Summary

Fabbricazione e applicazione di Rosa Bengala-chitosano Films in riparazione dei tessuti Laser

Published: October 23, 2012
doi:

Summary

Le suture sono di solito necessari per riparare il tessuto durante gli interventi chirurgici. Tuttavia, la loro applicazione può essere problematico in quanto sono invasivi e possono danneggiare il tessuto. I metodi di fabbricazione e l'applicazione di un adesivo tessuto romanzo sono qui riportati. Questo film adesivo viene laser-attivata e non richiede l'uso di suture.

Abstract

Bonding tessuto fotochimica (PTB) è una tecnica di sutura per la riparazione dei tessuti, che si ottiene applicando una soluzione di rosa bengala (RB) tra 1,2 tissue due bordi. Questi sono poi irradiata da un laser che viene selettivamente assorbito dal RB. La reazione risultante fotochimiche presumibilmente reticolare le fibre di collagene nel tessuto con minima produzione di calore 3. In questo rapporto, RB è stato inserito nel film sottili di chitosano per fabbricare un adesivo nuovo tessuto che è laser-attivato. Pellicole adesive, a base di chitosano e contenente RB ~ 0,1% in peso, sono fabbricati e incollate intestino di vitello e nervi tibiale ratto da un laser a stato solido (λ = 532 nm, Fluence ~ 110 J / cm 2, spot size ~ 0,5 cm) . Una colonna singola tensiometro, interfacciato con un personal computer, viene utilizzato per testare la resistenza della giunzione. Le RB-chitosano legami adesivi con fermezza verso l'intestino con una forza di 15 ± 6 kPa, (n = 30). La resistenza di adesione scende a 2 eplusmn; 2 kPa (n = 30), quando il laser non viene applicato l'adesivo. L'anastomosi di nervi tibiali possono essere anche completata senza l'uso di suture. Un romanzo chitosano adesivo è stato fabbricato che legami fotochimicamente al tessuto e non richiede suture.

Protocol

1. Chitosano adesivo Preparazione La polvere chitosano è solubile in soluzione di acido acetico, per la preparazione di una soluzione stock di acido acetico (2% v / v), aggiungere 10 ml di acido acetico glaciale a 490 ml di acqua deionizzata (DI-H 2 O). Per la preparazione di una soluzione stock di Rosa Bengala (RB) (0,01% w / v) in acido acetico, pesare 5 mg di RB in un flaconcino avvolto con un foglio di alluminio per evitare fotodecolorazione. Aggiungere 0,5 ml di DI-H 2 O …

Discussion

La rosa fabbricazione adesivo è basato su un semplice processo a secco-cast, sebbene la dissoluzione di RB a pH acido richiede prolungata agitazione della soluzione di chitosano. È importante lasciare asciugare la soluzione fino a diventare una pellicola insolubile in acqua. Ciò avviene quando il contenuto di acqua peso ~ 10% nel film secco 6. Pellicole insolubili vengono solitamente ottenuti 2 settimane dopo secco colata in condizioni standard di temperatura e pressione (~ 25 ° C e 1 atm ~). Il meccanism…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto dal Research Grant UWS.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Rose Bengal Sigma-Aldrich 632-69-9
Chitosan (medium MW) Sigma-Aldrich 10318AJ
Glacial acetic acid Sigma-Aldrich 08050051 2% v/v in DI water
Magnetic stirrer Heidolph MR Hei-Mix S
Centrifuge Beckman Coulter Allegra X-12R
Spectrophotometer Varian Cary 4000 UV-Visible
Laser CNI Laser MGL-532
Micrometer Mitutoyo Series 227
Surgical microscope Zeiss OPMI

Referencias

  1. O’Neill, A. C., Winograd, J. M. Microvascular anastomosis using a photochemical tissue bonding technique. Lasers Surg. Med. 39, 716-722 (2007).
  2. Yao, M., Yaroslavsky, A. Phototoxicity is not associated with photochemical tissue bonding of skin. Lasers Surg. Med. 42, 123-131 (2010).
  3. Lauto, A., Mawad, D. Photochemical Tissue Bonding with Chitosan Adhesive Films. Biomedical Engineering OnLine. 9, 47 (2010).
  4. Chan, B. P., Kochevar, I. E. Enhancement of porcine skin graft adherence using a light-activated process. J. Surg. Res. 108, 77-84 (2002).
  5. Lauto, A., Faster, L. J. Sutureless nerve repair with laser-activated chitosan adhesive: a pilot in vivo study. Photomed. Laser Surg. 26, 227-234 (2008).
  6. Lauto, A., Hook, J. Chitosan adhesive for laser tissue repair: in vitro characterization. Lasers Surg. Med. 36, 193-201 (2005).
  7. Au, V., Madison, S. A. Effects of singlet oxygen on the extracellular matrix protein collagen: oxidation of the collagen crosslink histidinohydroxylysinonorleucine and histidine. Arch. Biochem. Biophys. 384, 133-142 (2000).
  8. Encinas, M. V., Rufs, A. M. Xanthene dyes/amine as photoinitiators of radical polymerization: A comparative and photochemical study in aqueous medium. Polymer. 13, 2762-2767 (2009).
  9. Pini, R., Rossi, F. A new technique for the closure of the lens capsule by laser welding. Ophtalmic Surgery Lasers & Imaging. 39, 260-2626 (2008).
  10. Wieken, K., Angioi-Duprez, K., Lim, A. Nerve anastomosis with glue: comparative histologic study of fibrin and cyanoacrylate glue. J. Reconstr. Microsurg. 19, 17-20 (2003).
  11. Menovsky, T., Beek, J. F. Laser, fibrin glue, or suture repair of peripheral nerves: a comparative functional, histological, and morphometric study in the rat sciatic nerve. J. Neurosurg. 95, 694-699 (2001).
  12. García, P., Jorge, H. E. Comparative study of the mechanical behavior of a cyanoacrylate and a bioadhesive. J. Mater. Sci. Mater. Med. 15, 109-115 (2004).
  13. Lauto, A. Integration of extracellular matrix with chitosan adhesive film for sutureless tissue fixation. Lasers Surg. Med. 41, 366-371 (2009).
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Lauto, A., Stoodley, M., Barton, M., Morley, J. W., Mahns, D. A., Longo, L., Mawad, D. Fabrication and Application of Rose Bengal-chitosan Films in Laser Tissue Repair. J. Vis. Exp. (68), e4158, doi:10.3791/4158 (2012).

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