Summary

Fabricação e Aplicação de Rosa Bengala-quitosana Films em Reparo de Tecidos Laser

Published: October 23, 2012
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Summary

Suturas são normalmente necessários para reparar o tecido durante procedimentos cirúrgicos. No entanto, a sua aplicação pode ser problemática uma vez que são invasivos e pode danificar o tecido. Os métodos de fabricação e aplicação de um adesivo de tecido romance são aqui relatados. Esta película adesiva é activada por laser e não requer o uso de suturas.

Abstract

Colagem de tecidos fotoquímica (PTB) é uma técnica de sutura para a reparação de tecidos, o que é conseguido através da aplicação de uma solução de rose bengal (RB) entre duas extremidades de tecido 1,2. Estes são depois irradiadas por um laser que é selectivamente absorvido pelo RB. As reações fotoquímicas resultantes supostamente crosslink as fibras de colágeno no tecido com 3 mínima produção de calor. Neste relatório, RB, foi incorporada em filmes finos de quitosano para o fabrico de um adesivo de tecido novo que é activado por laser. Películas adesivas, com base em quitosano e contendo ~ 0,1% em peso de LD, são fabricados e ligados ao intestino de vitelo e os nervos tibiais de ratos por um laser de estado sólido (λ = 532 nm, de fluência ~ 110 J / cm 2, tamanho do ponto ~ 0,5 cm) . Um tensiómetro de coluna única, em interface com um computador pessoal, é utilizado para testar a resistência de ligação. Os RB-quitosano ligações adesivas com firmeza para o intestino com uma força de 15 ± 6 kPa, (n = 30). A força de adesão diminui para 2 ± 2 kPa (n = 30) em que o laser não é aplicada ao adesivo. A anastomose de nervos tibial pode ser igualmente concluída sem a utilização de suturas. A novel quitosana adesivo ter sido fabricado que os títulos fotoquimicamente ao tecido e não requer sutura.

Protocol

1. Quitosana Preparação adesiva O pó de quitosano é solúvel em solução de ácido acético, para a preparação de uma solução mãe de ácido acético (2% v / v), adicionar 10 ml de ácido acético glacial e 490 ml de água desionizada (DI-H 2 O). Para a preparação de uma solução stock de Rose Bengal (RB) (0,01% w / v) em ácido acético, pesar 5 mg de RB em um frasco envolto com folha de alumínio para evitar a fotodegradação. Adicionar 0,5 ml de O 2 DI-H para di…

Discussion

A rosa fabricação adesivo é baseado num processo de seca-molde simples, embora a dissolução do RB em pH ácido requer agitação prolongada de solução de quitosano. É importante deixar a solução secar-se até se tornar uma película insolúvel em água. Isto acontece quando o teor em água de peso é de ~ 10%, em que o filme seco 6. Filmes insolúveis são geralmente obtidas duas semanas após a seca-casting em condições padrão de temperatura e pressão (~ 25 ° C e ~ 1 atm). O mecanismo de liga?…

Divulgaciones

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho foi apoiado pela Research Grant UWS.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Rose Bengal Sigma-Aldrich 632-69-9
Chitosan (medium MW) Sigma-Aldrich 10318AJ
Glacial acetic acid Sigma-Aldrich 08050051 2% v/v in DI water
Magnetic stirrer Heidolph MR Hei-Mix S
Centrifuge Beckman Coulter Allegra X-12R
Spectrophotometer Varian Cary 4000 UV-Visible
Laser CNI Laser MGL-532
Micrometer Mitutoyo Series 227
Surgical microscope Zeiss OPMI

Referencias

  1. O’Neill, A. C., Winograd, J. M. Microvascular anastomosis using a photochemical tissue bonding technique. Lasers Surg. Med. 39, 716-722 (2007).
  2. Yao, M., Yaroslavsky, A. Phototoxicity is not associated with photochemical tissue bonding of skin. Lasers Surg. Med. 42, 123-131 (2010).
  3. Lauto, A., Mawad, D. Photochemical Tissue Bonding with Chitosan Adhesive Films. Biomedical Engineering OnLine. 9, 47 (2010).
  4. Chan, B. P., Kochevar, I. E. Enhancement of porcine skin graft adherence using a light-activated process. J. Surg. Res. 108, 77-84 (2002).
  5. Lauto, A., Faster, L. J. Sutureless nerve repair with laser-activated chitosan adhesive: a pilot in vivo study. Photomed. Laser Surg. 26, 227-234 (2008).
  6. Lauto, A., Hook, J. Chitosan adhesive for laser tissue repair: in vitro characterization. Lasers Surg. Med. 36, 193-201 (2005).
  7. Au, V., Madison, S. A. Effects of singlet oxygen on the extracellular matrix protein collagen: oxidation of the collagen crosslink histidinohydroxylysinonorleucine and histidine. Arch. Biochem. Biophys. 384, 133-142 (2000).
  8. Encinas, M. V., Rufs, A. M. Xanthene dyes/amine as photoinitiators of radical polymerization: A comparative and photochemical study in aqueous medium. Polymer. 13, 2762-2767 (2009).
  9. Pini, R., Rossi, F. A new technique for the closure of the lens capsule by laser welding. Ophtalmic Surgery Lasers & Imaging. 39, 260-2626 (2008).
  10. Wieken, K., Angioi-Duprez, K., Lim, A. Nerve anastomosis with glue: comparative histologic study of fibrin and cyanoacrylate glue. J. Reconstr. Microsurg. 19, 17-20 (2003).
  11. Menovsky, T., Beek, J. F. Laser, fibrin glue, or suture repair of peripheral nerves: a comparative functional, histological, and morphometric study in the rat sciatic nerve. J. Neurosurg. 95, 694-699 (2001).
  12. García, P., Jorge, H. E. Comparative study of the mechanical behavior of a cyanoacrylate and a bioadhesive. J. Mater. Sci. Mater. Med. 15, 109-115 (2004).
  13. Lauto, A. Integration of extracellular matrix with chitosan adhesive film for sutureless tissue fixation. Lasers Surg. Med. 41, 366-371 (2009).
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Lauto, A., Stoodley, M., Barton, M., Morley, J. W., Mahns, D. A., Longo, L., Mawad, D. Fabrication and Application of Rose Bengal-chitosan Films in Laser Tissue Repair. J. Vis. Exp. (68), e4158, doi:10.3791/4158 (2012).

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