Катетеризации из Мышь подчелюстные слюнные железы через Канальные Уортон
Summary
Протокол для катетеризации из мыши подчелюстной слюнной железы через проток Уортон описано. Для этого эксперимента, решение трипанового синего используется как краситель, чтобы продемонстрировать, как эта техника эффективно обеспечивает вливаний в целевых железы, и предложить надежность этого нового подхода, как потенциальные клинические наркотиков / клеточной терапии для регенерации слюнных желез.
Abstract
Тяжелые слюнные железы гипофункция часто встречается у пациентов с синдромом Шегрена и те, кто получают терапевтическое облучение в их головы и шеи регионов для лечения рака. Обе группы пациентов испытывают такие симптомы, как сухость во рту (сухость во рту), дисфагия (нарушение жевания и глотания), тяжелая кариес зубов, изменения вкуса, орально-глоточной инфекции (кандидоз), мукозит, боль и дискомфорт.
Один инновационный подход регенеративной медицины для лечения слюнной железы гипо-функция спекуляций в RS Редман, E Mezey и др. 2009:. Стволовые клетки могут быть напрямую, сданный на хранение катетеризации в железе как мощный метод в возрождении функции нарушенной органа. Можно предположить, что миграция иностранных стволовых клеток дифференцироваться в железистых клеток функционировать как часть хост слюнные железы. Кроме того, эта техника катетеризации целесообразным и эффективным способ доставки для клинического применения переноса генов.
Здесь мы проиллюстрируем этапы выполнения катетеризации процедуру на мышь подчелюстной слюнной железы через проток Уортон (рис. 1). C3H мышей (Charles River, Монреаль, Квебек, Канада) используются для этого эксперимента, которые были сохранены в чистых обычных условиях в Университете Макгилла ресурсного центра животного. Все эксперименты были одобрены Комитетом Уход животных университета и были в соответствии с руководящими принципами Канадского совета по уходу за животными.
Для этого эксперимента трипанового синего решение вливаются в железы через открытие канала Wharton, используя инсулиновый шприц с 29-иглы заключенная внутри полиэтиленовой трубы. Впоследствии мышь расчлененный показать, что вливания мигрировали в железе успешно.
Protocol
Discussion
Затруднения при использовании этого метода катетеризации является предотвращение обратного потока вводят раствор. Даже если трипанового синий раствор временно перекочевал в слюнной железы успешно, слюны секреции могут помешать настои и вызывать обратный поток трипанового синий ра?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы выражают благодарность доктору Ана Cotrim для технических консультаций и доктору Monzur Муршед для оборудования. Эта работа была частично финансируется Канадским института исследований в области здравоохранения.
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Atropine | Drug | Fluka | 11330 | To inhibit saliva secretion |
| Ketamine | Drug | Phoenix Scientific | Sedation | |
| Xylazine | Drug | Phoenix Scientific | ||
| Polyethylene tubing (0.58 mm diameter) | Tube | Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems | 427410 | To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct. |
| Ultra Comfort Insulin syringe (with a 29G needle) | Syringe | Tyco Healthcare | 600145 | |
| 4% trypan blue | Stain | Gibco | 15250 |
Referencias
- Fox, P. C. Acquired salivary dysfunction. Drugs and radiation. Ann N Y Acad Sci. 842, 132-137 (1998).
- Bhide, S. A., Miah, A. B., Harrington, K. J., Newbold, K. L., Nutting, C. M. Radiation-induced xerostomia: pathophysiology, prevention and treatment. Clin Oncol (R Coll Radiol). 21, 737-744 (2009).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotech Histochem. 84, 253-260 (2009).
