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凝胶纯化
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Descripción
胶纯化用于回收电泳分离的DNA片段。从琼脂糖凝胶中回收DNA包括三个基本步骤：在硅胶柱上进行结合，清洗和洗脱。高盐环境下，DNA会通过盐桥结合到硅胶上，清洗掉不纯的物质后，再用低盐条件破坏这种相互作用从而将DNA洗脱下来。
本短片讲述了常用胶回收的基本步骤，从胶中将DNA带切割出来，溶解胶，用硅胶柱结合并洗脱下纯化的DNA。此外，该短片还讨论了要保证胶回收成功的几个技巧，包括跑胶中用上已知分子量大小的DNA标准样的重要性。
Procedimiento
胶纯化是用来在琼脂糖凝胶中回收电泳分离的DNA片段的标准步骤。将胶溶解后，让它通过一种特殊的滤膜，这一步骤使得DNA与其他杂质，如盐，游离核苷酸，酶等分离开，从而可以进行下游的应用操作。 从琼脂糖凝胶中回收DNA的基本原理涉及到一系列的结合，清洗和洗脱步骤。当胶完全溶解在溶解缓冲液中后，上样到一个“离心柱”上，它通过离心可使DNA分子特异性的结…
Divulgaciones
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Transcripción
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Gel PurificationDNA RecoveryAgarose GelElectrophoretic SeparationSpecialized FilterImpuritiesDownstream ApplicationsBindWashEluteSilica-filterCentrifugationSolubilizing BufferSalt ConcentrationCation Salt BridgeNegative ChargesEthanol WashElutionPurified DNACasting Agarose GelElectrophoresisUV Light VisualizationMolecular Weight Comparison
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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Gel Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
