白蜡窄吉丁的基因表达分析（ Agrilus planipennis）使用实时定量PCR
Summary
实时定量PCR（QRT – PCR）是一种有效的工具来诊断，在不同的昆虫组织和发育阶段的mRNA水平。在这份报告中，我们使用QRT – PCR在不同的幼虫组织确定的mRNA水平和侵入性的昆虫物种，白蜡窄吉丁的发展阶段。
Abstract
白蜡窄吉丁（EAB，<em> Agrilus planipennis</em>）是一种外来入侵害虫，已造成以百万计的白蜡树（<em>白腊</em> SPP）在北美。<strong></strong> EAB继续迅速传播和攻击灰不同年龄的树木，从成熟的树木树苗。然而，迄今为止很少或没有分子知识的EAB存在。我们感兴趣的是破译的分子为基础的生理过程，在组织水平，援助的EAB成功定植白蜡树。在这份报告中，我们有效地利用实时定量PCR（QRT – PCR），以确定在不同的幼虫组织（包括肠，脂肪体和角质层）和不同发育阶段（包括1的表达水平<sup> ST</sup-> ND</sup> – ，3<sup> RD</sup-> TH</sup>龄，prepupae和成人）的EAB。作为一个例子，一个peritrophin基因（本文命名，<em> AP – PERI1</em>）例证感兴趣的基因和核糖体蛋白（<em> AP – RP1</em>）作为内部控制。 Peritrophins围食膜/矩阵（PM），这是昆虫肠道内壁的重要组成部分。下午有多种功能，包括消化和机械保护中肠上皮细胞。
Protocol
Discussion
获得每个样品定量RT – PCR板的阈值循环（CT）的价值。为了使标准曲线，Ct值，每个稀释度获得暗算其浓度的日志。实验样品的CT值，然后到这个系列稀释标准曲线的绘制。目标数量分别计算每一个实验，即组织和发育中的表达产生不同的标准曲线。相对表达值（REVS），然后确定内部控制获得的数量（AP – RP1）除以利益的目标序列的数量（在这种情况下，AP – PERI1 ）。计算的意义，每个…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们承认卢尔德三角洲Arrueta安特克拉（昆虫学系，美国俄亥俄州立大学/ OARDC，伍斯特，俄亥俄州）提供的实验设置的帮助。我们感谢发送EAB幼虫样品贷瑞莎波兰博士（美国农业部森林服务，网络实名制）。帮助路易斯一个卡纳斯和Nuris中号阿科斯塔博士用显微镜设置赞赏。为这个项目提供了资金由国家拨俄亥俄州农业研究和发展中心，美国俄亥俄州立大学和联邦基金。
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