גישה מאבחנת של רכיבים לחקר על אלרגנים של אבקת דשא בדרומים סיניים עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה
Summary
עבודה זו מתארת פרוטוקול המשתמש בגישה המוטמעת ברכיבים לחישוב רגישות לאלרגנים של אבקת דשא, בקרב קבוצה של מטופלים מדרום סין עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה.
Abstract
רגישות לאבקת דשא מטילה סיכון עולמי למחלות דרכי הנשימה האלרגיות. למרות המניעה מסתמך על החקירה המקומית של אלרגנים אבקה, נתונים בנושא זה מוגבלים בדרום סין. כל הנתונים הזמינים התקבלו על ידי שאלונים של דיווח עצמי, בדיקות זין בעור, ומבחני IgE הכוללים או ספציפיים באמצעות תמציות גולמיות. מסיבות רבות, שיטות אלה אינן אמינות. תגובה תגובתית לדגי ברמודה, דשא של טימותי, וחומולוס משפשף אלרגנים בקוהורט של חולים מגולדו גואנגג'ואו (העיר הגדולה ביותר בדרום סין ופאתייה), עם דלקת נזלת אלרגית ו / או אסטמה נבדקו באמצעות מנתח אימונו-אוטומטי אוטומטי כמרכיב כלי אבחון לפתרון בעיות (CRD).
בפעם הראשונה, שכיחות גבוהה משמעותית של חיובי הדגימה של ברמודה הדגימה הודגמה אצל הדרוזים הסינים עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה. בחולים אלה, שכיחות מתוחכמת של רגישותאל הדשא של טימותי ו – Humulus scandens צוין גם, אשר עשוי לנבוע תגובתיות, כמו שני האחרונים אינם נפוצים באזור. זה נתמך גם על ידי זיהוי של רכיבי אלרגן.
ניתוחים אימונואזיים אוטומטיים לחלוטין עשויים להציע עקביות משביעת רצון בין אזורים, מעבדות ומוסדות ועם הזמן. האוטומטיות של המכשיר עשויה לאפשר זיהוי סטנדרטי שלא היה מתגלה בקלות לפני הופעתו של CRD.
זהו מחקר המשתמש בגישת CRD כדי לחקור רגישות לאלרגנים של אבקת הדשא בדרום סין. זה מוסיף עדויות הנוכחי בספרות. נדרשים מחקרים עתידיים כדי לאמת את הממצאים הללו. עם זאת, למרות CRD הוא כלי שימושי, הממצאים שנעשו עם מנתח אוטומטי אוטומטי immunoassay לא צריך להחליף חקירות מעבדה אחרים, הערכות קליניות, המומחיות לרופא.
Introduction
אבקת הדשא מהווה כמעט 50% מהאלרגיות הקשורות באימונוגלובולין E (IgE), ובגלל אופייה המוטס, מטילה סיכון עולמי למחלות דרכי הנשימה האלרגיות, בייחוד אסטמה ונזלת אלרגית 1 , 2 , 3 , 4 . מניעה נגד אלרגיות אבקת הדשא באזור מסתמכת על מידע על ההפצה המקומית של אלרגנים אבקה. לרוע המזל, הספקטרום של האלרגנים המרגישים משתנה ממקום למקום – תצפית הנקראת בדרך כלל סגוליות אזורית.
בסין, טריטוריה מזרחית-אסיאתית גדולה, סגוליות אזורית של רגישות לאבקת הדשא מסובכת עוד יותר על ידי נתונים מוגבלים הקיימים כיום בחלק הדרומי של המדינה במהלך העשורים האחרונים 5 . מיעוט כזה בנתונים הוביל לקושי להציג את הדשא הכולל אבקה sensiטיציון במדינה גדולה זו 6 . בנוסף, הנתונים המצומצמים ביותר על הדרומי הסיני התקבלו במידה רבה משאלוני דיווח עצמי, בדיקות זין בעור (ולא בדיקות מעבדה), סך מדידות IgE (ולא IgE ספציפיות לאלרגיה), וגילוי sIg לאלרגנים ( ולא למולקולות של אלרגן).
דיווח עצמי של סימפטומים אלרגיים יכול להיות אמין כאשר אלרגנים ספציפיים מודאגים. בדיקות זין עור, אם כי נרחב נגיש, כרוך בשימוש של אלרגנים שאינם סטנדרטיים, תמציות אלרגן, אשר בעצמם עשויים להכיל מרכיבים רגישים אחרים המעוררים את הפרשנות התוצאה. האמינות של בדיקת הזין עור גם מבחינה ביקורתית תלוי מניפולציה מיומן על ידי אלרגיסטים או אחיות מומחה, שימוש היסטמין האחרונות, תאימות המטופל (לפעמים קשה מאוד עבור ילדים צעירים). סך הכל IgE שימושי עבור סינון אלרגיה, אבל לא באופן הגיוני לקבוע thהפוגעות באלרגנים בחולה. יתר על כן, כמעט כל אלרגנים מכילים מספר מולקולות רכיב אלרגן. רגישות למרכיבים העיקריים ( כלומר, d 1 p ו d 2 p מתוך קרדית האבק הבית) עשוי להצביע על "אלרגיה" אמיתית (אלרגיה לאלרגן ספציפי, ולא חיוביות כוזבת עקב תגובות צולבות עם אלרגנים אחרים), אבל רגישות לאלו מסוימים ( כלומר, cross-reactive Der 10, טרופיומיזין) לא יכול להיות 7 .
לפני שהוכנסו אבחונים של רכיבים (CRD), הכשלים המאכזבים האלה גרמו ללימודי אלרגן בסין. CRD מזהה במדויק את מרכיבי האלרגן באמצעות מולקולות אלרגניות רקומביננטיות או מטוהרות, ובכך הופך את המדידה לכמותית וניתנת לאפיון בקלות. בעשורים האחרונים, מחקרים אלרגיה לעתים קרובות מועסקים תמציות גס של אלרגנים כי בהכרח להכיל מספר מרכיבים לא רלוונטיים. רבים של אלה שיתוףMponents הם אינרטי, אבל לפעמים, כמה יכול להוביל תגובות חיוביות confounding. השימוש במולקולות אלרגניות רקומביננטיות או מטוהרות ב CRD יכול לעקוף את זה ולכן לספק דיוק הבדיקה טובה יותר. כאשר מעובדים microarrays, גישה CRD במהירות מסכים או מזהה רגישות למאות מולקולות אלרגן בנושאים בודדים. מחקר מתוכנן היטב ל- CRD על רגישות לאבקת הדשא בדרום סין חסר כעת. באופן אידיאלי, מחקר כזה צריך לכלול אוכלוסייה מקומית של כיסוי גיאוגרפי ניכר, להסביר אבקות דשא שדווחו בדרך כלל בסין, ולטפל בהיבטים הטכניים שהוזכרו לעיל. כדי להגיע לרמה מעשית של הרלוונטיות הקלינית וכדי להקל על גיוס דגימות בסרום, החקירה המוקדמת על רגישות לאבקת עשב כאלרגנים משאיפים יכולה להיות ממוקדת גם בחולים עם הפרעות נשימה אלרגיות, ולא באוכלוסייה הכללית.
עבודה זו מתארת שיטההשתמשו בבדיקת תגובת sIgE בדם לעמק ברמודה, דשא טימותי, וחומולוס scandens בחולים של גואנגג'ואו הגדול (העיר הגדולה ביותר בדרום סין ופאתייה) עם נזלת אלרגית ו / או אסתמה באמצעות הגישה CRD 5 . ממצאים אלה על רגישות לאבקת הדשא הסובטרופית והמתונה בדרום סין מוסיפים ראיות חשובות לאלה הקיימים כיום בספרות.
Protocol
Representative Results
Discussion
ניתוחים אימונואזיים אוטומטיים לחלוטין עשויים להציע עקביות משביעת רצון בין אזורים, מעבדות ומוסדות ועם הזמן. הליך אוטומטי זה נמצא באופן משמעותי כדי לתמוך במחקר הספסל ומחקרים קליניים, לאפשר זיהוי סטנדרטי של אלרגנים רבים ו / או אלרגן רכיבים, ולזהות אלרגנים סבירות סביר כ…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים Yueming Su על עזרתו בהכנת הדמות. מחקר זה מומן על ידי קרן גואנגדונג של מדע וטכנולוגיה (פרויקט מס ': 2014A020212352), גואנגזו החינוך הלשכה (1201630044, 1201630393) ואת הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (NSFC 81572063, NSFC 81601394).
Materials
| ImmunoCAP 1000 Instrument | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3800-01 | |
| Phadia Information Data Manager Software Package | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-11 | |
| Software Package, ImmunoCAP 1000 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-12 | |
| g2 (Bermuda grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4131-01 | |
| g6 (Timothy grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4100-01 | |
| w22 (Japanese Hop) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4452-01 | |
| g216 (nCyn d 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4972-01 | |
| g205 (rPhl p 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5234-01 | |
| g208 (nPhl p 4) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5288-01 | |
| g215 (rPhl p 5b) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5338-01 | |
| g209 (rPhl p 6) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5289-01 | |
| g210 (rPhl p 7) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5290-01 | |
| g211 (rPhl p 11) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5291-01 | |
| g212 (rPhl p 12) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5292-01 | |
| o214 Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5339-01 | |
| Specific IgE Conjugate 400 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9310-08 | |
| Specific IgE Calibrator Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9459-08 | |
| Specific IgE Curve Control Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9312-08 | |
| Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4417-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Negative Control | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9445-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control L | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9528-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control M | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9529-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control H | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9530-01 | |
| Development Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9439-08 | |
| Stop Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 34-2271-58 | |
| Washing Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9202-08 | |
| FluoroC | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9264-01 | |
| Maintenance Solution Kit | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9476-01 |
Referenzen
- Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
- Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
- Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
- Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
- Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
- Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
- Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
- Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
- Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776 (2014).
- Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
- Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
- Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
- Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
- Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
- Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
- Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
- Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
- Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
- Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
- Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
- Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
- Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
- Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
- Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
- Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).
