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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Educación científica Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Gel Purification
  • 00:00Descripción
  • 00:39Gel Purification: Basic Principles
  • 01:51The Gel Purification Procedure
  • 04:51Application
  • 06:04Summary

Purification sur gel

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Descripción

La purification sur gel est utilisée pour récupérer des fragments d’ADN après séparation par électrophorèse. La récupération d’ADN à partir d’un gel d’agarose inclu trois étapes de base: la liaison, le lavage et l’élution depuis une colonne de silice. Il est communément accepté que l’ADN se lie à la silice en présence d’une haute teneur en sel via un pont salé. Après la liaison, l’ADN est lavé des impuretés et élué sous des conditions faible en sel perturbant cette interaction.

Cette vidéo passe en revue une procédure généralisée étape par étape pour la coupe d’une bande de gel, la solubilisation du gel, la purification via l’attache à une colonne de silice et l’élution de l’ADN purifié. En plus, la présentation parle de plusieurs conseils pour assurer le succès de la purification à partir de gel, incluant l’importance de l’exécution d’un gel d’agarose avec un marqueur ou une échelle qui a l’ADN de tailles connues.

Procedimiento

La purification sur gel est une procédure standard pour récupérer les fragments d’ADN désirés, depuis des gels d’agarose, après séparation par électrophorèse. Après dissolution du fragment de gel et son passage à travers un filtre spécialisé, cette procédure laisse l’ADN libéré des impuretés telles que les sels, les nucléotides et enzymes libres, et prêts pour des utilisations ultérieures. Le principe de base derrière la récupération d’ADN à partir d’un gel d’agaro…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Gel Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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