Assembléia, Tuning e Uso de um microscópio de campo Apertureless Near Infrared for Imaging Protein
Summary
A montagem de um microscópio nearfield infravermelho para os agregados da proteína de imagem é descrito.
Abstract
Este trabalho tem como objetivo instruir o leitor na montagem e operação de um microscópio de campo próximo infravermelho para imagens além do limite de difração. O microscópio de campo próximo apertureless é um instrumento de espalhamento de luz do tipo que fornece espectros de infravermelho em cerca de 20 nm resolução. Uma lista completa de componentes e um protocolo passo a passo para uso é fornecida. Erros comuns na montagem e afinação do instrumento são discutidas. Um conjunto de dados representativos que mostra a estrutura secundária de uma fibrilas amilóides é apresentado.
Protocol
Background: Apertureless sonda campo próximo microscopia IR oferece imagens de alta resolução espacial. É uma técnica relativamente nova em que um feixe de infravermelho incidente é espalhada por um microscópio de força atômica afiada ponta (AFM) oscilando na freqüência de ressonância do cantilever perto da amostra. Um detector de IR coleta luz espalhada e é demodulado nesta freqüência de ressonância ou seus harmônicos. Desta forma, a dispersão do segundo plano do incidente f…
Acknowledgements
Agradecemos NSF, NSERC, NIH, e ONR.
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Citar este artículo
Paulite, M., Fakhraai, Z., Akhremitchev, B. B., Mueller, K., Walker, G. C. Assembly, Tuning and Use of an Apertureless Near Field Infrared Microscope for Protein Imaging. J. Vis. Exp. (33), e1581, doi:10.3791/1581 (2009).