Uma abordagem de diagnóstico resolvida por componente para um estudo sobre alergênios de pólen de grama em sulistas chineses com rinite alérgica e / ou asma
Summary
Este trabalho descreve um protocolo que utiliza uma abordagem resolvida por componentes para estudar a sensibilização para alérgenos do pólen em uma coorte de pacientes do sul da China com rinite alérgica e / ou asma.
Abstract
A sensibilização para o pólen de pastagem impõe um risco global de doenças alérgicas nas vias aéreas. Embora a prevenção baseie-se na investigação local dos alergenos do pólen, os dados sobre este tema são limitados no sul da China. Todos os dados disponíveis foram obtidos por questionários de auto-relato, testes cutâneos e testes de IgE totais ou específicos, utilizando extratos brutos. Por muitos motivos, esses métodos não são confiáveis. A reatividade sérica do soro para gramíneas de Bermuda, Timothy Grass e Humulus scandens em uma coorte de pacientes da Grande Cantão (maior cidade do sul da China e seus arredores) com rinite alérgica e / ou asma foram examinadas usando um analisador de imunoensaio totalmente automatizado como componente Ferramenta de diagnóstico resolvido (CRD).
Pela primeira vez, foi demonstrada uma prevalência consideravelmente alta de positividade da grama de Bermuda em sulistas chineses com rinite alérgica e / ou asma. Nestes pacientes, uma subtil prevalência de sensibilizaçãoPara Timothy grass e Humulus scandens também foi observado , que pode resultar da reatividade cruzada, já que os dois últimos não são comuns na região. Isso também foi apoiado pela detecção de componentes alérgenos.
Os analisadores de imunoensaio totalmente automatizados podem oferecer consistência satisfatória entre regiões, laboratórios e instituições e ao longo do tempo. A automatização do instrumento pode permitir uma detecção padronizada que não teria sido prontamente revelada antes do advento do CRD.
Este é um estudo que usa uma abordagem CRD para investigar a sensibilização para alergenos de pólen de capim no sul da China. Isso acrescenta à evidência atual na literatura. Estudos futuros são necessários para validar esses achados. No entanto, embora o CRD seja uma ferramenta útil, os resultados obtidos com o analisador de imunoensaio totalmente automatizado não devem substituir outras investigações laboratoriais, avaliações clínicas e conhecimentos médicos.
Introduction
O pólen de gramado representa cerca de 50% das alergias relacionadas com a imunoglobulina E (IgE) e, devido à sua natureza no ar, impõe um risco global de doenças das vias aéreas alérgicas, particularmente asma e rinite alérgica 1 , 2 , 3 , 4 . A prevenção contra alergias ao pólipo em uma região depende da informação sobre a distribuição local dos alérgenos do pólen. Infelizmente, o espectro dos alérgenos sensibilizantes varia de um lugar para outro – uma observação geralmente conhecida como especificidade regional.
Na China, um vasto território asiático-oriental, a especificidade regional da sensibilização ao pólen é ainda mais complicada por dados limitados atualmente disponíveis na parte sul deste país nas últimas décadas 5 . Tal escassez de dados levou a uma dificuldade em mostrar o significado geral do pólen da gramaTização neste grande país 6 . Além disso, os dados muito limitados sobre os sulistas chineses foram obtidos em grande parte a partir de questionários de auto-relato, testes cutâneos (em vez de testes de soro de laboratório), medições de IgE total (em vez de IgE específicas de alérgenos (sIgE)) e detecção de SIG para alérgenos ( Em vez de moléculas de componentes alergénicos).
O auto-relato de sintomas alérgicos pode ser pouco confiável quando se trata de alérgenos específicos. Os testes cutâneos, embora amplamente acessíveis, envolvem o uso de extratos de alérgenos brutos não padronizados, que podem conter outros componentes sensibilizantes que confundem a interpretação dos resultados. A confiabilidade do teste cutâneo também depende criticamente de manipulação habilidosa por alergistas ou enfermeiras especializadas, uso recente de histamina e complacência do paciente (às vezes muito difícil para crianças pequenas). A IgE total é útil para rastrear uma alergia, mas não determina sensivelmenteE alergenos ofensivos em um paciente. Além disso, quase todos os alérgenos contêm uma série de moléculas de componentes de alérgenos. A sensibilização para os principais componentes ( isto é, Der p 1 e Der p 2 dos ácaros da poeira doméstica) pode sugerir uma alergia "genuína" (alergia a um alérgeno específico, em vez de falsa positividade devido a reações cruzadas com outros alérgenos), mas a sensibilização Para certos ( isto é, o Der-10 de reacção cruzada, uma tropomiosina) pode não 7 .
Antes da introdução de diagnósticos resolvidos por componentes (CRD), esses contratempos decepcionantes impediram os estudos de alergenos na China. O CRD detecta precisamente os componentes de um alergénio usando moléculas de alérgenos recombinantes ou purificadas, tornando assim a medida facilmente quantificável e caracterizável 8 . Nas últimas décadas, estudos de alergia freqüentemente empregavam extratos brutos de alérgenos que inevitavelmente contêm uma série de componentes irrelevantes. Muitos desses coOs fabricantes são inertes, mas ocasionalmente, alguns podem levar a confundir reações positivas. O uso de moléculas de alergênio recombinantes ou purificadas em CRD pode contornar isso e, portanto, proporcionar uma melhor precisão do teste. Quando processado em microarrays, uma abordagem CRD rapidamente monitora ou identifica sensibilização para centenas de moléculas de alérgenos em indivíduos individuais. Atualmente, um estudo CRD bem desenhado sobre a sensibilização ao pólen do gramado no sul da China está faltando. Idealmente, esse estudo deve incluir uma população local de cobertura geográfica considerável, responsável pelos pólenes de gramado comumente relatados na China e abordar os aspectos técnicos mencionados acima. Para atingir um nível prático de relevância clínica e para facilitar o recrutamento de amostras de soro, a investigação precoce sobre a sensibilização aos pólenes de capim como alérgenos inaladores também pode ser focada em pacientes com distúrbios respiratórios alérgicos e não na população em geral.
Este trabalho descreve um métodoUsado para testar a reatividade sérica do soro para Bermuda, Timothy Grass e Humulus scandens em pacientes da Grande Cantão (maior cidade do sul da China e seus arredores) com rinite alérgica e / ou asma usando a abordagem CRD 5 . Essas descobertas sobre a sensibilização a esses pólenes de capim subtropical e temperado no sul da China adicionam evidências importantes para o que atualmente está na literatura.
Protocol
Representative Results
Discussion
Os analisadores de imunoensaio totalmente automatizados podem oferecer consistência satisfatória entre regiões, laboratórios e instituições e ao longo do tempo. Verificou-se que um procedimento tão automático sustenta substancialmente pesquisas de banco e estudos clínicos, permite a detecção padronizada de muitos alérgenos e / ou componentes de alérgenos e identifica a provável reatividade cruzada de alérgenos que não teria sido prontamente revelada antes do advento dos CRDs. Além disso, todo o procedim…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Agradecemos Yueming Su por sua ajuda na preparação da figura. Este estudo foi financiado pela Fundação Guangdong de Ciência e Tecnologia (Projeto No .: 2014A020212352), o Escritório de Educação de Guangzhou (1201630044; 1201630393) e a Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NSFC 81572063; NSFC 81601394).
Materials
| ImmunoCAP 1000 Instrument | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3800-01 | |
| Phadia Information Data Manager Software Package | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-11 | |
| Software Package, ImmunoCAP 1000 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 12-3801-12 | |
| g2 (Bermuda grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4131-01 | |
| g6 (Timothy grass) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4100-01 | |
| w22 (Japanese Hop) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4452-01 | |
| g216 (nCyn d 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4972-01 | |
| g205 (rPhl p 1) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5234-01 | |
| g208 (nPhl p 4) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5288-01 | |
| g215 (rPhl p 5b) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5338-01 | |
| g209 (rPhl p 6) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5289-01 | |
| g210 (rPhl p 7) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5290-01 | |
| g211 (rPhl p 11) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5291-01 | |
| g212 (rPhl p 12) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5292-01 | |
| o214 Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs) |
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-5339-01 | |
| Specific IgE Conjugate 400 | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9310-08 | |
| Specific IgE Calibrator Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9459-08 | |
| Specific IgE Curve Control Strip | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9312-08 | |
| Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 14-4417-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Negative Control | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9445-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control L | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9528-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control M | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9529-01 | |
| ImmunoCAP Specific IgE Control H | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9530-01 | |
| Development Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9439-08 | |
| Stop Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 34-2271-58 | |
| Washing Solution | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9202-08 | |
| FluoroC | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9264-01 | |
| Maintenance Solution Kit | Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) | 10-9476-01 |
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