ESLP를 위한 어린 돼지 모델에서의 좌측 폐 정형외과적 이식
Summary
이 프로토콜은 ESLP 연구와 함께 사용하도록 설계된 기형외과 좌측 폐 동종 이식의 어린 돼지 모델을 설명합니다. 마취 및 수술 기술뿐만 아니라 중요한 단계 및 문제 해결에 중점을 둡니다.
Abstract
폐 이식은 말기 폐 질환의 황금 표준 치료법으로, 전 세계적으로 매년 4,600건 이상의 폐 이식이 시행되고 있습니다. 그러나 폐 이식은 기증 장기의 부족으로 인해 제한되어 있습니다. 따라서 대기자 명단 사망률이 높습니다. 상피내 폐 관류(ESLP)는 일부 센터에서 기증자의 폐 사용률을 15%-20% 증가시켰습니다. ESLP는 한계 기증자 폐를 평가하고 재조정하는 방법으로 적용되었으며 확장 기준 기증자(ECD) 폐 이식 후 수용 가능한 단기 및 장기 결과를 입증했습니다. 진행 중인 in vitro 연구 결과를 검증하기 위해 대동물( in vivo ) 이식 모델이 필요합니다. 인간과 돼지 사이의 해부학적 및 생리학적 차이는 상당한 기술적, 마취적 문제를 야기합니다. 쉽게 재현 가능한 이식 모델은 현재 ESLP 전략의 생체 내 검증과 기증자의 폐 기능을 개선하기 위해 고안된 다양한 중재의 전임상 평가를 가능하게 합니다. 이 프로토콜은 orthotopic left lung allotransplantation의 돼지 모델을 설명합니다. 여기에는 마취 및 수술 기술, 맞춤형 수술 체크리스트, 문제 해결, 수정, 접근 방식의 이점과 한계가 포함됩니다.
Introduction
폐 이식은 말기 폐 질환의 탁월한 장기 치료법입니다. 전 세계적으로 매년 4,600건 이상의 폐 이식 수술이 시행되고있습니다 1. 그러나 현재 폐 이식은 상당한 한계가 있습니다. 우선, 장기의 필요성이 기증 가능한 사람을 계속 능가하고 있습니다. 2012년 이후 폐 이식 대상자 증가, 기증자 수 증가, 회수된 장기의 사용 개선 등의 복합적인 효과로 인해 폐 이식 비율이 매년 증가하고 있음에도 불구하고 이식 대기자 사망률은 크게 감소하지 않았다2. 장기 품질 문제는 또 다른 주요 한계로, 보고된 장기 이용률이 20%-30%에 불과합니다3,4,5. 마지막으로, 폐 이식의 수술 후 결과의 경향은 만족스럽지 못하며, 장기 이식 및 환자 결과는 여전히 다른 고형 장기 이식에 비해 뒤처져 있다2.
새로운 기술인 상피내 폐 관류(ESLP)는 이러한 한계를 완화할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. ESLP는 한계 기증자 폐를 평가하고 재조정하는 방법으로 점점 더 많이 적용되고 있으며, ECD(extended criteria donor) 폐 이식 후 수용 가능한 단기 및 장기 결과를 보여주었습니다 6,7,8,9,10. 결과적으로 ESLP는 일부 센터의 이용률을 15%-20%6,7,8,9,10,11 증가시켰습니다.
적절한 ESLP 연구는 in vitro 결과의 in vivo 검증을 필요로 합니다. 그러나 ESLP12,13,14,15에 대한 돼지 폐 이식 모델에 대한 문헌은 제한적이다. 또한, 이용 가능한 문헌은 혈류역학적으로 매우 불안정할 수 있는 폐 이식을 위한 요크셔 돼지의 마취 관리에 대한 세부 정보가 불충분하다12,13,14,15. 쉽게 재현 가능한 모델을 구축하면 현재 ESLP 전략의 생체 내 검증과 폐 허혈 재관류 손상을 줄이기 위한 다양한 중재의 전임상 평가가 가능합니다. 본 연구의 목적은 ESLP와 함께 사용하기 위한 기형외과 좌측 폐 동종 이식의 돼지 모델을 설명하는 것입니다. 프로토콜에는 마취 및 수술 기술에 대한 설명, 맞춤형 수술 체크리스트, 문제 해결 경험 및 프로토콜 수정에 대한 세부 정보가 포함됩니다. 좌측 폐 돼지 이식 모델의 한계와 이점도 이 연구에서 논의되었습니다. 이 원고는 35-50kg의 요크셔 돼지에서 돼지 폐를 채취하는 과정을 설명하지 않으며, ESLP의 설립과 종료에 대해서도 다루지 않습니다. 이 프로토콜은 수혜자 이식 수술만을 다룹니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 프로토콜에는 몇 가지 중요한 수술 단계가 포함되며 성공적인 이식 및 폐 평가를 위해서는 문제 해결이 필요합니다. 어린 돼지 폐는 성인 인간의 폐에 비해 매우 연약하기 때문에 수술 의사는 돼지 폐를 다룰 때 주의해야 합니다. ESLP를 12시간 동안 실행하면 장기가 체액의 양을 흡수하고 과도한 조작으로 인한 부상에 취약하기 때문에 특히 그렇습니다. 과도한 압력은 실험용 폐에 무기폐 또는 ?…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 대학 병원 재단을 대신하여 자금을 지원합니다.
Materials
| ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer | Radiometer | 989-963 | |
| Adult-Pediatric Electrostatic Filter HME – Small | Covidien | 352/5877 | |
| Allison Lung Retractor | Pilling | 341679 | |
| Arterial Filter | SORIN GROUP | 01706/03 | |
| Backhaus Towel Clamp | Pilling | 454300 | |
| Bovine Serum Albumin | MP biomedicals | 218057791 | |
| Biomedicus Pump | Maquet | BPX-80 | |
| Bronchoscope | |||
| Cable Ties – White 12” | HUASU International | HS4830001 | |
| Calcium Chloride | Fisher Scientific | C69-500G | |
| Cooley Sternal Retractor | Pilling | 341162 | |
| CUSHING Gutschdressing Forceps | Pilling | 466200 | |
| Debakey-Metzenbaum Dissecting | Pilling | 342202 | |
| Scissors | Pilling | 342202 | |
| DeBakey Peripheral Vascular Clamp | Pilling | 353535 | |
| Debakey Straight Vascular Tissue Forceps | Pilling | 351808 | |
| D-glucose | Sigma-Aldrich | G5767-500G | |
| Drop sucker | |||
| Endotracheal Tube 9.0mm CUFD | Mallinckrodt | 9590E | |
| Flow Transducer | BIO-PROBE | TX 40 | |
| Infusion Pump | Baxter | AS50 | |
| Inspire 7 M Hollow Fiber Membrane Oxygenator | SORIN GROUP | K190690 | |
| Intercept Tubing Connector 3/8" x 1/2" | Medtronic | 6013 | |
| Intercept Tubing 1/4" x 1/16" x 8' | Medtronic | 3108 | |
| Intercept Tubing 3/8" x 3/32" x 6' | Medtronic | 3506 | |
| Laryngoscope | N/A | N/A | Custom-made with 10-inch blade |
| Metzenbaum Dissecting Scissors | Pilling | 460420 | |
| Medical Carbon Dioxide Tank | Praxair | 5823115 | |
| Medical Oxygen Tank | Praxair | 2014408 | |
| Medical Nitrogen Tank | Praxair | NI M-K | |
| Mosquito Clamp | Pilling | 181816 | |
| Harken Auricle Clamp | |||
| Organ Chamber | Tevosol | ||
| PlasmaLyte A | Baxter | TB2544 | |
| Poole Suction Tube | Pilling | 162212 | |
| Potassium Phosphate | Fischer Scientific | P285-500G | |
| PERFADEX Plus | XVIVO | 19811 | |
| Satinsky Clamp | Pilling | 354002 | |
| Scale | TANITA | KD4063611 | |
| Silicon Support Membrane | Tevosol | ||
| Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich | 792519-1KG | |
| Sodium Chloride 0.9% | Baxter | JB1324 | |
| Sorin XTRA Cell Saver | SORIN GROUP | 75221 | |
| Sternal Saw | Stryker | 6207 | |
| Surgical Electrocautery Device | Kls Martin | ME411 | |
| TruWave Pressure Transducer | Edwards | VSYPX272 | |
| Two-Lumen Central Venous Catheter 7fr X2 | Arrowg+ard | CS-12702-E | |
| Vorse Tubing Clamp | Pilling | 351377 | |
| Willauer-Deaver Retractor | Pilling | 341720 | |
| Yankauer Suction Tube | Pilling | 162300 | |
| 0 ETHIBOND Green 1X36" Endo Loop 0 | ETHICON | D8573 | |
| 0 PDS II CP-1 2×27” | ETHICON | Z467H | |
| 1 VICRYL MO-4 1×18” | ETHICON | J702D | |
| 2-0 SILK Black 12" x 18" Strands | ETHICON | SA77G | |
| 4-0 PROLENE Blue TF 1×24” | ETHICON | 8204H | |
| 6-0 PROLENE Blue BV 2×30” | ETHICON | M8776 | |
| 21-Gauge Needle |
Referencias
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