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겔 추출
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Descripción
겔 정제는 전기 전구 분리 후 DNA 단편을 복구하는 데 사용됩니다. 아가로즈 젤에서 DNA 회복은 실리카 컬럼에서 결합, 세척 및 용례의 세 가지 기본 단계를 포함한다. DNA는 소금 다리를 통해 높은 소금의 존재에 실리카에 결합하는 것으로 추정된다. 결합 다음, DNA는 불순물의 세척이 상호 작용을 방해 낮은 소금 조건하에서 용출된다.
이 비디오는 젤에서 밴드를 절단하기위한 단계별 일반화 절차를 거치며, 젤 용해화, 실리카 기둥에 결합을 통한 정제 및 정제 된 DNA의 용출을 통해 전달됩니다. 또한, 프리젠 테이션은 알려진 크기의 DNA가마커 또는 사다리와 아가로즈 젤을 실행하는 중요성을 포함하여 성공적인 젤 정화를 보장하기위한 몇 가지 팁을 논의한다.
Procedimiento
겔 정제는 전기전광 분리 후 아가로즈 겔로부터 원하는 DNA 단편을 회수하기 위해 수행된 표준 절차이다. 젤 단편을 용해하고 특수 필터를 통해 실행 한 후,이 절차는 다운스트림 응용 프로그램에 적합한 소금, 무료 뉴클레오티드 및 효소와 같은 불순물에서 해방 된 DNA를 산출합니다. 아가로즈 젤에서 DNA 복구 뒤에 기본 원리는 결합의 순서를 포함, 세척, 그리고 엘ute 단계….
Divulgaciones
No conflicts of interest declared.
Transcripción
Tags
Gel PurificationDNA RecoveryAgarose GelElectrophoretic SeparationSpecialized FilterImpuritiesDownstream ApplicationsBindWashEluteSilica-filterCentrifugationSolubilizing BufferSalt ConcentrationCation Salt BridgeNegative ChargesEthanol WashElutionPurified DNACasting Agarose GelElectrophoresisUV Light VisualizationMolecular Weight Comparison
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Gel Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
