Summary

와튼의 덕트를 통해 마우스 턱밑 침샘의 Cannulation

Published: May 14, 2011
doi:

Summary

와튼의 덕트를 통해 마우스 턱밑 침샘의 cannulation을위한 프로토콜이 설명되어 있습니다. 본 실험은 trypan 푸른 솔루션은이 기법을 효과적으로 타겟 선에 혼합을 제공하는 방법을 보여줍니다하고, 침샘의 재생을위한 잠재적인 약물 임상 / 세포 치료 등이 새로운 접근 방법의 신뢰성을 제안하는 다이로 사용됩니다.

Abstract

심한 침샘 hypofunction 자주 Sjögren 증후군과 암 치료를 위해 자신의 머리와 목 지역에서 치료 조사를받는 사람 환자에서 발견됩니다. 이러한 xerostomia (구강 건조), dysphagia (씹는과 삼키는 장애)와 같은 환자를 경험 현상 두 그룹 심각한 치과 카리 에스, 변경 맛, 오로 – pharyngeal 감염 (칸디다 증), mucositis, 통증과 불편함.

. 침샘 하이포 – 함수의 치료를위한 재생 의학의 한 혁신적인 접근 방식은 RS 레드먼, E Mezey 2009 년 예측됩니다 줄기 세포가 직접 장애인의 기능을 되살리는에 강력한 방법으로 선 (腺)으로 cannulation로 입금 가능 기관. 아마도, 마이 그 레이션 외국 줄기 세포는 호스트 침샘의 일환으로 기능 선의 세포로 구분됩니다. 또한이 cannulation 기술은 임상 유전자 전송 어플 리케이션을위한 편법하고 효과적인 전달 방법입니다.

여기서 우리는 와튼의 덕트 (그림 1)를 통해 마우스를 턱밑 침샘에 cannulation 절차를 수행에 관련된 단계를 설명합니다. C3H 마우스 (찰스 리버, 몬트리올, QC, 캐나다)은 맥길 대학 동물 자원 센터에서 깨끗한 종래의 조건 하에서 보관되었습니다 본 실험을 위해 사용됩니다. 모든 실험은 대학 동물 관리위원회의 승인 및 동물 관리에있는 캐나다 협의회의 지침에 따라되었습니다되었습니다.

본 실험의 경우, trypan 파랑 솔루션은 29 게이지 바늘 폴리에틸렌 튜브 내부 쌌다과 인슐린 주사기를 사용하여 와튼의 덕트의 개통을 통해 선 (腺)으로 주입됩니다. 이후에, 마우스는 약을 성공적으로 선 (腺)으로 마이 그 레이션 것을 보여주기 위해 해부하는 것입니다.

Protocol

1. 절차 설명 Subcutaneously 혼합의 움직임을 방해에서 타액 분비물을 방지하기 위해 각각의 마우스에 1 μl / 0.5 MG / ML 황산 아트로 핀 일수화물의 g 체중을 (CAT # 11330, Fluka, 미국) 주사. 100 MG / ML 케타민을 20 MG / ML xylazine (피닉스 과학, AR, 미국) 솔루션의 1g / μl 체중 각 마우스를 마취 주입 내부 복막 (IP) 복부 위치에서 사용자 지정 만든 플라스틱 플랫폼에서 마…

Discussion

이 cannulation 방법을 사용하여 어려움이 주입 솔루션의 역류를 방지하는 것입니다. trypan 블루 솔루션을 일시적으로 성공적으로 침샘으로 마이 그 레이션 경우에도, 타액 분비의 혼합을 방해하고 선 밖으로 trypan 파랑 솔루션의 역류가 발생할 수 있습니다. 예방 차원에서, 타액​​의 분비를 억제하기 위해 아트로 핀을 사용하는 외에, 폴리에틸렌 정맥은 와튼의 덕트와 혼합이 예금 후에 60 초 동안 ?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 기술 상담을위한 박사 아나 Cotrim과 장비 Murshed 박사 Monzur에게 감사하고 있습니다. 이 작품은 부분적으로 건강 연구에 대한 캐나다의 연구소에 의해 투자되었다.

Materials

Name of the reagent Tipo Company Catalogue number Comments (optional)
Atropine Drug Fluka 11330 To inhibit saliva secretion
Ketamine Drug Phoenix Scientific   Sedation
Xylazine Drug Phoenix Scientific    
Polyethylene tubing (0.58 mm diameter) Tube Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems 427410 To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct.
Ultra Comfort Insulin syringe (with a 29G needle) Syringe Tyco Healthcare 600145  
4% trypan blue Stain Gibco 15250  

Referencias

  1. Fox, P. C. Acquired salivary dysfunction. Drugs and radiation. Ann N Y Acad Sci. 842, 132-137 (1998).
  2. Bhide, S. A., Miah, A. B., Harrington, K. J., Newbold, K. L., Nutting, C. M. Radiation-induced xerostomia: pathophysiology, prevention and treatment. Clin Oncol (R Coll Radiol). 21, 737-744 (2009).
  3. Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotech Histochem. 84, 253-260 (2009).
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Kuriki, Y., Liu, Y., Xia, D., Gjerde, E. M., Khalili, S., Mui, B., Zheng, C., Tran, S. D. Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton’s Duct. J. Vis. Exp. (51), e3074, doi:10.3791/3074 (2011).

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