Summary

Allerjik Rinit ve / veya Astımı olan Çinlilerin Çimen Poleni Allerjenleri Üzerine Bir Çalışma İçin Bileşen ile Çözümlenmiş Bir Teşhis Yaklaşımı

Published: June 04, 2017
doi:

Summary

Bu çalışma, Güney Çin'den allerjik rinit ve / veya astımlı bir hasta grubunda ot polen allerjenlerine duyarlılığı araştırmak için bileşen çözümü yaklaşımını kullanan bir protokolü açıklamaktadır.

Abstract

Ot polenine duyarlılık alerjik hava yolu hastalıkları için küresel bir risk oluşturmaktadır. Önleme, polen allerjenlerinin yerel incelemesine dayanmasına rağmen, bu konudaki veriler güney Çin'de sınırlıdır. Mevcut veriler, kendi kendine anket formları, cilt prick testleri ve ham ekstraktlar kullanılarak yapılan toplam veya spesifik IgE testleri ile elde edildi. Birçok nedenle bu yöntemler güvenilmez. Allerjik rinit ve / veya astımlı Greater Guangzhou (Güney Çin'in en büyük şehri ve eteklerinde) hastalardan oluşan bir gruptaki Bermuda ot, Timothy otu ve Humulus skandens allerjenlerine karşı Serum sIgE reaktivitesi, tam otomatik immünoassay analizör kullanılarak bir bileşen olarak incelendi -arlı teşhis (CRD) aracı.

İlk defa, alerjik rinit ve / veya astımı olan Çinli güney ülkelerde Bermuda çim SEg Pozitifliği yaygınlığı oldukça yüksek gösterildi. Bu hastalarda hassas bir prevalansİkincisi bölgede yaygın olmadığından, çapraz reaktiviteden kaynaklanabilecek Timothy grass and Humulus Scandens'e de dikkat çekildi. Bu aynı zamanda alerjen bileşenlerin tespiti ile de desteklendi.

Tam otomatik immüno-analizör, bölgeler, laboratuvarlar ve kurumlar arasında ve zamanla tatmin edici bir tutarlılık sağlayabilir. Cihazın otomatikliği, CRD'nin ortaya çıkmasından önce kolaylıkla ortaya çıkarılamayacak standart bir tespiti mümkün kılabilir.

Bu, Güney Çin'de çim polen allerjenlerine duyarlılığı araştırmak için CRD yaklaşımını kullanan bir çalışmadır. Literatürdeki mevcut kanıtlara ek olarak. Bu bulguları doğrulamak için gelecek çalışmalara ihtiyaç vardır. Bununla birlikte, CRD'nin yararlı bir araç olmasına rağmen, tam otomatik immüno-analiz analizörü ile yapılan bulgular, diğer laboratuvar araştırmaları, klinik değerlendirmeler ve doktor uzmanlığının yerini almamalıdır.

Introduction

Çim poleni, immunglobulin E (IgE) ile ilişkili alerjilerin yaklaşık% 50'sini oluşturur ve havadaki yapısı nedeniyle, küresel bir alerjik hava yolu hastalıkları riski, özellikle astım ve alerjik rinit 1 , 2 , 3 , 4 etkiler. Bir bölgedeki ot polen alerjilerine karşı önleme, polen allerjenlerinin yerel dağılımı hakkında bilgilere dayanır. Ne yazık ki duyarlılaştırıcı allerjenlerin spektrumu yerden yere farklılık göstermektedir – genellikle bölgesel özgüllük olarak bilinen gözlem.

Geniş bir Doğu-Asya bölgesi olan Çin'de, otlak poleni hassasiyetinin bölgesel spesifikliği, günümüzde bu ülkenin güney kesiminde son on yıl boyunca mevcut olan sınırlı verilerle karmaşıktır5. Verilerdeki bu kadar azlık, çimen poleni sensinin genel olarak gösterilmesinde bir zorluğa neden olmuşturBu büyük ülkede tazeleme 6 . Ayrıca, Çinli güney kökenli insanlar hakkındaki çok sınırlı veriler büyük oranda kendi kendini raporlama anketlerinden, cilt prick testlerinden (laboratuvar serum testlerinden ziyade), toplam IgE ölçümlerinden (alerjen spesifik IgE'den (sIgE'den ziyade)) ve alerjenlere sIgE saptamadan ( Alerjen bileşen moleküllerinden ziyade).

Alerjik belirtilerin kendi kendine bildirilmesi, spesifik alerjenler söz konusu olduğunda güvenilmez olabilir. Deri prick testleri, yaygın olarak erişilebilir olmakla birlikte, sonuçta yorumlanmayı karıştıran diğer hassaslaştırıcı bileşenleri de içerebilen standartlaştırılmamış ham allerjen ekstraktlarının kullanılmasını içerir. Cilt prick testinin güvenilirliği, alerjik uzmanların veya uzman hemşirelerin becerikli manipülasyonuna, histamin kullanımına ve hasta uyumluluğuna (bazen küçük çocuklar için çok zor) bağlıdır. Total IgE, bir alerjinin taranması için yararlıdır ancakBir hastada alerjenleri rahatsız ediyorum. Dahası, hemen hemen tüm alerjenler bir dizi alerjen bileşeni molekülü içerir. Ana bileşenlere ( yani ev tozu akarlarından Der p 1 ve Der p 2'ye duyarlılaştırma), "gerçek" bir alerji (diğer allerjenlerle çapraz reaksiyonlardan ötürü yanlış pozitiflikten ziyade spesifik bir alerjene alerji) önerebilir, ancak duyarlılaşma Bazılarına ( örn. , Çapraz reaktif Der p 10, bir tropomiyozin) 7 olamaz.

Bileşen çözülmüş teşhis (CRD) kullanılmaya başlanmadan önce hayal kırıklığı yaratan bu gerileme, Çin'deki alerjen çalışmalarını engelledi. CRD, bir alerjenin bileşenlerini, rekombinant veya saflaştırılmış alerjen molekülleri kullanarak tam olarak algılar ve böylece ölçümü kolaylıkla nicelleştirilebilir ve karakterize edilebilir hale getirir 8 . Geçtiğimiz on yıllarda, alerji çalışmaları sıklıkla, birçok alâkasız bileşen içeren kaçınılmaz olarak allerjenlerden oluşan ham özleri kullandı. Bu ortakların birçoğuDönüşçüler etkisizdir, ancak zaman zaman, bazıları karıştırıcı olumlu reaksiyonlara neden olabilir. CRD'de rekombinant veya saflaştırılmış alerjen moleküllerinin kullanılması bunun önüne geçebilir ve bu nedenle daha iyi test doğruluğu sağlayabilir. Mikrodizilerde işlendiğinde, CRD yaklaşımı bireysel kişilerde yüzlerce allerjen molekülüne duyarlılığı hızla tarar veya tanımlar. Güney Çin'de çimlerin polen duyarlılığı üzerine iyi tasarlanmış bir CRD çalışması şimdilik eksiktir. İdeal olarak, böyle bir araştırma, Çin'de yaygın olarak bildirilen çimen polenlerini açıklayan önemli bir coğrafi kapsama alanındaki yerel bir nüfusu içermeli ve yukarıda belirtilen teknik hususlara dikkat etmelidir. Pratik düzeyde klinik önemi kazanmak ve serum örneklerinin alınmasını kolaylaştırmak için, çim polenlerine karşı inhalant allerjenlere karşı duyarlılığın erken araştırılması, genel popülasyondan ziyade allerjik solunum bozukluğu olan hastalar üzerinde yoğunlaşabilir.

Bu çalışma,CRD yaklaşımını kullanarak allerjik rinit ve / veya astımı olan Büyük Guangzhou'dan (güney Çin'in en büyük şehri ve eteklerinde) hastalardaki Bermuda çimenleri, Timothy çimi ve Humulus tarikatlarına karşı serum sIgE reaktivitesini test etmek için kullanıldı. Güney Çin'deki bu subtropikal ve ılıman çimen polenlerine duyarlılık üzerine yapılan bu bulgular şu anda literatürdeki bilgiler için önemli kanıtlar sağlamaktadır.

Protocol

İnsan serum numunesi kullanımı da dahil çalışma protokolü Guangzhou Tıp Üniversitesi'nin İlk Bağlı Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylandı. Tüm katılımcılar ya bağımsız ya da ebeveynleri aracılığıyla (çocuklarda) yazılı bilgilendirilmiş onay almayı teklif ettiler. Protokol çevrimiçi kaydedildi (Çin Klinik Araştırması Kayıt Defteri, Kayıt No: ChiCTR-DCC-13004003, http://www.chictr.org/cn/ adresine bakın). 1. Araştırmanın Nüfusunun Belirlenmesi…

Representative Results

Bu çalışmada kullanılan tam otomatik immünoassay analiz cihazı, hastadan serum örneklerinde ilgi molekülleri (sIgE) ile reaksiyona giren kovalent bağlama alerjenleri veya alerjen bileşenleri ile kaplanmış bir katı faz yapısına sahiptir. Otomatik bir program ile, analizör, 150 uL durulama çözeltisi ile tüm spesifik olmayan IgE'leri yıkar ve bunu 5 kez tekrarlar. Ardından, bir kompleks oluşturmak için enzimle işaretlenmiş anti-IgE antikorları (50 uL) ekler. En…

Discussion

Tam otomatik immüno-analizör, bölgeler, laboratuvarlar ve kurumlar arasında ve zamanla tatmin edici bir tutarlılık sağlayabilir. Böyle bir otomatik prosedürün büyük oranda tezgah araştırması ve klinik çalışmaları desteklediği, pek çok allerjen ve / veya alerjen bileşeninin standartlaştırılmış tespitini mümkün kıldığı ve muhtemel alerjen çapraz reaktivitesini, CRD'lerin gelmesinden önce kolaylıkla ortaya çıkmayacak şekilde tespit ettiği bulunmuştur. Ayrıca, tüm test prosedü…

Offenlegungen

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Yueming Su'ya figürün hazırlanmasında yardımından dolayı teşekkür ediyoruz. Bu çalışma, Guangdong Bilim ve Teknoloji Vakfı (Proje No .: 2014A020212352), Guangzhou Eğitim Bürosu (1201630044; 1201630393) ve Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC 81572063; NSFC 81601394) tarafından finanse edildi.

Materials

ImmunoCAP 1000 Instrument Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3800-01
Phadia Information Data Manager Software Package Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-11
Software Package, ImmunoCAP 1000 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-12
g2
(Bermuda grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4131-01
g6
(Timothy grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4100-01
w22
(Japanese Hop)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4452-01
g216
(nCyn d 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4972-01
g205
(rPhl p 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5234-01
g208
(nPhl p 4)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5338-01
g209
(rPhl p 6)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5289-01
g210
(rPhl p 7)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5290-01
g211
(rPhl p 11)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5291-01
g212
(rPhl p 12)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5292-01
o214
Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5339-01
Specific IgE Conjugate 400 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9310-08
Specific IgE Calibrator Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9459-08
Specific IgE Curve Control Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9312-08
Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4417-01
ImmunoCAP Specific IgE Negative Control Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9445-01
ImmunoCAP Specific IgE Control L Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9528-01
ImmunoCAP Specific IgE Control M Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9529-01
ImmunoCAP Specific IgE Control H Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9530-01
Development Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9439-08
Stop Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 34-2271-58
Washing Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9202-08
FluoroC Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9264-01
Maintenance Solution Kit Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9476-01

Referenzen

  1. Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
  2. Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
  3. Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
  4. Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
  5. Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
  6. Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
  7. Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
  8. Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
  9. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776 (2014).
  10. Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
  11. Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
  12. Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
  13. Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
  14. Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
  15. Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
  16. Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
  17. Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
  18. Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
  19. Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
  20. Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
  21. Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
  22. Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
  23. Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
  24. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
  25. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).
check_url/de/55723?article_type=t

Play Video

Diesen Artikel zitieren
Luo, W., Pan, G., Huang, H., Zheng, P., Wei, N., Zhang, Y., Zeng, G., Sun, B. A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma. J. Vis. Exp. (124), e55723, doi:10.3791/55723 (2017).

View Video