골수 엽 성의 전구 물질에서 골수양 돌기 세포의 문화
Summary
이 동영상은 마우스 골수에서 골수양 돌기 세포를 차별에 대한 절차를 설명합니다. 마우스 경골과 대퇴골, 그리고 골수 처리의 분리가 증명하고 있습니다. 세포 표현형 및 CPG를 사용하여 IL – 12 생산 다음과 성숙을 묘사한 분화 전후의 세포 형태를 보여주는 사진, 그림이 표시됩니다.
Abstract
골수양 돌기 세포 (DCS)은 자주 타고난과 적응 면역 메커니즘과 감염에 대한 초기 반응 사이의 상호 작용을 연구하는 데 사용됩니다. 이들은 세포를 제시 가장 강력한 항원 때문에 DC가 점점 항원 특정 면역 반응의 유도를 연구하기위한 백신 벡터로 사용되고 있습니다. 이 비디오에서는, 우리는 기증자 마우스 tibias과 대퇴골을 수확 골수을 처리하고 체외에서 DC가을 차별에 대한 절차를 설명합니다. 자극을 다음과 DC가 변화의 특성 : DC가 성숙은 CD4와 항원 프레 젠 테이션과 상호 작용 +와 CD8 + T 세포 수있는 반면 미숙 돌기 세포는 강력한 phagocytes 있습니다. 기능 활동이 변화는 세포 표면 마커 및 시토킨 생산의 upregulation과 일치. 많은 대리인은 크린 시토킨 및 수신자와 같은 수용체 리간드를 포함하여 성숙 DC가,하는 데 사용할 수 있습니다. 이 비디오에서는, 우리는 CPG 또는 모의 치료 하룻밤 자극을 다음과 같은 두 개의 공동 stimulatory 분자, CD86과 CD40, 그리고 시토킨, IL – 12의 표현의 흐름 cytometric 비교 보여줍니다. 차별화 후, DC가가 더욱 백신 벡터로 사용하기 위해 조작하거나 체외에 의해 항원 특정 면역 반응을 생성하는 펩티드 또는 단백질을 사용하여 pulsing, 또는 재조합 바이러스 벡터를 사용하여 transduced.
Protocol
Discussion
DC가이 타고난과 적응 면역의 상호 작용 연구에 유용하며, 백신 벡터로 고용하실 수 있습니다. 이 비디오에서는, 우리는 체외에서 골수를 분리하고 골수양 돌기 세포를 구별하는 단계를 증명하고있다. 문화 시대에 따라, 이들 세포는 미세 모두 자기편으로 자주 dendrites을 가지고 세포, 및 비 점착 성의 원형 세포를 시각하실 수 있습니다. DC가가 더욱 항원과 pulsing에 의해 항원 프레 젠 테이션에 대한 조작이나 크린…
Acknowledgements
JB는 자연 과학 및 공학 연구위원회 (NSERC)에서 studentships에 의해 지원됩니다. 이 프로젝트에 대한 지원은 그랜트가 걸레 – 67066, 건강 연구의 캐나다 연구소에 의해 제공되었습니다.
Materials
| Material Name | Typ | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| recombinant murine GM-CSF | Reagent | Peptrotech | 315-03 |
Referenzen
- Lutz, M. B., Kukutsch, N., Ogilvie, A. L., Rossner, S., Koch, F., Romani, N., Schuler, G. An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow. J. Immunol. Methods. 223, 77-92 (1999).
- Gilboa, E. DC-based cancer vaccines. J. Clin. Invest. 117, 1195-1203 (2007).
