התרבות של תאים דנדריטים מיאלואידית מ מבשרי מח עצם
Summary
וידאו זה מדגים את נוהל המבדילים תאים דנדריטים מיאלואידית ממח העצם העכבר. בידוד של השוקה העכבר הירך, ועיבוד של מח העצם הם הפגינו. תמונות הוכחת מורפולוגיה תא לפני ואחרי בידול, דמויות המתארות פנוטיפ התא IL-12 בייצור התבגרות הבאות באמצעות CPG מוצגים.
Abstract
תאים דנדריטים מיאלואידית (DCS) משמשים לעתים קרובות כדי לחקור את יחסי הגומלין בין מנגנוני החיסון המולדת ובעלי כושר הסתגלות לבין תגובה מוקדמת לזיהום. כי אלה האנטיגן החזק ביותר בהצגת תאים, DCs נמצאים בשימוש יותר ויותר וקטור חיסון ללמוד את האינדוקציה של אנטיגן ספציפי התגובה החיסונית. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את הליך קצירת tibias ואת עצמות הירך של העכבר תורם, עיבוד מח עצם הבחנה DCs במבחנה. המאפיינים של שינוי בעקבות גירוי DCs: תאים דנדריטים בשלים הם phagocytes חזק, ואילו DCs בוגרים המסוגלים מצגת אנטיגן ואינטראקציה עם CD4 + ו – CD8 + T תאים. שינוי זה בפעילות תפקודית מתכתב עם upregulation של סמנים משטח התא ייצור ציטוקינים. סוכנים רבים שניתן להשתמש בהם כדי DCs בוגרים, כולל ציטוקינים חיוג כמו ligands הקולטן. בסרטון הזה אנחנו מדגימים השוואות תזרים cytometric הביטוי של שני שיתוף גירוי מולקולות, CD86 ו – CD40, ואת ציטוקינים, IL-12, בעקבות גירוי לילה עם טיפול CPG או מדומה. לאחר התמיינות, DCs ניתן להשפיע יותר כמו וקטור חיסון לשימוש או לייצר אנטיגן ספציפי על ידי המערכת החיסונית במבחנה פועם באמצעות פפטידים או חלבונים, או transduced באמצעות וקטורים ויראליים רקומביננטי.
Protocol
Discussion
DCs שימושיים מחקרים של אינטראקציות החיסון המולדת ובעלי כושר הסתגלות, והוא יכול להיות מועסקים וקטור חיסון. בסרטון הזה, אנחנו הוכיחו את הצעדים כדי לבודד מח עצם להבדיל תאים דנדריטים מיאלואידית במבחנה. בעקבות התקופה תרבות, תאים אלו יכולים להיות דמיינו מיקרוסקופית שני תאים כמו חסיד, ?…
Acknowledgements
JB נתמך על ידי studentships מן למדעי הטבע וההנדסה המועצה למחקר (NSERC). תמיכה עבור פרויקט זה סופק על ידי מכוני הבריאות הקנדית Research, גרנט MOP-67066.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| recombinant murine GM-CSF | Reagent | Peptrotech | 315-03 |
Referenzen
- Lutz, M. B., Kukutsch, N., Ogilvie, A. L., Rossner, S., Koch, F., Romani, N., Schuler, G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. J. Immunol. Methods. 223, 77-92 (1999).
- Gilboa, E. DC-based cancer vaccines. J. Clin. Invest. 117, 1195-1203 (2007).
