sold by numerous vendors | ||
| Ketamine Hydrochloride | Hospira | 22395DD | |
| Xylazine hydrochloride | Sigma | X1251 |
Referenzen
- American Cancer Society. . Cancer Facts & Figures. , (2013).
- Clark, C. E., Beatty, G. L., Vonderheide, R. H. Immunosurveillance of pancreatic adenocarcinoma: insights from genetically engineered mouse models of cancer. Cancer letters. 279, 1-7 (2009).
- Rhim, A. D., et al. EMT and dissemination precede pancreatic tumor formation. Cell. 148, 349-361 (2012).
- Frese, K. K., Tuveson, D. A. Maximizing mouse cancer models. Nature reviews. Cancer. 7, 645-658 (2007).
- Corbett, T. H., et al. Induction and chemotherapeutic response of two transplantable ductal adenocarcinomas of the pancreas in C57BL/6 mice. Cancer research. 44, 717-726 (1984).
- Leao, I. C., Ganesan, P., Armstrong, T. D., Jaffee, E. M. Effective depletion of regulatory T cells allows the recruitment of mesothelin-specific CD8 T cells to the antitumor immune response against a mesothelin-expressing mouse pancreatic adenocarcinoma. Clinical and translational science. 1, 228-239 (2008).
- Jain, A., et al. Synergistic effect of a granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-transduced tumor vaccine and systemic interleukin-2 in the treatment of murine colorectal cancer hepatic metastases. Annals of surgical oncology. 10, 810-820 (2003).
- Yoshimura, K., et al. Selective targeting of antitumor immune responses with engineered live-attenuated Listeria monocytogenes. Cancer research. 66, 1096-1104 (2006).
- Yoshimura, K., et al. Live attenuated Listeria monocytogenes effectively treats hepatic colorectal cancer metastases and is strongly enhanced by depletion of regulatory T cells. Cancer research. 67, 10058-10066 (2007).
- Olino, K., et al. Tumor-associated antigen expressing Listeria monocytogenes induces effective primary and memory T-cell responses against hepatic colorectal cancer metastases. Annals of surgical oncology. 19, 597-607 (2012).
- Hingorani, S. R., et al. Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice. Cancer cell. 7, 469-483 (2005).
- Marion, A., Aoudi, W., Basarab, A., Delachartre, P., Vray, D. Blood flow evaluation in high-frequency, 40 MHz imaging: a comparative study of four vector velocity estimation methods. Ultrasonics. 50, 683-690 (2010).
- Zheng, L., et al. Tyrosine 23 phosphorylation-dependent cell-surface localization of annexin A2 is required for invasion and metastases of pancreatic cancer. PloS one. 6, e19390 (2011).
